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公开(公告)号：KR101096668B1
公开(公告)日：2011-12-22
申请号：KR1020090018080
申请日：2009-03-03
Applicant: 강원대학교산학협력단 , (주)대한임상의학센터
Abstract: 기존에 FXIII의활성도는주로 ELISA를통하여이루어져왔다. 그러나이와같은방법은활성도측정에시간이많이소요되고, 다량의시료를필요로하고, 재현성이떨어진다. 따라서본 발명에서는 FXIII의기질중 하나인피브리노겐을어레이형태로제작하여 FXIII의아미드전이반응(transamidation)을유도시킴으로써감도가높은형광으로표지된검출자를이용해형광값을측정하여세포나혈액내의 FXIII의양을측정한다. 따라서본 발명은극히소량의시료만으로쉽고빠르게분석가능하며, 각종질환검사에활용할수 있다.
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公开(公告)号：KR1020100099533A
公开(公告)日：2010-09-13
申请号：KR1020090018080
申请日：2009-03-03
Applicant: 강원대학교산학협력단 , (주)대한임상의학센터
Abstract: PURPOSE: A method for measuring activity of blood coagulation factor XIII is provided to quickly and easily analyze activity of blood coagulation factor XIII and to use in various diseases tests. CONSTITUTION: A method for measuring activity of blood coagulation factor XIII comprises: a step of preparing an array chip in which fibrinogen is fixed on a plurality of spots; a step of dropping reagent containing thrombin, Ca^2+, and 5-(biotinamido)pentylamine with a sample containing blood coagulation factor XIII on a fibrinogen to induce transamidation; a step of introducing an analysis marker to the biotin; and a step of measuring activity level of the blood coagulation factor XIII.
Abstract translation: 目的：提供一种测定血液凝固因子XIII活性的方法，以快速，方便地分析凝血因子XIII的活性，并用于各种疾病检测。 构成：测定凝血因子XIII的活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：制备阵列芯片，其中纤维蛋白原固定在多个斑点上; 将含有凝血酶，Ca 2+和5-（生物素酰氨基）戊胺的试剂与含有凝血因子XIII的样品滴加在纤维蛋白原上以引发转酰胺化步骤; 将分析标记物引入生物素的步骤; 以及测定凝血因子XIII的活性水平的步骤。
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公开(公告)号：KR1020130061838A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：KR1020110128102
申请日：2011-12-02
Applicant: 강원대학교산학협력단
Abstract: PURPOSE: A method for simultaneously measuring activities of blood coagulation factor 13 and transglutaminase 2 is provided to measure the activities of blood coagulation factor 13 and transglutaminase 2 in one sample. CONSTITUTION: A method for simultaneously measuring activities of blood coagulation factor 13 and transglutaminase 2 comprises: a step of preparing a standard array(array 1) for measuring activity of blood coagulation factor 13, a standard array(array 2) for measuring activity of transglutaminase 2, and an array(array 3) for simultaneously measuring blood coagulation factor 13 and transglutaminase 2 of a sample, in which fibrinogen is fixed on a plurality of spots; a step of performing transamidation between 5-(biotinamido)pentylamine(BAPA) and glutamine of fibrinogen; a step of introducing a fluorescence-labeled material to biotin and measuring fluorescence intensity; a step of making a standard curve of activity of blood coagulation factor 13 from the fluorescence intensity of array 1; a step of making a standard curve of activity of transglutaminase 2 from the fluorescence intensity of array 2; and a step of applying the standard curves to equation, and quantitatively measuring activity of blood coagulation factor 13 and transglutaminase 2.
Abstract translation: 目的：同时测定血液凝固因子13和转谷氨酰胺酶2活性的方法，用于测定一个样品中凝血因子13和转谷氨酰胺酶2的活性。 构成：同时测量凝血因子13和转谷氨酰胺酶2的活性的方法包括：制备用于测定凝血因子13的活性的标准阵列（阵列1）的步骤，用于测量转谷氨酰胺酶活性的标准阵列（阵列2） 2和用于同时测量样品的凝血因子13和转谷氨酰胺酶2的阵列（阵列3），其中纤维蛋白原固定在多个斑点上; 在5-（生物素酰氨基）戊胺（BAPA）和纤维蛋白原的谷氨酰胺之间进行酰胺化的步骤; 将荧光标记的材料引入生物素并测量荧光强度的步骤; 从阵列1的荧光强度制作凝血因子13活性的标准曲线的步骤; 从阵列2的荧光强度制作转谷氨酰胺酶2活性的标准曲线的步骤; 并将标准曲线应用于方程，并定量测定凝血因子13和转谷氨酰胺酶2的活性。
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公开(公告)号：KR101338401B1
公开(公告)日：2013-12-10
申请号：KR1020110128102
申请日：2011-12-02
Applicant: 강원대학교산학협력단
Abstract: 본 발명은 피브리노겐 어레이를 사용하여 하나의 샘플에서 혈액응고인자 13(FXIII) 및 트랜스글루타미나제 2 (TG2)의 트랜스아미네이션 활성을 동시에 측정할 수 있는 온-칩 활성도 측정 시스템 및 상기 측정 시스템에 효과적으로 사용될 수 있는 혈액응고인자 13- 및 트랜스글루타미나제 2- 특이적인 활성도 측정에 최적화된 반응 조성물에 관한 것이다.
본 발명자는 버퍼, pH, 디티오트레이톨 및 5-(바이오틴아미도)펜틸아민의 농도와 같은 측정 조건을 최적화하였으며, 시료내 특이적 FXIII 및 TG2 활성들을 결정하는 식을 생성하였다. 본 발명자는 성공적으로 이 측정 시스템을 적용하여 포볼 12-미리스테이트 13-아세테이트 및 인터루킨-4로 분화된 THP-1 단핵세포에서 FXIII 및 TG2 활성의 변화를 모니터하였다. 본 활성 측정법은 FXIII 및 TG2 활성의 고속대량 결정을 위해 민감하고 적합하기 때문에, 세포 신호전달 및 심장혈관 병태생리학 연구에 있어 이들 이소자임들의 차별적 기능들을 조사하는데 강한 잠재력을 가지고 있다.
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