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公开(公告)号：WO2012046924A1
公开(公告)日：2012-04-12
申请号：PCT/KR2011/000346
申请日：2011-01-18
CPC classification number: C12P7/18
Abstract: 본 발명은 아라비노스 대사경로가 새로이 도입된 자일리톨 생산균주를 이용하여, 자일로스(xylose)와 아라비노스(arabinose)의 혼합 배지에서, 아라비노스를 세포 대사에 이용하게 하여 부산물인 아라비톨(arabitol)의 생성을 억제시킨 효율적인 자일리톨(xylitol) 생산방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 L-arabinose isomerase( araA ), L-ribulokinase( araB ), L-ribulose-5-phosphate 4-epimerase( araD ) 효소들을 캔디다 트로피칼리스( Candida tropicalis ) 균주에서 효율적으로 발현시키기 위하여 유전자 부호 최적화(codon optimization)를 수행한 후, 각각의 유전자를 글리세알데히드-3-인산 탈수소효소(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)의 프로모터 및 선별마커인 URA3를 포함하는 카세트에 삽입하고, 캔디다 속 균주( Candida sp. )에 도입함으로써, 자일리톨 생산시 정제 및 결정화 과정을 방해하는 아라비톨 생성을 억제하는 자일리톨 생산 방법에 관한 것이다. 본 발명의 아라비노스 대사경로가 새로이 도입된 자일리톨 생산균주는 아라비톨 생성을 억제하여 고생산성으로 자일리톨을 생산하는데 유용하게 사용될 수 있다.
Abstract translation: 本发明涉及一种有效生产木糖醇的方法，该方法通过使用阿拉伯糖代谢途径新产生的木糖醇生产菌株将阿拉伯糖应用于木糖和阿拉伯糖的复合培养基中的细胞代谢来抑制副产物阿拉伯糖醇的产生 介绍。 更具体地，本发明涉及通过进行密码子优化来抑制木糖醇生产的木糖醇的生产方法，其阻碍木糖醇生产过程中的纯化和结晶，从而有效地表达L-阿拉伯糖异构酶（araA），L- 核糖核酸激酶（araB）和L-核酮糖-5-磷酸4-差向异构酶（araD）酶; 然后将各基因插入到包含甘油醛-3-磷酸脱氢酶和可选择标记URA3的启动子的盒中; 并将其转移到念珠菌属 本发明新引入阿拉伯糖代谢途径的木糖醇生产菌株可以抑制阿拉伯糖醇的生产，因此可用于以高产率生产木糖醇。
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公开(公告)号：WO2015194704A1
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：PCT/KR2014/008896
申请日：2014-09-24
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/09 , C07K14/00 , C07K14/505
CPC classification number: C07K14/00 , C07K14/505 , C12N15/09
Abstract: 본 발명은 재조합 당단백질(glycoprotein)을 생성하는 세포주에서 당지질(glycospingolipid(GSL)) 생합성 경로를 억제시켜 고 시알산(sialic acid) 함량의 재조합 당단백질을 생산하는 재조합 세포주의 제조방법에 관한 것으로, 구체적으로 세라마이드 글루코실트랜스퍼라제(CGT)에 특이적으로 결합하는 siRNA 및 miRNA를 사용하여 CGT 억제를 유도하는 세포주에서 세포 내 고함량의 시알산(sialic acid)을 포함하는 에리스로포이에틴(EPO)을 생성함으로써 재조합 치료 단백질의 체내 반감기를 증가시켜 이를 이용하는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
Abstract translation: 本发明涉及通过在产生重组糖蛋白的细胞系中抑制糖鞘脂（GSL）生物合成途径制备重组细胞系的重组细胞系的方法，所述重组细胞系具有高唾液酸含量。 特别地，本发明从细胞系产生在细胞中含有高含量的唾液酸的促红细胞生成素（EPO），其通过使用特异性结合神经酰胺葡糖基转移酶（CGT）的siRNA和miRNA诱导CGT抑制，从而增加 重组治疗蛋白的体内半衰期，因此可用于使用其的治疗。
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公开(公告)号：KR101488778B1
公开(公告)日：2015-02-06
申请号：KR1020130032288
申请日：2013-03-26
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본 발명은 자일리톨 탈수소효소(xylitol dehydrogenase,
XDH )가 제거된 기존의 변이주에서 자일룰로스 키나아제(xylulose kinase,
XK )를 추가적으로 제거한 생산균주 및 이를 이용하여 반복적인 발효공정에도 높은 수율을 나타내는 자일리톨 생산방법에 관한 것이다. 구체적으로, 자일룰로스 키나아제 유전자의 활성이 제거된 균주를 선별하였으며, 선별된 균주의 반복적인 발효실험을 통해 균주의 발효 생리학적 특성을 분석하여 공정을 최적화하고, 반복적인 발효공정에도 높은 수율을 유지할 수 있는 균주 및 공정을 확립함으로써, 본 발명의 자일리톨 생산균주 및 생산방법이 고수율, 고생산성으로 자일리톨을 생산하는데 유용하게 사용될 것이다.-
公开(公告)号：KR1020110078548A
公开(公告)日：2011-07-07
申请号：KR1020090135380
申请日：2009-12-31
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: PURPOSE: A method for preparing xylitol at a high yield by the constitutive expression of xylose reductase is provided to massively produce xylitol. CONSTITUTION: A gene construct comprises: a promoter having a base sequence of sequence number 1; a polynucleotide having a base sequence of sequence number 7; and a terminator having a base sequence of sequence number 2. A strain which produces xylitol is cultured in a medium containing biomass hydrolysate and carbon source. The biomass hydrolysate is selected from the group consisting of corncob hydrolysate, sugar cane cob hydrolysate, coconut by-product, and Betula platyphylla var. japonica (Miquel) Hara hydrolysate.
