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    세포표면에서 발현되는 항균 펩타이드 다중합체
    1.
    发明申请
    세포표면에서 발현되는 항균 펩타이드 다중합체 审中-公开
    在细胞表面表达的抗微生物肽多肽共聚物

    公开(公告)号：WO2012077849A1

    公开(公告)日：2012-06-14

    申请号：PCT/KR2010/009434

    申请日：2010-12-28

    Applicant: 한국과학기술원 ,  김선창 ,  신주리 ,  임기정 ,  김다정 ,  이영웅 ,  장수아 ,  성봉현

    Inventor： 김선창 ,  신주리 ,  임기정 ,  김다정 ,  이영웅 ,  장수아 ,  성봉현

    IPC: C07K14/195 ,  C07K19/00 ,  C12N15/63 ,  A61P31/04

    CPC classification number: A61K47/48776 ,  A61K38/16 ,  A61K47/65 ,  A61K47/6901 ,  C07K14/21 ,  C07K14/245 ,  C07K14/255 ,  C07K14/4723 ,  C07K2319/035 ,  C07K2319/50 ,  C12N15/62 ,  C12P21/02 ,  C12P21/06

    Abstract: 본 발명은 펩신에 의해 절단되는 단량체를 1개 이상 포함하는 항균 펩타이드 중합체, 상기 중합체에 세포표면 발현 모체가 연결된 항균 펩타이드 다중합체 및 이를 발현하는 항균 미생물, 이를 포함하는 항균용 조성물, 상기 항균용 조성물을 투여하여 세균, 효모 또는 진균에 의한 감염성 질환을 치료하는 방법 및 상기 항균 미생물의 제조 방법을 제공한다. 본 발명에 의하면, 항균 펩타이드를 생산하기 위하여 세포 파쇄, 항균 펩타이드의 분리 및 정제과정을 거칠 필요 없이 이를 세포표면에 발현하는 미생물을 생균 상태로 직접 생체 내에 투여하여 항균활성을 나타내도록 함으로써, 항균 펩타이드의 생산비용을 현저히 낮추어 항균 펩타이드의 보급화를 유도할 수 있는 효과가 있다.

    Abstract translation: 本发明提供一种抗微生物肽聚合物，其包含由胃蛋白酶切割的一种或多种单体，其中细胞表面表达母体与聚合物连接的抗微生物肽多嵌段共聚物和表达其的抗微生物微生物，含有该单体的抗微生物组合物， 通过施用抗微生物组合物来治疗由细菌，酵母或真菌引起的感染性疾病的方法和用于制备抗微生物的方法。 根据本发明，通过在细胞表面上直接施用表达抗微生物肽的微生物进入生物体而不需要细胞破碎或分离和纯化用于生产抗微生物肽的抗微生物肽，出现抗微生物活性，因此， 抗菌肽的生产成本显着降低，引起抗菌肽的广泛应用。

    번역 동반 시스템을 이용한 항균 펩타이드의 대량 발현방법
    3.
    发明授权
    번역 동반 시스템을 이용한 항균 펩타이드의 대량 발현방법 有权
    通过使用翻译耦合系统对抗微生物肽进行大规模表达的方法

    公开(公告)号：KR100958095B1

    公开(公告)日：2010-05-14

    申请号：KR1020070141932

    申请日：2007-12-31

    Applicant: 한국과학기술원

    Inventor： 김선창 ,  장수아 ,  김정민 ,  성봉현 ,  임기정 ,  신주리 ,  이주영

    IPC: C07K14/47 ,  C12N15/09

    CPC classification number: C12N15/67 ,  C07K14/4702

    Abstract: 본 발명은 미생물로부터 항균 펩타이드(antimicrobial peptide)를 효과적으로 생산할 수 있는 유전자 구조물 및 이를 이용하여 항균 펩타이드를 효과적으로 대량생산 및 분리하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 유전자 구조물에는 하나의 프로모터 하에 상반된 전하 값(charge)을 지닌 산성(acidic) 펩타이드와 염기성(basic)의 항균 펩타이드를 코딩하는 두 개의 독립된 시스트론(cistron)이 번역동반(translational coupling) 상태로 존재한다. 번역동반된 산성 펩타이드와 염기성 항균 펩타이드는 발현과 동시에 서로 전기적으로 결합(charge-charge interaction)하여 항균 펩타이드의 세포 독성을 중화시켜, 항균 펩타이드에 의한 숙주 미생물의 사멸을 방지할 수 있다. 뿐만 아니라, 화학물질 또는 효소에 의한 분해 없이 결합된 산성 펩타이드와 항균 펩타이드를 분리할 수 있어 재조합 미생물로부터 항균 펩타이드를 손쉽게 대량으로 생산할 수 있다.
    항균 펩타이드, 대량발현, 번역동반(translational coupling), 산성 단백질

