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公开(公告)号：CN106834482A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710103595.7
申请日：2017-02-24
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12Q1/68 , C12N15/11 , A61K45/06 , A61K31/475 , A61P35/00
CPC classification number: C12Q1/6886 , A61K31/475 , A61K45/06 , C12Q2600/106 , C12Q2600/136 , C12Q2600/158 , C12Q2600/178
Abstract: 本发明公开了一种用于检测miR‑874‑3p表达的引物、试剂盒、检测方法及应用，属于肿瘤生物治疗技术领域。本发明通过试验证实miR‑874‑3p与长春新碱的耐药性相关，在长春新碱耐药细胞中高表达、敏感细胞中低表达，因此可以作为肿瘤细胞长春新碱耐药的标志物。根据该标志物设计的引物、试剂盒及检测方法可用于临床判断肿瘤细胞对长春新碱的耐药性，进一步指导临床用药并实现精准治疗。
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公开(公告)号：CN109628489A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201910012271.1
申请日：2019-01-07
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/67 , C12N15/113
CPC classification number: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/67 , C12N2310/141
Abstract: 本发明涉及一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法及其应用，表达载体、表达系统及其制备方法，属于基因工程技术领域。本发明中的方法应用CHO细胞内源miRNAs与3′‑UTR转录区互补结合来对筛选标记基因表达进行负性调节，进而提高目的基因的表达量。将miRNAs与3′‑UTR转录区克隆到筛选标记基因的下游，构建真核表达载体；然后将目的基因克隆到真核表达载体获得重组表达载体，然后将其转染细胞，获得CHO细胞表达系统，实现目的基因的高效表达。本发明的CHO细胞表达系统，可以显著提高目的基因在CHO细胞中的表达水平，实现目的蛋白在CHO细胞的高产量稳定表达。
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公开(公告)号：CN106544361B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201611109050.9
申请日：2016-12-02
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明公开了一种哺乳动物细胞表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程技术领域。该表达载体包含TOP1 MAR序列(GenBank：L23999.1)，通过将外源目的基因插入载体的多克隆位点，能够构建TOP1 MAR‑启动子‑外源基因‑Poly A、启动子‑外源基因‑Poly A‑TOP1 MAR或者TOP1 MAR‑启动子‑外源基因‑Poly A‑TOP1 MAR载体结构，一方面克服转基因沉默，另一方面介导外源基因在宿主细胞中稳定、高效、持久表达。同等条件下，与不含MAR以及含1‑68 MAR的载体相比，本发明中表达载体能显著提高外源基因的表达水平，可用于重组蛋白的生产等。
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公开(公告)号：CN106544361A
公开(公告)日：2017-03-29
申请号：CN201611109050.9
申请日：2016-12-02
Applicant: 新乡医学院
CPC classification number: C12N15/85 , C12N2800/107
Abstract: 本发明公开了一种哺乳动物细胞表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程技术领域。该表达载体包含TOP1 MAR序列(GenBank：L23999.1)，通过将外源目的基因插入载体的多克隆位点，能够构建TOP1 MAR-启动子-外源基因-Poly A、启动子-外源基因-Poly A-TOP1 MAR或者TOP1 MAR-启动子-外源基因-Poly A-TOP1 MAR载体结构，一方面克服转基因沉默，另一方面介导外源基因在宿主细胞中稳定、高效、持久表达。同等条件下，与不含MAR以及含1-68 MAR的载体相比，本发明中表达载体能显著提高外源基因的表达水平，可用于重组蛋白的生产等。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117789829A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202311792988.5
申请日：2023-12-25
Abstract: 本发明公开了一种基于去噪扩散模型的启动子活性优化方法，涉及生物信息学技术领域。包括：S1、获取待优化的启动子序列；S2、对启动子序列做二维独热编码预处理；S3、根据S2中获得的二维独热编码基于序列表达预测模型以及全局归因函数获取碱基上不同嘌呤的归因系数；S4、根据S3中碱基上不同嘌呤的归因系数确定待优化位置；S5、基于去噪扩散概率模型对S4中确定的待优化位置进行优化。本发明结合了神经网络可解释性分析，根据不同位置碱基的归因系数高低来精确提取待优化位置，能够有效提高启动子的活性，自动识别并保留原启动子的关键序列特征。
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公开(公告)号：CN109468412A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811534929.7
申请日：2018-12-14
Applicant: 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种检测CHO细胞中Vesivirus 2117病毒污染的引物、试剂盒及方法，属于生物医药技术领域。本发明的检测Vesivirus 2117病毒的实时荧光定量PCR引物序列为：正向引物：5′-ACGTTGACGATAGGGGGAGA-3′；反向引物：5′-CTTTGGCAAAGACCCCGTTG-3′；试剂盒还包括阳性质控品和内参管家基因GAPDH引物序列，其引物序列为：正向引物：5′-CCCATGGCAAGTTCAAAGGCA-3′；反向引物：5′-TGGTGAAGACGCCAGTAGATT-3′。本发明的试剂盒具有高灵敏度、高特异性、高效率高的特点，且操作简单，节约时间。
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公开(公告)号：CN109628489B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN201910012271.1
申请日：2019-01-07
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/67 , C12N15/113
Abstract: 本发明涉及一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法及其应用，表达载体、表达系统及其制备方法，属于基因工程技术领域。本发明中的方法应用CHO细胞内源miRNAs与3′‑UTR转录区互补结合来对筛选标记基因表达进行负性调节，进而提高目的基因的表达量。将miRNAs与3′‑UTR转录区克隆到筛选标记基因的下游，构建真核表达载体；然后将目的基因克隆到真核表达载体获得重组表达载体，然后将其转染细胞，获得CHO细胞表达系统，实现目的基因的高效表达。本发明的CHO细胞表达系统，可以显著提高目的基因在CHO细胞中的表达水平，实现目的蛋白在CHO细胞的高产量稳定表达。
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公开(公告)号：CN106834482B
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN201710103595.7
申请日：2017-02-24
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11 , A61K45/06 , A61K31/475 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种用于检测miR‑874‑3p表达的引物、试剂盒、检测方法及应用，属于肿瘤生物治疗技术领域。本发明通过试验证实miR‑874‑3p与长春新碱的耐药性相关，在长春新碱耐药细胞中高表达、敏感细胞中低表达，因此可以作为肿瘤细胞长春新碱耐药的标志物。根据该标志物设计的引物、试剂盒及检测方法可用于临床判断肿瘤细胞对长春新碱的耐药性，进一步指导临床用药并实现精准治疗。
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公开(公告)号：CN110343699A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201810316670.2
申请日：2018-04-08
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/67
Abstract: 本发明涉及用于提高哺乳动物细胞转基因表达的调控序列、表达载体、表达系统及其应用，属于基因工程技术领域。本发明根据CMV启动子、增强子的序列特征，结合生物学信息及实验，发明了3种用于组合启动子的调控序列，分别为人CMV启动子核心序列(hCPE)、合成的调控元件(SEE)、人巨细胞病毒即早期增强子(hCMVE)，将这三种调控序列插入表达载体的启动子上游，可以驱动外源基因高效、持续、稳定表达。同等条件下，与不含上述调控序列的表达载体相比，本发明中表达载体能显著提高外源基因的表达水平，可用于重组蛋白的生产等。
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