Abstract translation: 目的：提供通过木糖还原酶的组成型表达以高产率制备木糖醇的方法，以大量生产木糖醇。 构成：基因构建体包含：具有序列号1的碱基序列的启动子; 具有序列号7的碱基序列的多核苷酸; 和具有序列号2的碱基序列的终止子。产生木糖醇的菌株在含有生物质水解产物和碳源的培养基中培养。 生物质水解物选自玉米芯水解产物，甘蔗棒状水解产物，椰子副产物和Betula platyphylla var。 粳米（Miquel）Hara水解产物。
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公开(公告)号：KR1020150145673A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：KR1020140090992
申请日：2014-07-18
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/09 , C07K14/00 , C07K14/505
CPC classification number: C07K14/505 , C12N9/1051 , C12N15/1137 , C12N2310/14 , C12N2310/141 , C12N2330/50 , C12P21/005 , C12Y204/0108 , C12N15/09
Abstract: 본발명은재조합당단백질(glycoprotein)을생성하는세포주에서당지질(glycospingolipid(GSL)) 생합성경로를억제시켜고 시알산(sialic acid) 함량의재조합당단백질을생산하는재조합세포주의제조방법에관한것으로, 구체적으로세라마이드글루코실트랜스퍼라제(CGT)에특이적으로결합하는 siRNA 및 miRNA를사용하여 CGT 억제를유도하는세포주에서세포내 고함량의시알산(sialic acid)을포함하는에리스로포이에틴(EPO)을생성함으로써재조합치료단백질의체내반감기를증가시켜이를이용하는치료에유용하게사용될수 있다.
Abstract translation: 本发明涉及通过在产生重组糖蛋白的细胞系中抑制糖鞘脂（GSL）生物合成途径来制备具有高唾液酸含量的重组糖蛋白的重组细胞系的方法。 特别地，通过在细胞系中产生含有高含量的唾液酸的促红细胞生成素（EPO），本发明的方法可以通过特异性的miRNA和siRNA诱导神经酰胺葡糖基转移酶（CGT）的抑制 结合CGT，从而增加重组治疗性蛋白质的体内半衰期。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR101227042B1
公开(公告)日：2013-01-28
申请号：KR1020100016842
申请日：2010-02-24
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본 발명의 유전자 클로닝 방법에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명에 따른 유전자 클로닝 방법은 단순히 해당 유전자의 단백질 번역 부위(개시코돈부터 종결코돈까지)만이 아닌 해당 유전자의 프로모터(Promoter)와 터미네이터(terminator) 서열까지 확인이 가능한 방법으로, 프라이머의 설계에 따라 해당 유전자의 단백질 번역부위, 프로모터 부위 또는 터미네이터 부위를 클로닝할 수 있어, 서열이 알려져있지 않은 균주의 유전자 클로닝은 물론, 유전자의 조절 메카니즘 연구에도 유용하게 사용될 수 있다.