    염색체 특정 부위 제거용 재조합 벡터 및 이를 이용한미생물 내 염색체 특정 부위의 제거방법
    4.
    发明公开
    염색체 특정 부위 제거용 재조합 벡터 및 이를 이용한미생물 내 염색체 특정 부위의 제거방법 有权
    用于去除染色体的特定区域的重组载体和使用该染色体的微生物中特异性染色体区域的清除方法

    公开(公告)号：KR1020090086870A

    公开(公告)日：2009-08-14

    申请号：KR1020080012377

    申请日：2008-02-11

    Applicant: 한국과학기술원

    Inventor： 김선창 ,  강귀현 ,  유병조 ,  이준형 ,  성봉현 ,  이충훈 ,  이상희 ,  이주영 ,  박명근

    IPC: C12N15/66 ,  C12N15/64 ,  C12N15/09

    CPC classification number: C12N15/102 ,  C12N15/70 ,  C12N15/902 ,  C12N2800/80 ,  C12N2830/002

    Abstract: A recombinant vector for removing a specific site of chromosome is provided to sequencially and simply remove the specific gene site in a microorganism at once. A recombinant vector for removing a specific site of chromosome comprises a promoter (Para) which is induced by arabinose; a gene which encodes a protein related to lamda-red recombination; and promoter which is induced by a rhamnose. A method for removing the specific site of the chromosome using the recombinant vector comprises: a step of preparing a linear DNA fragment having homologous site A and B which is related to lamda-red recombination, I-SceI restriction enzyme cutting site, and homologous site C which is related to homologous recombination for removing selection marker; a step of introducing linear DNA fragement in transformed microorganism and replacing at specific site of microorganism chromosome; and a step of expressing I-SceI restriction enzyme and removing selection marker.

    Abstract translation: 提供了一种用于去除染色体特异性位点的重组载体，以便一次性地顺序并简单地除去微生物中的特异性基因位点。 用于去除染色体特异位点的重组载体包含由阿拉伯糖诱导的启动子（Para）; 编码与lamda-red重组相关的蛋白质的基因; 和由鼠李糖诱导的启动子。 使用重组载体去除染色体的特定位点的方法包括：制备与lamda-red重组，I-SceI限制酶切割位点和同源位点相关的具有同源位点A和B的线性DNA片段的步骤 C与同源重组相关，用于去除选择标记; 在转化的微生物中引入线性DNA分解并在微生物染色体的特定部位置换的步骤; 以及表达I-SceI限制酶并除去选择标记的步骤。

    번역 동반 시스템을 이용한 항균 펩타이드의 대량 발현방법
    5.
    发明公开
    번역 동반 시스템을 이용한 항균 펩타이드의 대량 발현방법 有权
    通过使用翻译耦合系统对抗微生物肽进行大规模表达的方法

    公开(公告)号：KR1020090073863A

    公开(公告)日：2009-07-03

    申请号：KR1020070141932

    申请日：2007-12-31

    Applicant: 한국과학기술원

    Inventor： 김선창 ,  장수아 ,  김정민 ,  성봉현 ,  임기정 ,  신주리 ,  이주영

    IPC: C07K14/47 ,  C12N15/09

    CPC classification number: C12N15/67 ,  C07K14/4702

    Abstract: A method for expressing an antimicrobial peptide is provided to neutralize toxicity effect to host microbe by translational coupling system of antimicrobial peptide and acidic peptide and massively produce the antimicrobial peptide. A method for producing an antimicrobial peptide comprises: a step of preparing 2-cistron DNA structure to express a gene of basic antimicrobial peptide and gene of acidic peptide with a promoter; a step of inserting the 2-cistron DNA structure into an expression vector, inducing in microbe and express an inclusion body of basic antimicrobial peptide and acidic peptide; and a step of obtaining the inclusion body from a microbial cell and isolate basic antimicrobial peptide.

