Abstract:
A high-throughput screening(HTS) method for a 5-HT6 receptor ligand s provided to develop a selective controlling material of the 5-HT6 receptor and shorten a target protein identifying period by overcoming the defects of a conventional radio isotope technique or a non-reproducible HTS technique, thereby capable of finding an accurate mechanism of the 5-HT6 receptor and being very useful for preventing and treating brain diseases such as melancholia, cognitive impairment, and Alzheimer's disease. A high-throughput screening method for an active agent of a 5-HT6 receptor such as 5-HT, 5-CT, methoxytryptamine and tryptamine comprises the steps of: (a) transfecting the 5-HT6 receptor and a chimeric G-protein and then selecting a cell line such as HEK293, COS7, CHO-K1 and CHO-G5A and a G-protein for searching an optimum ligand through condition comparison tests; (b) introducing the selected cell line into a 96-well plate under the condition of transfecting the 5-HT6 receptor and the G-protein into DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) and labeling it with a tracer dye; (c) after preparing a 96-well plate including a 5-HT6 receptor active agent with a concentration capable of activating the 5-HT6 receptor and a 96-well plate only including buffer, obtaining a Z'(signal window) value using a Ca^2+ signal regarding each of the 96-well plate including the 5-HT6 receptor active agent and the 96-well plate including buffer and determining the screening efficiency regarding the 5-HT6 receptor; and (d) after preparing 96-well plates including a 5-HT6 receptor active agent with different concentrations for activating the 5-HT6 receptor and obtaining a Ca^2+ signal in accordance with the 5-HT6 receptor activity through a fluorescent imaging technique, drawing a graph about the reaction regarding the active agent and obtaining an EC50 value of a testing material from the graph to search the active agent of the 5-HT6 receptor.
Abstract:
본 발명은 형광 이미징법을 이용한 5-HT 6 수용체 리간드 고효율 검색방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 기존의 방사선 동위원소법이나 재현성이 없는 형광이미징법의 5-HT 6 수용체 리간드 검색방법의 단점을 극복하여 96-웰 플레이트 형태로 형광 이미징법을 이용한 5-HT 6 수용체 리간드 고효율 검색법(high-throughput screening, HTS)과, YTH(yeast two-hybrid) 검색법을 이용한 5-HT 6 수용체에 결합하는 Fyn 단백질 발견을 통한 Fyn 단백질이 5-HT 6 수용체의 기능을 증가시킴을 HTS의 활용법에 관한 것이다. 따라서, 본 발명은 우울증, 인지 기능, 알츠하이머 병 등과 관련된 뇌질환의 예방 및 치료에 유용하다. 5-HT6 수용체, 형광 이미징법, 고효율 검색법, YTH(yeast two-hybrid) 검색법, Fyn 단백질
Abstract:
본 발명은 세포내로 유전자 DNA 및 생물학적 활성 약물을 전달할 수 있는 지방 유제 및 그것의 제조방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 지방 유제를 사용하여 세포내로 DNA와 같은 생물학적 활성 약물을 효과적으로 전달하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 지방 유제는 세포내로 유전자를 효과적으로 전달할 수 있고, 특히 혈청 중에서 높은 안정성 및 유전자 전달 효율을 나타냄으로써 임상에서 유전자 치료에 적합한 약물 전달 체계가 될 수 있다.