公开(公告)号：CN108034632A

公开(公告)日：2018-05-15

申请号：CN201711281781.6

申请日：2017-12-07

Applicant: 上海药明生物技术有限公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司

Inventor： 张朗 ,  张肖肖 ,  董慧芳 ,  蔡洁行 ,  周伟昌 ,  陈智胜

IPC: C12N5/071

CPC classification number: C12N5/0602 ,  C12N2509/10

Abstract: 本发明公开一种利用流式细胞仪进行细胞单克隆化的方法，包括：步骤一、细胞分选：使用清洁后的流式细胞仪进行细胞分选，利用FSC和SSC的信号进行细胞粘连体去除，孔板中每孔分选1个目标细胞。步骤三、细胞培养：将分选后的目标细胞在二氧化碳培养箱静置培养，培养条件为36.5℃和5～6％CO2，培养5～15天，待克隆恢复。采用本发明的方法，单克隆率达到99.5％。

公开(公告)号：CN107383034A

公开(公告)日：2017-11-24

申请号：CN201710512811.3

申请日：2017-06-29

Applicant: 上海药明康德新药开发有限公司 ,  天津药明康德新药开发有限公司 ,  武汉药明康德新药开发有限公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司 ,  无锡药明康德药业有限公司

Inventor： 张大为 ,  周强 ,  赵红双 ,  高明飞 ,  于智宇 ,  姚宝元 ,  卢荣昌 ,  白有银 ,  孙春 ,  刘雨雷 ,  韩华欣 ,  付新雨 ,  卢仔倚 ,  李旭东 ,  于凌波 ,  马汝建

IPC: C07D491/048

CPC classification number: C07D491/048 ,  C07B2200/07

Abstract: 本发明涉及一种外消旋-(3aR,7aR)-5-(叔丁氧羰基)-八氢呋喃并[3,2-c]吡啶-3a-羧酸的合成方法，主要解决目前没有适合工业化合成方法的技术问题。本发明分七步，首先由2-溴乙醇和丙炔酸乙酯在溶剂二氯甲烷中室温反应得到化合物2。然后化合物2和氰乙酸乙酯在溶剂N,N-二甲基甲酰胺中室温反应过夜得到化合物3。化合物3进行催化加氢将氰基还原得到氨基，并同时与自身的酯交换得到化合物4。化合物4上氯甲酸苄酯得到化合物5。化合物5硼烷还原得到化合物6。最后化合物6在乙醇中，用氢氧化钯作为催化剂，同时加入Boc酸酐，通入氢气过夜反应得到目标化合物7。化合物7在甲醇和水的混合溶液中，用水和氢氧化锂水解，得到最终目标化合物8。

公开(公告)号：CN107312007A

公开(公告)日：2017-11-03

申请号：CN201710512785.4

申请日：2017-06-29

Applicant: 上海合全药业股份有限公司 ,  上海合全药物研发有限公司 ,  常州合全药业有限公司 ,  常州合全新药研发有限公司 ,  无锡药明康德药业有限公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司

Inventor： 毛延军 ,  唐小伍 ,  郭泽民 ,  何米娜 ,  蒋欣欣 ,  鲍微泽 ,  吴东平 ,  袁超伟 ,  李红 ,  于凌波 ,  马汝建

IPC: C07D487/04

CPC classification number: C07D487/04

Abstract: 本发明涉及2-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-8-甲基-5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-7(8H)-羧酸叔丁酯的合成方法，主要解决目前没有适合工业化合成方法的技术问题。本发明分四步，第一步，首先由化合物1和氨水在高压釜中反应得到化合物2，第二步，化合物2与4-氧基-2-丁烯酸乙酯在乙腈中反应得到化合物3，第三步，化合物3在甲醇中用钯/碳作为催化剂，氢化反应得到化合物4，第四步，化合物4在乙醇中，加入Boc酸酐与碳酸钾，室温过夜反应，得到最终化合物5。

公开(公告)号：CN107198773A

公开(公告)日：2017-09-26

申请号：CN201710431179.X

申请日：2017-06-08

Applicant: 上海药明生物技术有限公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司 ,  苏州药明康德检测检验有限责任公司