    Abstract translation: 提供表达抗微生物肽的方法，通过抗微生物肽和酸性肽的平移偶联体系中和宿主微生物的毒性作用，大量生产抗菌肽。 一种抗微生物肽的制造方法，其特征在于，具有通过促进剂表达碱性抗菌肽基因和酸性肽基因的2-顺反子DNA结构的步骤。 将2-顺反子DNA结构插入表达载体，诱导微生物并表达碱性抗微生物肽和酸性肽的包涵体的步骤; 以及从微生物细胞获得包涵体并分离碱性抗微生物肽的步骤。

    징크 핑거 단백질과 원핵 생물의 전사 인자를 포함하는인공 전사 인자의 제조 및 이의 이용
    10.
    发明授权
    징크 핑거 단백질과 원핵 생물의 전사 인자를 포함하는인공 전사 인자의 제조 및 이의 이용 有权
    包含锌指蛋白和人工转录因子的人工转录因子的制备及其用途

    公开(公告)号：KR100812110B1

    公开(公告)日：2008-03-12

    申请号：KR1020060103675

    申请日：2006-10-24

    Applicant: 한국과학기술원

    Inventor： 김선창 ,  이주영 ,  성봉현 ,  이준형 ,  이상희 ,  강귀현

    IPC: C07K14/435

    CPC classification number: C07K14/4702 ,  C07K2319/81

    Abstract: An artificial transcription factor polypeptide is provided to control the activity of various prokaryotes by using a catabolite controlling protein of the prokaryotes as an effect domain, and induce various transformed E. coli(s) showing characteristics desired by a user through activation or inhibition of genes regardless of the action of the transcription factor inside of the E. coli by introducing the same thereinto, thereby obtaining the transformed E. coli with improved heat-resistance, low temperature resistance, high salinity resistance and growth speed. An artificial transcription factor polypeptide for activating or inhibiting gene expression artificially comprises 1 to 3 zinc finger domain(s) and a transcription factor of prokaryote, wherein the zinc finger domain is selected from the group consisting of zinc finger domains coded by nucleic acid sequences of SEQ ID : NOs. 13(Z1), 15(Z2), 17(Z3), 19(Z4), 21(Z5), 23(Z6), 25(Z7), 27(Z8), 29(Z9), 31(Z10), 33(Z11), 35(Z12), 37(Z13), 39(Z14), 41(Z15), 43(Z16), 45(Z17), 47(Z18), 49(Z19), 51(Z20), 53(Z21), 55(Z22), 57(Z23), 59(Z24), 61(Z25) and 63(Z26), and the transcription factor is selected from the group consisting of a wild type CRP(catabolite regulatory protein)(CRPW, residue 1-209) coded by SEQ ID : NO. 1, a CRP Del 137(residue 137-90) coded by SEQ ID : NO. 3 and a CRP Del 180(residue 1-180) coded by SEQ ID : NO. 5. A transformed E. coli is prepared by introducing the artificial transcription factor into the E. coli and has the heat-resistance and the resistance against the growth speed improvement, low temperature or high salt.

    Abstract translation: 提供人工转录因子多肽，以通过使用原核生物的分解代谢物控制蛋白作为效应结构域来控制各种原核生物的活性，并通过激活或抑制基因诱导显示用户期望的特征的各种转化的大肠杆菌 不管大肠杆菌内部的转录因子的作用如何，通过引入其中，从而获得具有改善的耐热性，耐低温性，高耐盐性和生长速度的转化的大肠杆菌。 用于人工激活或抑制基因表达的人工转录因子多肽包含1至3个锌指结构域和原核生物的转录因子，其中锌指结构域选自由锌指结构域编码的锌指结构域，所述锌指结构域由 SEQ ID：NO。 13（Z1），15（Z2），17（Z3），19（Z4），21（Z5），23（Z6），25（Z7），27（Z8），29（Z9），31（Z10） 33（Z11），35（Z12），37（Z13），39（Z14），41（Z15），43（Z16），45（Z17），47（Z18），49（Z19） 53（Z21），55（Z22），57（Z23），59（Z24），61（Z25）和63（Z26），转录因子选自野生型CRP（分解代谢调节蛋白） （CRPW，残基1-209）由SEQ ID NO： 1，编码SEQ ID NO：1的CRP Del 137（残基137-90）。 3和由SEQ ID NO：3编码的CRP Del 180（残基1-180）。 通过将人工转录因子引入大肠杆菌中制备转化的大肠杆菌，并且具有耐热性和抗生长速度改善的抗性，低温或高盐。

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