公开(公告)号：CN114736257A

公开(公告)日：2022-07-12

申请号：CN202210546132.9

申请日：2022-05-18

Applicant: 江苏集萃工业生物技术研究所有限公司 ,  南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  温庆仕 ,  陈勇 ,  魏荷芬 ,  王骏之

IPC: C07H19/067 ,  C07H1/06 ,  C12P19/38

Abstract: 本发明公开了一种从含尿苷的催化液中分离提取尿苷的方法，包括以下步骤：(1)将含尿苷的催化液与聚乙二醇混合后分液，下层为尿苷催化液；(2)所得尿苷催化液经纳滤，收集纳滤透过液；(3)所得纳滤透过液经蒸发浓缩，得到尿苷浓缩液；(4)所得尿苷浓缩液调节pH后，加入晶种，搅拌析晶。本发明中的结晶体系为水体系，不必增加任何试剂，降低结晶成本。本发明的结晶过程在12h以内完成获得亮白色晶体，一次结晶收率大于60％，经多次结晶或嵌套结晶后总结晶收率在90％以上，同时晶体的纯度大于98％，产品质量、收率、成本高于现有技术。

公开(公告)号：CN114480340A

公开(公告)日：2022-05-13

申请号：CN202210067132.0

申请日：2022-01-20

Applicant: 郑州大学 ,  南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  瞿明金 ,  温庆仕 ,  郑诚 ,  王骏之

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/30 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种嗜盐胆碱激酶突变体，所述突变体由序列为SEQ ID NO:1的胆碱激酶突变而来。本发明的嗜盐胆碱激酶突变体M1‑M3相较于野生型的嗜盐胆碱激酶具有更高的催化活性和耐盐性，可以更好的应用于胞苷二磷酸胆碱的制备上。

公开(公告)号：CN110305022B

公开(公告)日：2020-12-22

申请号：CN201910692325.3

申请日：2019-07-30

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  杨朋朋 ,  林晨光 ,  温庆仕 ,  吴菁岚 ,  王骏之 ,  朱晨杰 ,  陈勇 ,  柳东 ,  欧阳平凯

IPC: C07C209/86 ,  C07C211/09 ,  C07C209/84

Abstract: 本发明公开一种利用微波提取戊二胺的方法，其特点在于通过微波作用于含有戊二胺的体系中，使得体系中的戊二胺以气相的形式挥发出来，获得含有戊二胺的蒸汽或含有戊二胺的水溶液，从而达到分离戊二胺的目的，而后进一步纯化制备戊二胺纯品或者制备戊二胺二羧酸盐。本发明的有益之处在于，对戊二胺的提取效率高，提取收率高，可一步法实现戊二胺与色素、杂蛋白、无机盐等杂质的分离。

公开(公告)号：CN108795958B

公开(公告)日：2020-04-07

申请号：CN201810755901.X

申请日：2018-07-11

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  丁梦林 ,  牛欢青 ,  王骏之 ,  柳东 ,  庄伟 ,  朱晨杰 ,  陈勇

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N9/12 ,  C12P19/32 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一株表达多聚磷酸激酶的重组菌，包括宿主细胞和转入宿主细胞的重组载体，所述重组载体由原始载体及接入原始载体的目的基因构成。本发明提供的用于编码多聚磷酸激酶的碱基序列如SEQ ID No:1所示。本发明的大肠杆菌基因工程菌可以高效表达多聚磷酸激酶，其诱导酶活可达3.92U/mg，该酶表现出良好的催化活性和稳定性，对底物AMP的转化率达到95％以上。本发明还公开了上述基因工程菌在ATP再生过程中的应用，与现有的ATP再生的方法相比，本发明中应用的多聚磷酸激酶可作为单一的酶将AMP再生为ATP，简化了酶的使用，降低了ATP再生的成本。

公开(公告)号：CN110305022A

公开(公告)日：2019-10-08

申请号：CN201910692325.3

申请日：2019-07-30

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  杨朋朋 ,  林晨光 ,  温庆仕 ,  吴菁岚 ,  王骏之 ,  朱晨杰 ,  陈勇 ,  柳东 ,  欧阳平凯

IPC: C07C209/86 ,  C07C211/09 ,  C07C209/84

Abstract: 本发明公开一种利用微波提取戊二胺的方法，其特点在于通过微波作用于含有戊二胺的体系中，使得体系中的戊二胺以气相的形式挥发出来，获得含有戊二胺的蒸汽或含有戊二胺的水溶液，从而达到分离戊二胺的目的，而后进一步纯化制备戊二胺纯品或者制备戊二胺二羧酸盐。本发明的有益之处在于，对戊二胺的提取效率高，提取收率高，可一步法实现戊二胺与色素、杂蛋白、无机盐等杂质的分离。

公开(公告)号：CN108795958A

公开(公告)日：2018-11-13

申请号：CN201810755901.X

申请日：2018-07-11

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  丁梦林 ,  牛欢青 ,  王骏之 ,  柳东 ,  庄伟 ,  朱晨杰 ,  陈勇

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N9/12 ,  C12P19/32 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一株表达多聚磷酸激酶的重组菌，包括宿主细胞和转入宿主细胞的重组载体，所述重组载体由原始载体及接入原始载体的目的基因构成。本发明提供的用于编码多聚磷酸激酶的碱基序列如SEQ ID No:1所示。本发明的大肠杆菌基因工程菌可以高效表达多聚磷酸激酶，其诱导酶活可达3.92U/mg，该酶表现出良好的催化活性和稳定性，对底物AMP的转化率达到95％以上。本发明还公开了上述基因工程菌在ATP再生过程中的应用，与现有的ATP再生的方法相比，本发明中应用的多聚磷酸激酶可作为单一的酶将AMP再生为ATP，简化了酶的使用，降低了ATP再生的成本。

公开(公告)号：CN104774799A

公开(公告)日：2015-07-15

申请号：CN201510184705.8

申请日：2015-04-17

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  王骏之 ,  刘映淼 ,  杨晟 ,  陶荣盛 ,  蒋宇

IPC: C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12N15/70 ,  C12N15/81 ,  C12N15/54 ,  C12P39/00 ,  C12P19/30 ,  C12R1/19 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一株表达胆碱激酶及磷酰胆碱胞苷转移酶的基因工程菌，属于基因工程技术领域。该菌株是导入了磷酰胆碱胞苷转移酶CCT基因和胆碱激酶CKI基因共表达质粒的基因工程菌，所述的CCT基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1中1～1275所示；所述的CKI基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1中1276～3024所示。本发明的大肠杆菌基因工程菌株可以高效表达胆碱激酶，其诱导酶活达1.94U/mg。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及利用该基因工程菌催化产胞磷胆碱的应用，催化体系中胞磷胆碱的含量达到19g/L。将该菌株应用于生产胞磷胆碱，具有工艺简单、条件温和、周期短、副产物少等优点。