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公开(公告)号:CN101851607A
公开(公告)日:2010-10-06
申请号:CN201010155790.2
申请日:2010-04-21
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种Canine-SLAM/Vero细胞系及构建方法,采集犬瘟热阳性犬抗凝血,应用犬淋巴细胞分离液分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,通过PCR方法获得犬SLAM基因;构建pCAGGS-Neo/SLAM质粒;将构建的pCAGGS-Neo/SLAM表达盒转染到Vero细胞中,采用G418筛选稳定表达SLAM的细胞系;利用间接免疫荧光法鉴定和检测SLAM在细胞膜表面的表达情况,得到细胞系。本发明不但可用于犬瘟热病毒的分离和病毒的滴定,而且还显著缩短分离病毒的时间和提高了病毒的产量,有力地推动了对犬瘟热病毒表现型和遗传型等分子特征的研究。