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公开(公告)号：CN114214359B
公开(公告)日：2025-01-21
申请号：CN202111361923.6
申请日：2021-11-17
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法。包括以下步骤：（1）将目的基因重组载体与含细胞周期调控相关基因p18和/或调控细胞生长的基因aFGF的共转基因重组载体共转染CHO细胞；所述基因p18的序列如SEQ ID NO:1所示；所述基因aFGF的序列如SEQ ID NO:2所示；（2）将共转基因重组载体和目的基因重组载体共转染到CHO细胞中后，培养并筛选，得到CHO细胞表达系统；（3）将瞬时和稳定转染CHO细胞株进行悬浮无血清培养，得到目的蛋白。本发明方法可以显著提高目的基因在CHO细胞中的表达水平，实现目的蛋白在CHO细胞的瞬时和稳定高水平表达。
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公开(公告)号：CN117660529A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311543756.6
申请日：2023-11-20
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及核酸构建体、表达载体、表达系统、及其应用。本发明提供的核酸构建体，不包括hCMV MIE启动子中的上游调控序列和核因子1结合位点簇序列，作为表达载体的启动子元件，构建重组蛋白表达载体和表达系统，提高重组蛋白稳定表达水平；本发明进一步优化内含子A序列，替换本发明提供核酸构建体形成的截短启动子的内含子A序列，同样能够提高重组蛋白稳定表达水平；并且优选的如SEQ ID NO：3所述的内含子A序列，与包含本发明提供的核酸构建体作为截短启动子的表达载体构建的CHO表达系统比较，能够更进一步提高重组蛋白稳定表达水平。
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公开(公告)号：CN114561413B
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202210301557.3
申请日：2022-03-24
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种瞬时转染试剂及其应用，属于细胞生物学和生物技术领域。本发明的瞬时转染试剂，包括聚乙烯亚胺盐酸盐溶液、氯化钠溶液和氯化镁溶液；聚乙烯亚胺盐酸盐溶液的浓度为0.8～1.2mg/mL，pH为6.9～7.1，聚乙烯亚胺盐酸盐为PEI MAX 40K；氯化钠溶液的浓度为4.8～5.3mol/L；氯化镁溶液的浓度为0.8～1.2mol/L。本发明的瞬时转染试剂用于细胞转染时，具有较高的转染效率。由于聚乙烯亚胺盐酸盐的浓度较低，本发明的瞬时转染试剂具有较低的毒性。本发明的瞬时转染试剂是一种价廉、毒性小、转染效率高的瞬时转染试剂，可用于重组蛋白生产和基因治疗等方面。
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公开(公告)号：CN112575031B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201910935156.1
申请日：2019-09-29
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种遍在染色质开放表达元件、重组表达载体、表达系统及其制备方法、应用，属于生物技术领域。本发明中的遍在染色质开放表达元件(UCOE序列)是在分析人UCOE序列(GenBank accession no.D28877.1)的基础上，删除了HNRPA2B1启动子序列，形成672bp序列，并发现672bp序列存在隐蔽拼接位点，将455、493隐蔽拼接位点进行突变设计合成了一种新型的UCOE元件。与天然UCOE序列相比，本发明的UCOE序列在提高哺乳动物细胞转基因表达水平上效果更为显著。
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公开(公告)号：CN109628489B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN201910012271.1
申请日：2019-01-07
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/67 , C12N15/113
Abstract: 本发明涉及一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法及其应用，表达载体、表达系统及其制备方法，属于基因工程技术领域。本发明中的方法应用CHO细胞内源miRNAs与3′‑UTR转录区互补结合来对筛选标记基因表达进行负性调节，进而提高目的基因的表达量。将miRNAs与3′‑UTR转录区克隆到筛选标记基因的下游，构建真核表达载体；然后将目的基因克隆到真核表达载体获得重组表达载体，然后将其转染细胞，获得CHO细胞表达系统，实现目的基因的高效表达。本发明的CHO细胞表达系统，可以显著提高目的基因在CHO细胞中的表达水平，实现目的蛋白在CHO细胞的高产量稳定表达。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114058576A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111386357.4