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公开(公告)号：KR101149001B1
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：KR1020100016836
申请日：2010-02-24
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본 발명은 포도당을 보조기질로 이용할 수 있는 자일리톨 생산 균주 및 고생산성 발효 방법에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 자일로스 환원효소가 항구적으로 발현되는 자일리톨 생산 균주인 캔디다 트로피칼리스(
Candida tropicalis )에서 EMP 경로에 결정적인 역할을 하는, 포도당인산이성질화효소(phosphoglucoseisomerase,
pgi ), 과당인산키나아제 1(phosphofructokinase 1,
pfk1 ) 또는 과당인산키나아제 2(phosphofructokinase 2,
pfk2 ) 유전자를 녹아웃시켜 상기 유전자가 녹아웃된 균주의 자일리톨 생산속도를 비교한 결과, 상기
pfk2 유전자의 이배체가 모두 녹아웃된 균주의 자일리톨 생산속도가 현저히 증가하였음을 확인함으로써, 자일리톨의 제조 수율 및 생산속도를 향상시킬 수 있는 방법으로 유용하게 사용될 수 있다.-
公开(公告)号：KR1020110097159A
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：KR1020100016842
申请日：2010-02-24
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12Q1/6869 , G06F19/18
Abstract: 본 발명의 유전자 클로닝 방법에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명에 따른 유전자 클로닝 방법은 단순히 해당 유전자의 단백질 번역 부위(개시코돈부터 종결코돈까지)만이 아닌 해당 유전자의 프로모터(Promoter)와 터미네이터(terminator) 서열까지 확인이 가능한 방법으로, 프라이머의 설계에 따라 해당 유전자의 단백질 번역부위, 프로모터 부위 또는 터미네이터 부위를 클로닝할 수 있어, 서열이 알려져있지 않은 균주의 유전자 클로닝은 물론, 유전자의 조절 메카니즘 연구에도 유용하게 사용될 수 있다.
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公开(公告)号：KR1020120038030A
公开(公告)日：2012-04-23
申请号：KR1020100097335
申请日：2010-10-06
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12P7/18
Abstract: PURPOSE: An arabinose metabolic pathway-introduced xylitol-producing strain and a method for producing xylitol using the same are provided to suppress arabitol generation. CONSTITUTION: A xylitol-producing strain(deposit number KCTC 11761BP) with suppressed arabitol generation is prepared by introducing a gene expression cassette containing an arabinoser metabolic pathway-associated gene into Candida sp. A method for procuring the strain comprises: a step of preparing a gene expression cassette having a terminator, a promoter, and a polynucleotide encoding L-arabinose isomerase; a step of preparing a gene having a promoter, a terminator, and a polynucleotide encoding L-ribrokinase; and a step of preparing a gene expression cassette having a promoter, a terminator, and a polynucleotide encoding L-ribrose-5-phosphate 4-epimerase.
Abstract translation: 目的：提供一种阿拉伯糖代谢途径引入的木糖醇生产菌株及使用其生产木糖醇的方法以抑制阿糖醇的产生。 构成：通过将含有阿拉伯糖代谢途径的基因的基因表达盒引入假丝酵母属（Candida sp。）制备具有抑制的阿拉伯糖醇生成的木糖醇生产菌株（保藏号KCTC 11761BP）。 获得该菌株的方法包括：制备具有终止子，启动子和编码L-阿拉伯糖异构酶的多核苷酸的基因表达盒的步骤; 制备具有启动子，终止子和编码L-核糖激酶的多核苷酸的基因的步骤; 以及制备具有启动子，终止子和编码L-核糖糖-5-磷酸4-差向异构酶的多核苷酸的基因表达盒的步骤。
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公开(公告)号：KR1020110080138A
公开(公告)日：2011-07-12
申请号：KR1020110059736
申请日：2011-06-20
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: PURPOSE: A method for preparing xylitol of high yield in a medium containing glucose using a xylitol producing strain is provided to produce xylitol of high yield and high productivity without glucose suppression. CONSTITUTION: A gene construct contains a promoter containing a base of sequence number 1, a polynucleotide having a base of sequence number 7, and a terminator having a base of sequence number 2. The gene construct contains a promoter containing 1000bp or more base sequences, a polynucleotide having a base of sequence number 7, and a terminator having a base of sequence number 2. An expression vector contains one or more gene constructs. A method for producing a large amount of xylitols comprises: a step of culturing a xylotol-producing strain in a medium containing biomass hydrolysate and carbon source; a step of producing xylitol from the strain; and a step of isolating xylitol from the culture liquid.
Abstract translation: 目的：提供使用木糖醇生产菌株在含葡萄糖的培养基中制备高产率的木糖醇的方法，以生产高产率和高生产率的木糖醇而不需要葡萄糖抑制。 构成：基因构建体含有启动子，其含有序列号1的碱基，具有序列号7的碱基的多核苷酸和具有序列号2的碱基的终止子。该基因构建体含有含有1000bp或更多碱基序列的启动子， 具有序列号7的碱基的多核苷酸和具有序列号2的碱基的终止子。表达载体含有一种或多种基因构建体。 一种生产大量木糖醇的方法包括：在含有生物质水解物和碳源的培养基中培养产生木糖醇的菌株的步骤; 从菌株中生产木糖醇的步骤; 和从培养液中分离木糖醇的步骤。
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