Abstract:
A method for producing xylitol is provided to obtain the xylitol with high yield using xylitol producing strain where xylitol dehydrogenase expression is inhibited. The method comprises the steps of: (a) inoculating xylitol producing strain, where the expression of xylitol dehydrogenase is inhibited by non-specific deletion, substitution or addition of a portion of xylitol dehydrogenase gene, into a culture medium including xylose, carbon source, nitrogen source and trace element; (b) culturing it until the xylose contained in the culture medium is completely consumed; and (c) obtaining xylitol from the product of the step(b). In the method, the xylitol producing strain is Candida species strain; carbon source is glycerol, fructose, galactose, sugar, mannose, maltose, cellobiose or a mixture thereof; nitrogen source is an extract of yeast; and trace element is dipotassium phosphate, magnesium sulfate or a mixture thereof.
Abstract:
본 발명은 포도당을 보조기질로 이용할 수 있는 자일리톨 생산 균주 및 고생산성 발효 방법에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 자일로스 환원효소가 항구적으로 발현되는 자일리톨 생산 균주인 캔디다 트로피칼리스( Candida tropicalis )에서 EMP 경로에 결정적인 역할을 하는, 포도당인산이성질화효소(phosphoglucoseisomerase, pgi ), 과당인산키나아제 1(phosphofructokinase 1, pfk1 ) 또는 과당인산키나아제 2(phosphofructokinase 2, pfk2 ) 유전자를 녹아웃시켜 상기 유전자가 녹아웃된 균주의 자일리톨 생산속도를 비교한 결과, 상기 pfk2 유전자의 이배체가 모두 녹아웃된 균주의 자일리톨 생산속도가 현저히 증가하였음을 확인함으로써, 자일리톨의 제조 수율 및 생산속도를 향상시킬 수 있는 방법으로 유용하게 사용될 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: A method for preparing xylitol of high yield in a medium containing glucose using a xylitol producing strain is provided to produce xylitol of high yield and high productivity without glucose suppression. CONSTITUTION: A gene construct contains a promoter containing a base of sequence number 1, a polynucleotide having a base of sequence number 7, and a terminator having a base of sequence number 2. The gene construct contains a promoter containing 1000bp or more base sequences, a polynucleotide having a base of sequence number 7, and a terminator having a base of sequence number 2. An expression vector contains one or more gene constructs. A method for producing a large amount of xylitols comprises: a step of culturing a xylotol-producing strain in a medium containing biomass hydrolysate and carbon source; a step of producing xylitol from the strain; and a step of isolating xylitol from the culture liquid.
Abstract:
본 발명은 자일리톨 탈수소효소의 발현이 억제된 자일리톨 생산균주를 이용하여 자일리톨을 고수율로 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 자일리톨의 고수율 생산방법은 자일리톨 탈수소효소 유전자의 일부가 비특이적으로 결실, 치환 또는 부가되어 자일리톨 탈수소효소의 발현이 억제된 자일리톨 생산균주를 자일리톨의 전구체인 자일로스, 탄소원, 질소원 및 미량원소를 포함하는 배지에 접종하고, 배지에 함유된 자일로스가 전량 소모될 때까지 배양한 다음, 이로부터 자일리톨을 수득하는 단계를 포함한다. 본 발명의 자일리톨의 고수율 생산방법을 이용할 경우, 종래의 제조방법보다도 높은 수율로 자일리톨을 생산할 수 있었으므로, 자일리톨을 포함하는 각종 식품, 의약품 등의 제조에 널리 활용될 수 있을 것이다. 자일리톨, 자일로스, 자일리톨 탈수소효소, 자일리톨 생산균주
Abstract:
본 발명은 자일로스 환원효소(xylose reductase)가 항구적으로 발현(constitutive expression)되는 자일리톨 생산균주를 이용하여 포도당을 탄소원으로 하는 배지에서 자일리톨을 고수율로 생산하는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 뉴로스포라 크라사( Neurospora crassa )의 자일로스 환원효소를 캔디다 트로피칼리스( Candida tropicalis )에서 고활성으로 발현시키기 위하여 유전자 부호 최적화(codon optimization)을 수행하여 획득한 최적화된 자일로스 환원효소; 최적화된 유전자를 발현시키기 위해, 클로닝된 캔디다 트로피칼리스( Candida tropicalis )의 글리세알데히드-3-인산 탈수소효소(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)의 프로모터와 터미네이터 부분; 및 선별마커인 URA3가 포함된 발현벡터, 상기 발현벡터를 자일리톨 탈수소효소(xylitol dehydrogenase)가 불활화된 캔디다 트로피칼리스에 도입하여 제조된 자일로스 환원효소가 항구적으로 발현되는 자일리톨 생산균주, 및 상기 균주를 유가식 배양을 통해 탄소원인 포도당의 억제를 받지 않고 자일리톨을 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 자일로스 환원효소의 항구적 고발현을 통한 자일리톨 생산방법은 포도당을 보조기질로 사용하여 고수율, 고생산성으로 자일리톨을 생산하는데 유용하게 사용될 수 있다.
Abstract:
본 발명은 포도당을 보조기질로 이용할 수 있는 자일리톨 생산 균주 및 고생산성 발효 방법에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 자일로스 환원효소가 항구적으로 발현되는 자일리톨 생산 균주인 캔디다 트로피칼리스( Candida tropicalis )에서 EMP 경로에 결정적인 역할을 하는, 포도당인산이성질화효소(phosphoglucoseisomerase, pgi ), 과당인산키나아제 1(phosphofructokinase 1, pfk1 ) 또는 과당인산키나아제 2(phosphofructokinase 2, pfk2 ) 유전자를 녹아웃시켜 상기 유전자가 녹아웃된 균주의 자일리톨 생산속도를 비교한 결과, 상기 pfk2 유전자의 이배체가 모두 녹아웃된 균주의 자일리톨 생산속도가 현저히 증가하였음을 확인함으로써, 자일리톨의 제조 수율 및 생산속도를 향상시킬 수 있는 방법으로 유용하게 사용될 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: A method for preparing xylitol at a high yield by the constitutive expression of xylose reductase is provided to massively produce xylitol. CONSTITUTION: A gene construct comprises: a promoter having a base sequence of sequence number 1; a polynucleotide having a base sequence of sequence number 7; and a terminator having a base sequence of sequence number 2. A strain which produces xylitol is cultured in a medium containing biomass hydrolysate and carbon source. The biomass hydrolysate is selected from the group consisting of corncob hydrolysate, sugar cane cob hydrolysate, coconut by-product, and Betula platyphylla var. japonica (Miquel) Hara hydrolysate.
Abstract:
A method for producing xylitol by using the mutated Candida tropicalis strain is provided to simplifying the production process by eliminating the additional process for maintaining the dissolved oxygen concentration in culture medium to be very low, and inhibit production of by-products such as ethanol and glycerol generated by cultivating the strain under low dissolved oxygen condition. The method for producing xylitol by using the mutated Candida tropicalis strain BS-xdh1(KCTC 11137BP) in which xylitol dehydrogenase is inactivated and arabinose reductase activity is suppressed comprises the steps of: preparing the xylitol production medium containing the biomass hydrolysate as a substrate; inoculating the Candida tropicalis strain BS-xdh1(KCTC 11137BP) into the production medium; and cultivating the strain with sufficient agitation without the separate process of controlling the dissolved oxygen concentration to the low concentration of 0.5 % or 2 %.