一种装载shRNA的外泌体及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN111424017A

    公开(公告)日:2020-07-17

    申请号:CN202010228864.4

    申请日:2020-03-27

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种装载shRNA的外泌体及其构建方法与应用。本发明通过将可以有效沉默靶基因的shRNA序列克隆入表达载体,得到重组表达载体1;shRNA序列包括依次连接的靶序列、茎环结构序列和靶序列的互补序列;然后将能与所述的茎环结构特异性结合的蛋白A的基因与外泌体膜蛋白的基因连接,得到融合基因序列,再将所得的融合基因序列克隆入表达载体,得到重组表达载体2;最后将重组表达载体1、2同时转染细胞,培养转染后细胞,收集外泌体,即获得所述的装载shRNA的外泌体。该方法操作简单易行,工艺稳定,适用性好。所得外泌体中包载有大量shRNA,可以作为一种高效的药物传递系统。

    通过翻译暂停序列理性重设计改善蛋白质可溶性表达的方法

    公开(公告)号:CN103266105B

    公开(公告)日:2015-02-11

    申请号:CN201310164454.8

    申请日:2013-05-07

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种通过翻译暂停序列理性重设计改善蛋白质可溶性表达的方法。该方法包括如下步骤:根据蛋白质结构,确定翻译暂停位点应存在的位置;将翻译暂停范围外的缓慢翻译密码子突变为氨基酸相同的高频密码子;在翻译暂停范围内按照选择2~6个密码子进行同义突变,产生翻译暂停位点。该方法是在不改变蛋白质氨基酸序列的前提下,重新设计编码蛋白质的核苷酸序列,增强其可溶性表达的效率。适用性广,前景潜力大。

    一种包载蛋白的外泌体的制备方法与应用

    公开(公告)号:CN109321596B

    公开(公告)日:2021-12-17

    申请号:CN201811031133.X

    申请日:2018-09-05

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明提供了一种包载蛋白的外泌体的制备方法与应用。所述的外泌体制备方法采用重组表达外源目的蛋白的方法,包括蛋白的瞬时表达和稳定表达,通过工程化大规模培养细胞的手段,获得大量包含外源目的蛋白的外泌体。本发明的培养过程不需要添加血清,免除了外泌体提取过程中血清囊泡的污染;通过规模培养细胞来获取大量装载具有生物活性抗体的外泌体,为外泌体的产业化提供了可能性,具有良好的产业化前景。同时,通过本发明的制备方法所得到的外泌体包载了活性蛋白,可以更易于透过组织和细胞膜,以及血脑屏障,到达病灶部位用于肿瘤等疾病的治疗;也可以用于护肤品,更易于透过皮肤,应用广泛。

    一种抗重组人碱性成纤维细胞生长因子纳米抗体及其应用

    公开(公告)号:CN108640993A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810573403.3

    申请日:2018-06-06

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种抗重组人碱性成纤维细胞生长因子纳米抗体及其应用。所述的抗重组人碱性成纤维细胞生长因子纳米抗体具有分子质量小、特异性强、亲和力高、稳定性高、易表达、细胞/血管穿透性强、抗原结合能力强、可在原核表达系统中进行表达等特点,克服了传统抗体的开发周期长、稳定性较低、保存条件苛刻等缺陷,可有效中和肿瘤和纤维化患者体内过度表达的bFGF,能有效抑制血管的生成、肿瘤的生长和转移,还可用于抑制肝、肺或肾等纤维化的形成。同时,该纳米抗体在大肠杆菌中可实现高效表达,在治疗肿瘤抗体药物或癌症诊断试剂盒或试剂中具有良好的应用前景。

    抗人bFGF纳米抗体检测bFGF的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN108508216A

    公开(公告)日:2018-09-07

    申请号:CN201810574975.3

    申请日:2018-06-06

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了抗人bFGF纳米抗体检测bFGF的方法及试剂盒。本发明提供了包含所述的抗人bFGF纳米抗体的检测bFGF的试剂盒,尤其是检测bFGF的双抗体夹心ELISA试剂盒;并成功建立了非用于疾病的诊断或治疗检测bFGF的双抗体夹心ELISA方法,特异性强,检测效果好。本发明的抗人bFGF纳米抗体可通过原核系统表达,操作简单,降低了生产成本,易于工业生产;所述的抗人bFGF纳米抗体除了拥有分子质量小、特异性强、亲和力高、抗原结合能力强等特点外,相比传统bFGF抗体它还具有稳定性好、耐高温、易保存等特点,更适用于检测试剂产品的开发,所得的检测试剂产品更适于保存、运输和使用,具有良好的应用前景。

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