一种胆红素氧化酶固体发酵方法

    公开(公告)号:CN101974496A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010529896.4

    申请日:2010-11-03

    Abstract: 本发明公开了一种胆红素氧化酶固体发酵方法,本发明的目的是提供一种成本低,生产过程简单,酶提取方便的胆红素氧化酶固体发酵方法。(1)从土壤中分离筛选出露湿漆斑菌,并制出露湿漆斑菌孢子悬浮液;(2)称取3-7重量份的麸皮置于三角瓶中,然后加入13-17重量份的蒸馏水,用玻棒将麸皮和蒸馏水搅拌均匀,121~130℃高压灭菌20~30分钟,冷却后,接入用步骤(1)培养出的1~5重量份的孢子悬浮液,在培养温度为22℃~31℃,培养时间为7~11天后,取出培养后的三角瓶,在三角瓶中加入50-70重量份的蒸馏水,用摇床振荡浸提2-4小时,用定性滤纸过滤即得胆红素氧化酶粗酶液。本发明所用原料来源丰富、易取,生产成本低,酶提取的工艺简便易行,生产过程节能环保。

    一种基于红鳍东方鲀FoxO1基因的重组蛋白、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN103709242B

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201310729525.4

    申请日:2013-12-25

    Abstract: 本发明公开了一种基于红鳍东方鲀FoxO1基因的重组蛋白、制备方法及应用,属于生物技术领域。本发明根据红鳍东方鲀FoxO1蛋白的cDNA编码序列,设计针对红鳍东方鲀FoxO1蛋白编码序列的引物对,以ISOGEN Reagent提取红鳍东方鲀肝脏总RNA后进行RT-PCR扩增。RT-PCR产物与pGEM-T载体连接得重组质粒,经双酶切后目的基因再与表达载体pET-32a(+)连接,获重组表达质粒并转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中;通过IPTG诱导实现了重组蛋白的可溶性表达。本发明中的红鳍东方鲀FoxO1重组蛋白能抑制过氧化物酶体增殖体激活受体PPARγ基因的表达,调节红鳍东方鲀体内脂类代谢平衡。纯化的重组产物对鱼类进行活体注射或饲料添加,能改善养殖鱼类的生长及降低鱼的脂质含量,使肉质鲜美可口。

    一种基于红鳍东方鲀FoxO1基因的重组蛋白、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN103709242A

    公开(公告)日:2014-04-09

    申请号:CN201310729525.4

    申请日:2013-12-25

    CPC classification number: C07K14/461 C12N15/70

    Abstract: 本发明公开了一种基于红鳍东方鲀FoxO1基因的重组蛋白、制备方法及应用,属于生物技术领域。本发明根据红鳍东方鲀FoxO1蛋白的cDNA编码序列,设计针对红鳍东方鲀FoxO1蛋白编码序列的引物对,以ISOGEN Reagent提取红鳍东方鲀肝脏总RNA后进行RT-PCR扩增。RT-PCR产物与pGEM-T载体连接得重组质粒,经双酶切后目的基因再与表达载体pET-32a(+)连接,获重组表达质粒并转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中;通过IPTG诱导实现了重组蛋白的可溶性表达。本发明中的红鳍东方鲀FoxO1重组蛋白能抑制过氧化物酶体增殖体激活受体PPARγ基因的表达,调节红鳍东方鲀体内脂类代谢平衡。纯化的重组产物对鱼类进行活体注射或饲料添加,能改善养殖鱼类的生长及降低鱼的脂质含量,使肉质鲜美可口。

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