公开(公告)号：KR100877841B1

公开(公告)日：2009-01-09

申请号：KR1020070009411

申请日：2007-01-30

Applicant: 국민대학교산학협력단

Inventor： 유연규 ,  이원규

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/53 ,  G01N33/48

Abstract: 본 발명은 지질 계통의 신호전달물질인 류코트리엔 B4 (Leukotriene B4, LTB4) 수용체인 BLT2의 신호전달 조절물질의 검색방법 및 검색키트에 관한 것으로, 구체적으로 BLT2의 세포 내 3번째 루프인 iL3(intercellular loop 3)을 포함하는 융합 단백질의 수용체와 상호작용하는 Gi 단백질의 α 소단위체(Gαi3)를 포함하는 융합 단백질 및 상기 두 단백질 간의 상호작용 측정을 통하여 BLT2의 신호전달 조절물질을 검색하는 방법 및 이를 이용한 검색키트에 관한 것으로 이는 염증성 질환에 대한 신약 후보물질을 저비용으로 쉽고 빠르게 검색하는데 이용될 수 있다.
GPCR, BLT2, G-단백질, Gαi3, 검색방법, 검색키트

公开(公告)号：KR101034884B1

公开(公告)日：2011-05-17

申请号：KR1020080047349

申请日：2008-05-22

Applicant: 국민대학교산학협력단

Inventor： 유연규 ,  이원규 ,  이상엽

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/53 ,  G01N33/48

Abstract: 본 발명은 CK2α와 Nopp140의 상호작용 측정방법, 상기 측정방법을 이용한 CK2와 Nopp140의 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 및 CK2 활성의 억제방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 GST-CK2α 단백질을 multi-well plate에 고정하는 단계; 상기 물질에 인산화된 Nopp140 단백질을 처리하는 단계; 및 상기 GST-CK2α에 결합된 상기 Nopp140의 양을 측정하는 단계;를 포함하는 CK2α와 Nopp140의 상호작용 측정방법, CK2α, CK2α와 Nopp140(human nucleolar phosphoprotein)의 상호작용 조절 후보 물질, 및 InsP
6 (inositolhexakisphosphate)을 반응시키는 단계; 및 상기 반응물질에 Nopp140을 처리하는 단계를 포함하는 CK2α와 Nopp140의 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법, 및 상기 방법으로 스크리닝된 마이토잔트론(mitoxantrone)을 이용한 CK2 활성의 억제방법에 관한 것이다. 본 발명은 CK2α와 Nopp140의 상호작용을 효과적으로 측정할 수 있으며, 상기 측정방법을 활용하여 항암제 개발의 표적 단백질인 CK2에 대한 활성을 억제하는 기능을 가져 항암제로 이용가능한 물질을 스크리닝할 수 있으며, 이러한 스크리닝을 통해 확인된 마이토잔트론은 CK2의 활성을 억제시킬 수 있는 물질임을 입증하고, 또 다른 항암제 용도로의 개발에 이용될 수 있다.
인산화효소 CK2, 인간 핵인 인산단백질(Nopp140), 펩타이드, Nopp140 발현, 단백질 상호작용

公开(公告)号：KR101865847B1

公开(公告)日：2018-06-08

申请号：KR1020170009734

申请日：2017-01-20

Applicant: 국민대학교산학협력단

Inventor： 윤진영 ,  이지원 ,  이원규 ,  신동훈

IPC: B07C5/00

CPC classification number: B07C5/00

Abstract: 본발명은복수의젓가락의방향이불규칙적으로뒤섞인상태로젓가락을투입하면젓가락의무게중심위치에따라젓가락이양측방향으로분리되어낙하하여젓가락이일방향으로자동배열될수 있도록한 젓가락자동분별장치에관한것으로, 본발명에따른젓가락자동분별장치는, 하부에젓가락이통과하는장공형의슬롯이상하로관통되게형성되어, 젓가락의방향이불규칙하게혼재된상태로투입되는호퍼부재와; 상기호퍼부재의슬롯의하부에배치되며, 상기슬롯을통해낙하하는젓가락이무게중심위치에따라양측으로분리될수 있도록 '∧' 형태를갖는분리부재와; 상부면이개방된통 형태로되어, 상기분리부재의양측단부에배치되어분리부재를통해낙하하는젓가락을수납하는 2개의수납통;을포함하는것을특징으로한다.