申请日：2021-11-22
Applicant: 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供了一种血小板裂解液及其制备方法和应用，属于细胞生物学技术领域，所述血小板裂解液的制备方法，包括以下步骤：1)将多份来源不同的健康人的抗凝全血混合、去除红细胞后，收集富血小板血浆；2)将步骤1)中获得的富血小板血浆超声处理后，离心，收集第一上清液；3)将所述第一上清液与氯化钙混合、静置后，收集第二上清液即为血小板裂解液。本发明所述制备方法能够明显提高血小板裂解液中细胞因子的含量，制备获得的血小板裂解液可完全替代胎牛血清培养细胞。
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公开(公告)号：CN106834482B
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN201710103595.7
申请日：2017-02-24
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11 , A61K45/06 , A61K31/475 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种用于检测miR‑874‑3p表达的引物、试剂盒、检测方法及应用，属于肿瘤生物治疗技术领域。本发明通过试验证实miR‑874‑3p与长春新碱的耐药性相关，在长春新碱耐药细胞中高表达、敏感细胞中低表达，因此可以作为肿瘤细胞长春新碱耐药的标志物。根据该标志物设计的引物、试剂盒及检测方法可用于临床判断肿瘤细胞对长春新碱的耐药性，进一步指导临床用药并实现精准治疗。
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公开(公告)号：CN110894487A
公开(公告)日：2020-03-20
申请号：CN201911338744.3
申请日：2019-12-23
Applicant: 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明涉及一种无血清无蛋白CHO细胞培养基及其制备方法、应用，属于CHO细胞培养技术领域。本发明的CHO细胞培养基包含氨基酸、维生素、微量元素、无机盐、脂类、碳水化合物和添加剂，所述脂类包括：亚麻酸0.02-0.15mg/L、孕酮0.02-0.15mg/L、亚油酸0.04-0.24mg/L、胆固醇1-7.5mg/L和花生四烯酸0.001-0.008mg/L。培养基中营养成分均衡，尤其是脂类、碳水化合物和添加剂物质充分，在该培养基中CHO细胞生长倍数可高达20.88。在利用CHO细胞表达目的蛋白时，使用前述培养基不仅CHO细胞的生长倍数高，并且CHO细胞中目的蛋白的含量仍然能够达到较高的水平。
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公开(公告)号：CN110343699A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201810316670.2
申请日：2018-04-08
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/67
Abstract: 本发明涉及用于提高哺乳动物细胞转基因表达的调控序列、表达载体、表达系统及其应用，属于基因工程技术领域。本发明根据CMV启动子、增强子的序列特征，结合生物学信息及实验，发明了3种用于组合启动子的调控序列，分别为人CMV启动子核心序列(hCPE)、合成的调控元件(SEE)、人巨细胞病毒即早期增强子(hCMVE)，将这三种调控序列插入表达载体的启动子上游，可以驱动外源基因高效、持续、稳定表达。同等条件下，与不含上述调控序列的表达载体相比，本发明中表达载体能显著提高外源基因的表达水平，可用于重组蛋白的生产等。
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公开(公告)号：CN119632800A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202510044007.1
申请日：2025-01-10
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及老人下肢辅助锻炼技术领域，更具体地说，是一种志愿者助老骨骼下肢辅助机械装置，包括底板、若干个移动轮、支撑座、支撑板、横板以及推柄，若干个所述移动轮对称设置在底板的两侧，所述移动轮通过轮轴和所述底板活动连接，所述支撑座设置在底板的一侧，所述支撑板数量为一组且对称设置在底板的另一侧，所述辅助机械装置还包括握杆、驱动组件、锻炼模块以及按摩组件，所述握杆设置在支撑座上，所述锻炼模块设置在底板上，所述轮轴转动时控制驱动组件同步工作并控制锻炼模块工作；本装置能够达到更佳的老人下肢辅助锻炼效果，而且锻炼的强度也是可以根据志愿者的推动速度以及推柄转动速度实现可调，能够适应不同的强度的老人锻炼。
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