Inventor： 吴晓丽 ,  刘琴 ,  贾春媛 ,  王叶飞 ,  罗建军 ,  周伟昌 ,  陈智胜

IPC: A61K39/395 ,  A61P35/00 ,  A61P31/00 ,  A61P37/02 ,  A61P37/06

Abstract: 本发明公开了一种稳定的重组抗PD‑L1全人单克隆抗体的液体制剂，包含有：重组抗PD‑L1全人单克隆抗体、缓冲溶液、稳定剂、渗透压调节剂和表面活性剂。其中，缓冲液为组氨酸‑盐酸组氨酸缓冲液，稳定剂为甘露醇，渗透压调节剂为氯化钠，表面活性剂为聚山梨酯80。本发明的重组抗PD‑L1全人单克隆抗体的液体制剂的稳定性优良，在5℃±3℃温度条件下至少可稳定保存24个月。

公开(公告)号：CN106987559A

公开(公告)日：2017-07-28

申请号：CN201710172903.1

申请日：2017-03-22

Applicant: 上海药明生物技术有限公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司 ,  苏州药明康德检测检验有限责任公司

Inventor： 韩阳 ,  张朗 ,  张肖肖 ,  董烨平 ,  董慧芳 ,  蔡洁行 ,  周伟昌 ,  陈智胜

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/38

CPC classification number: C07K14/005 ,  C12N15/85 ,  C12N2510/00 ,  C12N2710/16222 ,  C12N2800/22 ,  C12N2820/60

Abstract: 本发明公开一种能够稳定表达截短型EBNA1蛋白的重组CHOK1细胞株的构建方法，包括以下步骤：(1)EBNA1t表达载体的构建，将如SEQ ID NO:1所示序列克隆至pWX1.0和pWX2.0载体中；(2)转染与细胞群筛选；(3)有限稀释法克隆，挑选单克隆细胞株。本发明还公开上述方法获得的重组CHOK1‑EBNA1t细胞株用于重组蛋白瞬时表达的应用，包括以下步骤：(1)构建重组蛋白瞬时表达载体；(2)转染前进行细胞传代培养；(3)转染与细胞培养工艺，使用PEI将步骤(1)得到的重组蛋白瞬时表达载体转染步骤(2)传代培养获得的CHOK1‑EBNA1t细胞株；(4)评估重组蛋白的表达量。本发明的重组CHOK1‑EBNA1t细胞株用于重组蛋白瞬时表达，不仅表达量高，一般为100‑300mg/L，而且工艺简便，既适用于大体积生产，也适用于小体积高通量筛选。

公开(公告)号：CN106399360A

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201510447211.4

申请日：2015-07-27

Applicant: 上海药明生物技术有限公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司

Inventor： 邱沛然 ,  蔡洁行 ,  周伟昌 ,  陈智胜

IPC: C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR技术敲除FUT8基因的方法，步骤包括：1)设计sgRNA序列；2)将sgRNA序列重组至第一载体中，得第二载体；3)将第二载体转染至细胞中，抽提DNA；4)PCR扩增；5)PCR产物变性、退火，形成异源杂交双链；6)切割异源杂交双链并分析产物，得各细胞群发生NHEJ的比例；7)挑选NHEJ比例高的细胞群进行有限稀释法克隆，筛选单克隆细胞扩大培养，获得FUT8基因敲除抗体。本发明还公开了用于上述方法的sgRNA序列。本发明通过编码能识别FUT8基因特定序列的sgRNA，将其与编码核酸内切酶的序列转染进细胞中，实现了让FUT8基因失活的目的，提高了抗体ADCC活性。

