基于数字PCR技术检测猪链球菌的引物和探针及其试剂盒与方法

    公开(公告)号:CN108913792A

    公开(公告)日:2018-11-30

    申请号:CN201810882415.4

    申请日:2018-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种基于数字PCR技术检测猪链球菌的引物和探针及其试剂盒与方法。引物和探针,包括上游引物FP、下游引物BP、探针Probe;检测试剂盒包括2×ddPCR Supermix、无RNA酶的超纯水、细菌总DNA提取试剂、阴性对照和阳性对照。其检测方法是通过提取待检样品DNA,利用微滴数字PCR技术对待检样品DNA进行定量检测,通过扩增分析得到的拷贝数判断待检样品是否含有猪链球菌,并测定其含量。本发明具有精准、灵敏、适用性广,无需依赖标准曲线,可实现绝对定量等优点,可实现猪链球菌病诊断的早发现、早治疗和早预防,能有效控制疫情爆发。

    一种银鲳鱼物种鉴定用标准质粒分子及其应用

    公开(公告)号:CN114369611A

    公开(公告)日:2022-04-19

    申请号:CN202111660982.3

    申请日:2021-12-31

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种银鲳鱼物种鉴定用标准质粒分子及其应用,其空白载体为质粒载体pUC24‑R载体,包含有银鲳鱼细胞色素氧化酶亚基I基因序列,其全碱基序列如SEQ NO.1所示。本发明首次构建了含有银鲳鱼特异基因序列的标准质粒分子pUC‑SA。本发明构建的质粒分子pUC‑SA是一种适用于鱼种属鉴定的标准物质,可用于实时荧光PCR检测银鲳鱼成鱼、苗种、鱼卵、鱼肉及其加工产品等物种鉴定工作中的质量控制,适用性强、稳定性好,对实际样品的检测结果准确,很好的解决了银鲳鱼检测过程中阳性标准物质缺乏的问题,使得检测过程和检测结果有参考,保证鉴定结果的可靠性,填补了银鲳鱼检测领域的技术空白,具有极高的应用价值与市场前景。

    一种翘嘴鳜鱼物种鉴定用标准质粒及其应用

    公开(公告)号:CN113061660A

    公开(公告)日:2021-07-02

    申请号:CN202011559566.X

    申请日:2020-12-25

    Abstract: 本发明公开了一种翘嘴鳜鱼物种鉴定用标准质粒及其应用,涉及分子生物学技术领域。标准质粒采用线粒体细胞色素氧化酶I亚基COI基因,应用包含一种嘴鳜鱼物种鉴定用实时荧光PCR检测试剂盒,所述检测试剂盒包含翘嘴鳜鱼特异性质粒分子pUC57‑SC及特异性检测引物和探针,所述检测试剂盒还包含PCR反应液、阳性对照和阴性对照。本发明首次构建了含有翘嘴鳜鱼特异基因序列的标准质粒分子pUC57‑SC,并且本发明构建的质粒分子pUC57‑SC可用于TaqMan探针实时荧光PCR检测翘嘴鳜成鱼、苗种、鱼卵、鱼肉及其加工产品,适用性强,稳定性好,对实际样品的检测结果准确,很好的解决了翘嘴鳜鱼测过程中阳性标准物质缺乏的问题,具有极高的应用价值与市场前景。

    基于荧光定量PCR检测银鲳的引物和探针及其试剂盒与方法

    公开(公告)号:CN108085396B

    公开(公告)日:2021-03-02

    申请号:CN201711230573.3

    申请日:2017-11-29

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于定量PCR技术快速鉴别银鲳的检测引物和探针,以及采用了该引物和探针的检测试剂盒和检测方法。检测引物组包括上游引物FP、下游引物BP和探针;检测试剂盒包括引物液、PCR MIX反应液、去离子水、阴性对照和阳性对照。其检测方法是通过提取待检样品DNA,利用荧光定量PCR技术对待检样品DNA进行快速检测,通过实时扩增曲线判断待检样品是否为银鲳。本发明具有快速、灵敏、特异、易操作等优点,适于推广应用等优点。

    一种快速检测食品中金黄色葡萄球菌的方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN110229918A

    公开(公告)日:2019-09-13

    申请号:CN201910525650.0

    申请日:2019-06-18

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 一种快速检测食品中金黄色葡萄球菌的方法及其试剂盒。该方法包括利用免疫磁珠富集金黄色葡萄球菌,对富集的金黄色葡萄球菌进行DNA提取,对提取的金黄色葡萄球菌的DNA进行LAMP检测等步骤。本发明的方案,使用链霉亲和素-生物素介导偶联的免疫磁珠,制备时间为1h,大大降低了制备免疫磁珠的时间。同时链霉亲和素与生物素间有极高的亲和力,故本发明的免疫磁珠能够与抗体和磁珠直接偶联制备的免疫磁珠相比,本发明的磁珠表面能够结合更多抗体,从而大大提高了捕获率。

    基于智能恒温扩增技术检测单核增生李斯特氏菌的引物组、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN109402272A

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201810972204.X

    申请日:2018-08-24

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 一种基于智能恒温扩增技术检测单核增生李斯特氏菌的引物组、试剂盒和方法。检测引物组包括TP引物、FP引物、BP引物、OP1引物和OP2引物;检测试剂盒包括引物液、反应液、Bst DNA聚合酶、错配结合蛋白、显色剂和对照。其检测方法是通过提取待检DNA,利用具有链置换活性的DNA聚合酶活性,采用四条特异性引物及一种错配结合蛋白,在60~65℃对样品DNA模板进行扩增,可检测到DNA的pg级,其鉴定方式是采用在反应体系中加入 Green I并在ESE-tube scanner仪器检测判断扩增与否,确定待检样品是否含有单核增生李斯特氏菌DNA。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点,适于推广应用。

    基于荧光定量PCR检测鲟鱼的引物和探针及其试剂盒与方法

    公开(公告)号:CN109337962A

    公开(公告)日:2019-02-15

    申请号:CN201810977529.7

    申请日:2018-08-24

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于定量PCR技术快速鉴别鲟鱼的检测引物和探针,以及采用了该引物和探针的检测试剂盒和检测方法。检测引物组包括上游引物FP、下游引物BP和探针;检测试剂盒包括引物液、PCR MIX反应液、去离子水、阴性对照和阳性对照。其检测方法是通过提取待检样品DNA,利用荧光定量PCR技术对待检样品DNA进行快速检测,通过实时扩增曲线判断待检样品是否为鲟鱼。本发明具有快速、灵敏、特异、易操作等优点,适于推广应用等优点。

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