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公开(公告)号：CN118652877A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410904702.6
申请日：2024-07-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了纤维二糖差向异构酶突变体及其在乳果糖生产中的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过以野生型纤维二糖差向异构酶为出发序列，通过突变获得了一系列突变体，突变体比酶活力最高提升了210％。进一步利用含有该突变体的重组菌发酵全细胞催化生产乳果糖，含有突变体的重组菌乳果糖产量最高达到了0.68g/L，比含野生酶的突变体提高了58％。
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公开(公告)号：CN114480240B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210184191.6
申请日：2022-02-22
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/56 , C12N15/57 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12P19/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种产岩藻糖基乳糖的基因工程菌及生产方法，属于代谢工程和食品发酵技术。本发明利用合成生物学手段，基于从头合成途径构建岩藻糖基乳糖的大肠杆菌细胞工厂，采用CRISPR/Cas9基因编辑技术对宿主细胞中的旁路相关基因lacZ、wcaJ、nudD、pfkA、lon进行敲除，通过多质粒表达系统进行基因manB、manC、gmd和wcaG的组装，构建不同拷贝数的表达载体以增加关键基因的表达水平；并筛选不同来源的岩藻糖基转移酶提高限速酶的活力。构建得到的重组大肠杆菌可以利用甘油合成2’‑岩藻糖基乳糖和3‑岩藻糖基乳糖，遗传稳定，表达水平高，具有明显的工业化生产潜力。
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公开(公告)号：CN117645979A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202311443268.8
申请日：2023-11-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种α‑葡聚糖磷酸化酶及其在生产葡萄糖‑1‑磷酸中的应用，属于基因工程和现代酶技术工程领域。本发明提供了分别来自Dictyoglomus.thermophilum、Thermotoga maritima、Dictyoglomus.sp.NZ13‑RE01、Lactobacillus acidophilus、Thomasclavelia spiroformis的α‑葡聚糖磷酸化酶，对其最适pH、温度以及合成G‑1‑P的性能进行了研究。以可溶性淀粉为底物，以粗酶液催化生产G‑1‑P的转化率最高达到70.36％。本发明筛选得到的α‑葡聚糖磷酸化酶在实际工业化生产中具备良好的应用潜力。
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公开(公告)号：CN117305283A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311170985.8
申请日：2023-09-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了提高精氨酸脱亚胺酶酶活的突变体及其应用，属于分子生物学中的基因工程和酶工程技术领域。所述精氨酸脱亚胺酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2～9所示。本发明利用定点突变技术对已知精氨酸脱亚胺酶基因进行分子改造，得到了突变体酶F44W、N163P、E220I、E220L、N318E、A336G、T340I、N382F，本发明提供的系列突变体的催化活性较原始菌增加了1.04～2.35倍，且具有很好的稳定性，可用于精氨酸脱亚胺酶及体外瓜氨酸的生物制备，具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN117143790A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311038491.4
申请日：2023-08-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成乳酰‑N‑三糖的重组益生菌的构建及其应用，属于生物技术和食品发酵工程领域。本发明优化启动子和质粒拷贝数调控乳酰‑N‑三糖合成途径中的关键基因lgtA的表达，敲除宿主中防御外源DNA入侵的非特异性的核酸内切酶基因endA和乳酰‑N‑三糖合成途径中的旁支代谢基因wecB。本发明为代谢工程改造大肠杆菌Nissle1917生产乳酰‑N‑三糖奠定了基础，乳酰‑N‑三糖产量达到2040mg/L，也为益生菌应用于母乳低聚糖的生物合成提供了新思路和方法借鉴。本发明提供构建的重组大肠杆菌Nissle1917的方法提高了菌株的基因编辑效率，该方法的有益效果不仅仅限于目前的菌株和目前的产物。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116478894A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310277210.4
