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公开(公告)号：CN108519485A
公开(公告)日：2018-09-11
申请号：CN201810316627.6
申请日：2018-04-10
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
Abstract: 本发明公开了一种A1/A2β-酪蛋白的质谱检测方法，包括如下步骤：a)获取A2β-酪蛋白的氨基酸序列；b)将A2β-酪蛋白的67位氨基酸脯氨酸修改为组氨酸，获得A1β-酪蛋白的氨基酸序列；c)利用特异性的酶解方法将待检测蛋白质切成小分子量的多肽片段混合物，利用静电场轨道阱高分辨质谱全扫描模式检测混合物中各多肽的分子量和碎片信息，并与前面的氨基酸序列进行比对，定性判断是否存在A1或A2β-酪蛋白的特征肽段；d)挑选定性为A1或A2β-酪蛋白的特征肽段，合成其同位素内标肽段，利用串联四级杆质谱建立多反应监测方法进行定量分析。本发明能够同时实现A1、A2β-酪蛋白的定性鉴定和定量研究，灵敏度高，准确度高，抗干扰能力强，可广泛应用于A2乳制品的确证和检测。
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公开(公告)号：CN105483250A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201511022187.6
申请日：2015-12-30
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明公开了一种双歧杆菌的实时荧光PCR检测方法，包括以下步骤：步骤一：以双歧杆菌标准菌株的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；步骤二：检测扩增产物的荧光信号；其中，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增双歧杆菌的特异性引物对和双歧杆菌的特异性探针。本发明的双歧杆菌的实时荧光PCR扩增的特异性引物对和探针不仅特异性好，而且灵敏度高，为快速准确地检测食品中是否按标示添加双歧杆菌提供了一种很好的方法，具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN103667509A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201310739069.1
申请日：2012-12-11
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海欣景生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12Q1/14 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了检测食品中乳酸菌的方法，其包括，(1)提取食品中细菌基因组DNA；(2)进行PCR扩增，其中所使用的引物对是兼并引物对；(3)对PCR扩增的产物进行电泳检测，如检测到唯一PCR扩增条带，则检测结果为阳性，否则检测结果为阴性；如检测结果为阳性则不需要进行步骤(4)，如检测结果为阴性则需要进行步骤(4)；(4)任选对PCR扩增的产物进行测序。本发明还提供了其中所用的引物等。本发明方法，直接可对各厂家的含一种或多种乳酸菌的制品进行检测，检测结果可以有效排除假阳性，从而便于推广实施，而对于检测阴性的制品，再配合测序，可以确保检测结果的正确性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103667509B
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201310739069.1
申请日：2012-12-11
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海欣景生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了检测食品中乳酸菌的方法，其包括，(1)提取食品中细菌基因组DNA；(2)进行PCR扩增，其中所使用的引物对是兼并引物对；(3)对PCR扩增的产物进行电泳检测，如检测到唯一PCR扩增条带，则检测结果为阳性，否则检测结果为阴性；如检测结果为阳性则不需要进行步骤(4)，如检测结果为阴性则需要进行步骤(4)；(4)任选对PCR扩增的产物进行测序。本发明还提供了其中所用的引物等。本发明方法，直接可对各厂家的含一种或多种乳酸菌的制品进行检测，检测结果可以有效排除假阳性，从而便于推广实施，而对于检测阴性的制品，再配合测序，可以确保检测结果的正确性。
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公开(公告)号：CN103014160B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201210532379.1
申请日：2012-12-11
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海欣景生物科技有限公司
IPC: C12Q1/68 , C12Q1/14 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/23 , C12R1/46 , C12R1/245 , C12R1/225 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了检测食品中乳酸菌的方法，其包括，（1）提取食品中细菌基因组DNA；（2）进行PCR扩增，其中所使用的引物对是兼并引物对；（3）对PCR扩增的产物进行电泳检测，如检测到唯一PCR扩增条带，则检测结果为阳性，否则检测结果为阴性；如检测结果为阳性则不需要进行步骤（4），如检测结果为阴性则需要进行步骤（4）；（4）任选对PCR扩增的产物进行测序。本发明还提供了其中所用的引物等。本发明方法，直接可对各厂家的含一种或多种乳酸菌的制品进行检测，检测结果可以有效排除假阳性，从而便于推广实施，而对于检测阴性的制品，再配合测序，可以确保检测结果的正确性。
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公开(公告)号：CN108519485B
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN201810316627.6
申请日：2018-04-10
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
Abstract: 本发明公开了一种A1/A2β‑酪蛋白的质谱检测方法，包括如下步骤：a)获取A2β‑酪蛋白的氨基酸序列；b)将A2β‑酪蛋白的67位氨基酸脯氨酸修改为组氨酸，获得A1β‑酪蛋白的氨基酸序列；c)利用特异性的酶解方法将待检测蛋白质切成小分子量的多肽片段混合物，利用静电场轨道阱高分辨质谱全扫描模式检测混合物中各多肽的分子量和碎片信息，并与前面的氨基酸序列进行比对，定性判断是否存在A1或A2β‑酪蛋白的特征肽段；d)挑选定性为A1或A2β‑酪蛋白的特征肽段，合成其同位素内标肽段，利用串联四级杆质谱建立多反应监测方法进行定量分析。本发明能够同时实现A1、A2β‑酪蛋白的定性鉴定和定量研究，灵敏度高，准确度高，抗干扰能力强，可广泛应用于A2乳制品的确证和检测。
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公开(公告)号：CN106701912A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201610875224.6
申请日：2016-09-30
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海昂朴生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/6869 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明涉及奶粉检测技术领域，尤其涉及一种Illumina Miseq测序平台检测奶粉中的益生菌的方法，所述方法包括如下步骤：(1)奶粉基因组DNA的提取：将奶粉冲泡后，进行第一次离心取上清，再进行第二次离心取沉淀，加入缓冲液震荡，再加入溶菌酶反应后进行基因组DNA的提取；(2)PCR扩增：针对细菌16s rDNA的v1‑v3区，选用特异性引物进行PCR扩增；(3)Illumina Miseq测序：将PCR产物进行Illumina Miseq测序。Illumina MiSeq测序方法分析有效的避免了通量低、操作复杂和准确率低等缺陷，不仅可实现对多样品的多个可变区同时测序，而且在测序速度和测序通量上都有进一步提升，检测结果可信度高。
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公开(公告)号：CN103014160A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210532379.1
申请日：2012-12-11
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海欣景生物科技有限公司
IPC: C12Q1/68 , C12Q1/14 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/23 , C12R1/46 , C12R1/245 , C12R1/225 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了检测食品中乳酸菌的方法，其包括，（1）提取食品中细菌基因组DNA；（2）进行PCR扩增，其中所使用的引物对是兼并引物对；（3）对PCR扩增的产物进行电泳检测，如检测到唯一PCR扩增条带，则检测结果为阳性，否则检测结果为阴性；如检测结果为阳性则不需要进行步骤（4），如检测结果为阴性则需要进行步骤（4）；（4）任选对PCR扩增的产物进行测序。本发明还提供了其中所用的引物等。本发明方法，直接可对各厂家的含一种或多种乳酸菌的制品进行检测，检测结果可以有效排除假阳性，从而便于推广实施，而对于检测阴性的制品，再配合测序，可以确保检测结果的正确性。
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