一步法反转录PCR检测和分型寨卡病毒的试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN105936946A

    公开(公告)日:2016-09-14

    申请号:CN201610481524.6

    申请日:2016-06-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一步法反转录PCR检测和分型寨卡病毒的引物、探针及试剂盒,以及其检测方法和应用,以用于灵敏地、特异地、高效快速地同时检测和分型两种寨卡病毒基因型(亚洲型和非洲型)。本发明的设计原理在于:基于反转录PCR技术,建立一套适用于同时检测和分型两种寨卡病毒的一步法FRET‑PCR系统。此系统基于寨卡病毒两种基因型以及与之同源性较高的其他相关病原体的全基因序列,选择相对保守的区间设计引物和探针,通过特异性地扩增,可以灵敏、快速地从临床样品中检测并筛选出阳性样品,进而根据高分辨率熔解曲线中熔解温度Tm值的不同,从而可信度高地区分寨卡病毒亚洲型和寨卡病毒非洲型,该试剂盒和检测方法操作便捷高效,适合于检测大量样本。

    反转录PCR检测基孔肯雅病毒的试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104513865B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410690212.7

    申请日:2014-11-25

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/68 Y02A50/51

    Abstract: 本发明公开了一种反转录PCR检测基孔肯雅病毒的试剂盒及其检测方法,本发明的一种反转录PCR检测基孔肯雅病毒的试剂盒,包括引物、探针和FRET-PCR标准品,所述引物为上游引物和下游引物;所述探针为6-FAM探针和LCRed640探针;所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列;所述6-FAM探针具有SEQ ID No.2的核苷酸序列;所述LCRed640探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列;所述下游引物具有SEQ ID No.4的核苷酸序列。本发明所建立的反转录PCR体系可以有效的扩增RNA,即可以快速、有效地扩增临床样品中基孔肯雅病毒RNA核酸。

    检测牛白血病的荧光定量PCR的试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104313185B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410597176.X

    申请日:2014-10-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测牛白血病的荧光定量PCR的试剂盒,包括FRET-PCR引物、探针和标准阳性模板,所述FRET-PCR引物为上游引物和下游引物;所述探针为6-FAM探针和LCRed640探针;所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列;所述下游引物具有SEQ ID No.2的核苷酸序列;所述6-FAM探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列;所述LCRed640探针具有SEQ ID No.4的核苷酸序列;所述标准阳性模板具有SEQ ID No.5的核苷酸序列。本发明提供了一种操作快速、方法简便、检测灵敏度高的牛白血病的实时定量PCR的检测试剂盒。

    一步法反转录PCR检测和分型埃博拉病毒5种亚型的引物、探针及试剂盒

    公开(公告)号:CN104313191B

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201410655921.1

    申请日:2014-11-17

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/68 C12Q1/70

    Abstract: 本发明提供了一种一步法反转录PCR检测和分型埃博拉病毒5种亚型的引物、探针及试剂盒,引物和探针的核苷酸序列如图1-图8,试剂盒包括样品DNA模板或者定量标准试剂、PCR缓冲液、FRET-上游引物、FRET-下游引物、的6-FAM探针、LCRed640探针、商业化Taq酶、dNTP、商业化反转录酶、商业化RNA酶抑制剂。本发明依据埃博拉病毒5种亚型中保守区间巧妙地设计1条上游引物、1对探针和5条针对五种埃博拉病毒亚型的下游引物,从而可以同时检测5种亚型的埃博拉病毒。

    一种沙门菌荧光定量PCR检测和分型的引物、探针及试剂盒

    公开(公告)号:CN103114148B

    公开(公告)日:2014-09-24

    申请号:CN201310068510.8

    申请日:2013-03-05

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 一种沙门菌的荧光定量PCR检测和分型的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ ID NO.1和2所示,所述探针为SEQ ID NO.3和4。用上述引物和探针PCR扩增待测菌,扩增出210bp条带,且荧光检测在640nm波长增强的为沙门菌阳性样本;再根据熔解温度可对沙门菌进行分型。本发明的技术优势明显,具有很高的特异性和敏感,可以方便的把主要病原菌(肠道沙门菌肠道亚种)和邦戈尔沙门菌、肠道沙门菌的其它亚种区分开。本发明的技术相比,可以方便地广泛的用于诊断人畜沙门菌的感染和细菌性食物中毒。

    一种沙门菌荧光定量PCR检测和分型的引物、探针及试剂盒

    公开(公告)号:CN103114148A

    公开(公告)日:2013-05-22

    申请号:CN201310068510.8

    申请日:2013-03-05

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 一种沙门菌的荧光定量PCR检测和分型的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQIDNO.1和2所示,所述探针为SEQIDNO.3和4。用上述引物和探针PCR扩增待测菌,扩增出210bp条带,且荧光检测在640nm波长增强的为沙门菌阳性样本;再根据熔解温度可对沙门菌进行分型。本发明的技术优势明显,具有很高的特异性和敏感,可以方便的把主要病原菌(肠道沙门菌肠道亚种)和邦戈尔沙门菌、肠道沙门菌的其它亚种区分开。本发明的技术相比,可以方便地广泛的用于诊断人畜沙门菌的感染和细菌性食物中毒。

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