公开(公告)号：CN105596012A

公开(公告)日：2016-05-25

申请号：CN201510976115.9

申请日：2015-12-23

Applicant: 苏州药明康德新药开发股份有限公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司

Inventor： 薛彬 ,  金毅 ,  周聪颖 ,  王福强 ,  张伟军 ,  胡璇 ,  毕玲玲 ,  谢瑞东 ,  王新峰 ,  赵莹

IPC: A61B5/15 ,  A61B5/155 ,  A61B5/153

CPC classification number: A61B5/150992 ,  A61B5/153 ,  A61B5/155

Abstract: 本发明公开了一种动物颈静脉微透析方法，步骤包括：1)麻醉动物，颈部剃毛消毒，垂直切开一侧颈部；2)钝性分离颈静脉周围脂肪及结缔组织；3)在术侧颈背部皮下，钝性分离皮下囊腔，并穿刺出通道；4)用分离式套管针的针头在颈静脉远心端刺穿血管，将套管推进至颈静脉，拔出针头，将微透析探针通过套管插入颈静脉并固定，撤出套管；5)将微透析探针的导管导出体外，接上注射泵灌注；6)灌注完毕，缝合切口。本发明通过颈静脉插管的方法进行微透析，不仅具有采样量少、组织损伤小、数据更真实可靠的优点，而且可以对清醒自由活动动物进行连续采样、实时监测，并定量分析，可以作为体内或体外化合物如药物研究的有效手段。

公开(公告)号：CN105586421A

公开(公告)日：2016-05-18

申请号：CN201610091494.8

申请日：2016-02-19

Applicant: 苏州药明康德检测检验有限责任公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司

Inventor： 魏良君 ,  贾明媚 ,  唐苏

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12R1/35

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/689 ,  C12Q2521/101 ,  C12Q2527/101

Abstract: 本发明公开了一种支原体TD-PCR检测方法，步骤包括：1)抽提待测样品DNA；2)采用TD-PCR方法检测待测样品DNA中是否含有支原体。本发明还公开用于上述检测方法的引物对。本发明通过TD-PCR方法检测支原体，相比现有的支原体检测方法，不仅缩短了检测时间，而且增加了检测的特异性和稳定性，同时还减少了实验过程中有毒有害试剂对于人体及环境的危害。

公开(公告)号：CN105506187A

公开(公告)日：2016-04-20

申请号：CN201610091937.3

申请日：2016-02-19

Applicant: 苏州药明康德检测检验有限责任公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司

Inventor： 钱学敏 ,  姜东秀 ,  刘大钧

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2561/101

Abstract: 本发明公开了一种小鼠细小病毒的定量PCR检测方法，步骤包括：1)提取待测样品DNA；2)制备包含Master mix、上下游引物、探针的PCR反应液；3)梯度稀释标准品；4)试剂的阴性对照、待测样品的阴性对照以及加入了标准品的待测样品上样；5)PCR反应。本发明还公开了上述方法所用的引物对和探针的序列。本发明采用TaqMan探针的定量PCR方法检测小鼠细小病毒，相比传统的MVM检测方法，不仅具有更高的特异性和灵敏性，而且简单易操作，检测耗时短，结果稳定性和重复性好，适合生物生产过程中各个阶段的MVM感染测试。

公开(公告)号：CN105420202A

公开(公告)日：2016-03-23

申请号：CN201511016482.0

申请日：2015-12-30

Applicant: 苏州药明康德检测检验有限责任公司 ,  无锡药明康德生物技术股份有限公司

Inventor： 范洁 ,  姜东秀 ,  塞伦苏 ,  刘大钧

IPC: C12N7/02

CPC classification number: C12N7/00

Abstract: 本发明公开了一种病毒纯化放大方法，步骤包括：1)去除病毒中的细胞碎片；2)采用层析法捕获病毒；3)用核酸酶处理步骤2)捕获的病毒，酶解病毒中的宿主细胞核酸；4)对步骤3)处理后的病毒进行精细纯化，去除宿主细胞蛋白、核酸片段。本发明应用层析法实现病毒纯化放大，并在层析柱、层析填料方面进行优化，相较于传统病毒纯化方法，不仅提高了纯化后的病毒纯度和滴度，而且具有易放大、成本低的优点；所得低残留、高纯度、高滴度的病毒运用到病毒清除验证中，可增加病毒过滤膜的通量，降低病毒过滤膜的成本投入。