公开(公告)号：KR1020090121441A

公开(公告)日：2009-11-26

申请号：KR1020080047349

申请日：2008-05-22

Applicant: 국민대학교산학협력단

Inventor： 유연규 ,  이원규 ,  이상엽

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/53 ,  G01N33/48

Abstract: PURPOSE: A method for measuring interaction between CK2α and Nopp140 and a method for suppressing CK2 activation are provided to massively detect a compound without expensive cell culture stage. CONSTITUTION: A method for measuring interaction of CK2α and Nopp140 comprises: a step of fixing GST-CK2α protein on a multi-well plate; a step of treting Nopp140 protein; and a step of measuring the amount of Nopp140 bound to GST-CK2α. A method for screening an interaction regulating material of CK2 and Nopp140 comprises: a step of reacting CK2 subunit and a candidate of interaction regulation of CK2 and Nopp140 and InsP6(inositolhexakisphosphate); and a step of treating Nopp140 to a reacted material.

Abstract translation: 目的：提供一种测定CK2α与Nopp140之间相互作用的方法及抑制CK2活化的方法，以大量检测化合物，而无需昂贵的细胞培养阶段。 构成：测定CK2α和Nopp140相互作用的方法包括：将多肽板上固定GST-CK2α蛋白的步骤; 处理Nopp140蛋白的一个步骤; 以及测定与GST-CK2α结合的Nopp140的量的步骤。 筛选CK2和Nopp140的相互作用调节材料的方法包括：使CK2亚基与CK2和Nopp140和InsP6（肌醇六磷酸酯）的相互作用调节候选物反应的步骤; 以及将Nopp140处理成反应材料的步骤。

公开(公告)号：KR1020080071330A

公开(公告)日：2008-08-04

申请号：KR1020070009411

申请日：2007-01-30

Applicant: 국민대학교산학협력단

Inventor： 유연규 ,  이원규

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/53 ,  G01N33/48

Abstract: A screening method of a regulating agent for the signal transduction in BLT2 as a receptor of leukotriene B4 is provided to reduce the screening costs by eliminating a cell culture step by using purified protein and screening devices, so that candidate new drug substances for treating inflammatory disease are screened rapidly and inexpensively. A screening method of a regulating agent for the signal transduction in BLT2 comprises the steps of: (1) preparing BLT2 protein or protein containing an intracellular loop 3(iL3) region of BLT2; (2) preparing alpha subunit protein of G protein(Galpha); (3) reacting the prepared protein of step (1) with the protein of step (2) in the presence of a testing compound, and measuring the interaction between proteins; and (4) comparing the measured interaction with that of a contrast which is measured in the absence of the testing compound, wherein the BLT2 protein is a fusion protein of protein purification-facilitating regions including N-terminal T7 tag and C-terminal His-tag and a BLT2 region; and the protein containing an intracellular loop 3(iL3) region of BLT2 is a fusion protein of a protein purification-facilitating region such as GST(glutathione-S-transferase) and a BLT2 iL3 region. Further, the alpha subunit protein of G protein(Galpha) is alpha subunit protein of Gi3 protein.

Abstract translation: 提供BLT2作为白细胞三烯B4受体的信号转导调节剂的筛选方法，通过使用纯化的蛋白质和筛选装置消除细胞培养步骤来降低筛选成本，从而用于治疗炎性疾病的候选新药物 被快速和廉价地筛选。 BLT2信号转导调节剂的筛选方法包括以下步骤：（1）制备含有BLT2细胞内环3（iL3）区域的BLT2蛋白或蛋白质; （2）制备G蛋白（Galpha）的α亚基蛋白; （3）在试验化合物的存在下使步骤（1）的制备的蛋白质与步骤（2）的蛋白质反应，并测量蛋白质之间的相互作用; （4）将测定的相互作用与不存在测试化合物时所测量的相互作用进行比较，其中BLT2蛋白是蛋白质纯化促进区的融合蛋白，其包括N末端T7标记和C-末端His- 标签和BLT2区域; 并且含有BLT2的细胞内环3（iL3）区域的蛋白质是蛋白质纯化促进区域如GST（谷胱甘肽-S-转移酶）和BLT2 iL3区域的融合蛋白。 此外，G蛋白（Galpha）的α亚基蛋白是Gi3蛋白的α亚基蛋白。