公开(公告)号：CN105483250A

公开(公告)日：2016-04-13

申请号：CN201511022187.6

申请日：2015-12-30

Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心

Inventor： 何宇平 ,  杨捷琳 ,  肖其胜 ,  袁辰刚 ,  杨惠琴 ,  王敏 ,  姚剑

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q1/689 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2561/101 ,  C12Q2561/113

Abstract: 本发明公开了一种双歧杆菌的实时荧光PCR检测方法，包括以下步骤：步骤一：以双歧杆菌标准菌株的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；步骤二：检测扩增产物的荧光信号；其中，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增双歧杆菌的特异性引物对和双歧杆菌的特异性探针。本发明的双歧杆菌的实时荧光PCR扩增的特异性引物对和探针不仅特异性好，而且灵敏度高，为快速准确地检测食品中是否按标示添加双歧杆菌提供了一种很好的方法，具有较好的应用前景。

公开(公告)号：CN105802955A

公开(公告)日：2016-07-27

申请号：CN201610243170.1

申请日：2016-04-18

Applicant: 安徽出入境检验检疫局检验检疫技术中心 ,  上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 ,  合肥工业大学

Inventor： 智楠楠 ,  杨捷琳 ,  宗凯 ,  姚剑 ,  何宇平 ,  魏兆军 ,  余晓峰 ,  李云飞 ,  周莉质

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/1003 ,  C12Q2521/537

Abstract: 本发明公开了一种从酸奶中提取DNA的方法，包括以下步骤：提取酸奶上清液a；上清液a离心处理，取沉淀，加入CTAB裂解液和溶菌酶，孵育，再加入蛋白酶k，孵育，离心，取上清液c，等体积氯仿洗涤后离心，取上清液d，加入2倍体积CTAB沉淀液沉淀，再离心得到初沉淀；用NaCl溶液溶解初沉淀，加入等体积氯仿再次洗涤，吸取上清液e，加入异丙醇沉淀，离心得到DNA沉淀，加入70％乙醇洗涤，去除乙醇，得到酸奶DNA；有效解决了酸奶由于基质复杂所致的核酸提取困难，提取率低的问题，该方法无污染，成本低，操作快速简便。经检测本发明提取得到的酸奶核酸纯度高，可用于PCR扩增和illumina深度测序，为掌握市售酸奶中益生菌群落分布情况提供了技术基础。