申请日：2023-03-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高唾液酸乳糖产量的基因工程菌及其生产方法，属于生物技术和食品发酵工程领域。本发明通过对基因neuB，neuC，neuA，lacY，lst和/或pst6‑224的表达，从而构建得到唾液酸乳糖的从头合成路径，通过模块化代谢工程平衡代谢通路、增加前体物质UDP‑乙酰葡糖胺相关合成基因的表达、构建谷氨酰胺循环体系、敲除大肠杆菌基因组唾液酸乳糖合成途径中旁支路径的lacZ、nanA、pfkA和nagB表达，以及筛选不同来源的α‑2,3(6)唾液酸转移酶，成功获得高效合成唾液酸乳糖的生产菌株，在发酵培养实验中，3'‑SL和6'‑SL的产量分别达到6.46g/L、4.07g/L。
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公开(公告)号：CN113957027A
公开(公告)日：2022-01-21
申请号：CN202111221266.5
申请日：2021-10-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高乳酰‑N‑岩藻六糖产量的基因工程菌及其生产方法，属于生物技术和食品发酵工程领域。本发明通过对外源基因lgtA，wbgO和FucT14的表达和大肠杆菌内源基因galE，galT，galK，manB，manC，gmd和wcaG的过表达，从而构建得到乳酰‑N‑岩藻六糖的从头合成路径，通过增加氧化还原辅因子NADPH相关合成基因的表达，以及敲除大肠杆菌基因组乳酰‑N‑岩藻六糖合成途径中旁支路径的lacZ和wcaJ表达，获得高效合成乳酰‑N‑岩藻六糖的生产菌株，在摇瓶实验中，乳酰‑N‑岩藻六糖产量达到4.21g/L，在3L发酵罐中，乳酰‑N‑岩藻六糖的产量达到34.21g/L。
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公开(公告)号：CN113025605A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110266275.X
申请日：2021-03-11
Applicant: 江南大学
IPC: C12N11/089 , C12N11/14 , C12N11/091 , C12N11/10 , C12N9/92 , C12N9/90 , C12P19/02 , C12P19/24
Abstract: 本发明公开了一种固定D‑葡萄糖异构酶与D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的方法，属于食品加工技术领域。本发明具体公开了一种以大孔载体、交联剂、双酶、无机金属离子杂化形成纳米花的固定化双酶方法，具体步骤是：a具有吸附功能的大孔载体吸附D‑葡萄糖异构酶与D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶；b加入交联剂对酶进行交联；c酶与无机金属离子组装形成双酶‑无机杂化纳米花；其中可以将a、b和c按任意顺序或同时进行制备固定化酶。本固定化双酶既具有较高的酶活，还能保持较好的稳定性和机械强度，既改善大孔载体固定化酶易解吸的问题，又解决有机‑无机杂化纳米花不易装柱连续生产的弊端，对双酶和多酶的固定化应用具有重要意义。
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公开(公告)号：CN119432953A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411269891.0
申请日：2024-09-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了蔗糖异构酶酶活提高的突变体及其应用，属于分子生物学中的基因工程和酶工程技术领域。本发明利用定点突变技术对已知蔗糖异构酶亲本进行分子改造，得到了突变体酶T522S/K340D、D222H/K340D、G467N/K340D、T522S、K340D、D222H、G467N，本发明提供的系列突变体的催化活性较原始菌增加了10％～25％；组合突变体T522S/K340D、D222H/K340D、G467N/K340D异麦芽酮糖转化率分别较原始菌增加2.3％、1.5％、1.3％，且具有很好的稳定性，可用于异麦芽酮糖的生物制备，具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN119193548A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411271478.8
申请日：2024-09-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了提高岩藻多糖酶酶活的突变体及其应用，属于分子生物学中的基因工程和酶工程技术领域。本发明利用定点突变技术对已知岩藻多糖酶基因进行分子改造，得到了突变体酶L46R、Y290F、D361T、N374D、L46R/Y290F、D361T/N374D、L46R/Y290F/N374D，本发明提供的系列突变体的催化酶活较原始菌增加了1.4‑2.67倍，可应用于岩藻低聚糖的制备，具有潜在的应用前景。
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