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公开(公告)号:CN102864126A
公开(公告)日:2013-01-09
申请号:CN201210346779.3
申请日:2012-09-19
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/63 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种标准攻击毒株CVS-11的重组病毒及其制备方法,利用反向遗传学方法建立了狂犬病病毒国际标准攻击毒株CVS-11的反向遗传操作系统,为进一步修饰或改造CVS-11基因组结构提供有效平台,为从分子水平上研究狂犬病病毒的致病机理、抗原位点及毒力决定位点等奠定了基础。在CVS-11反向遗传操作系统的基础上,构建拯救了基于国际标准攻击毒株CVS-11的重组病毒rCVS-11-eGFP。rCVS-11-eGFP在增殖过程中表达eGFP,可用于直接观察病毒的增殖状态及扩散。利用eGFP无毒性、可以不需依赖任何辅助因子或其他基质而自主发光等特点,将rCVS-11-eGFP作为检测抗原,用于测定抗狂犬病病毒中和抗体效价,结果判定时,无需固定染色等操作,经济便捷。
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公开(公告)号:CN102178947A
公开(公告)日:2011-09-14
申请号:CN201110062411.X
申请日:2011-03-16
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种表达小反刍兽疫病毒H基因的活载体疫苗,同时还公开了其制备方法,制备的重组病毒具有良好的遗传稳定性,以此病毒制备的疫苗免疫山羊后,可诱导山羊产生特异的抗病毒中和抗体,具有良好的免疫保护效果,无毒副作用,制品容易保存,便于运输,保质期限长,生产工艺简单,适合于工业化生产。
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公开(公告)号:CN101851607A
公开(公告)日:2010-10-06
申请号:CN201010155790.2
申请日:2010-04-21
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种Canine-SLAM/Vero细胞系及构建方法,采集犬瘟热阳性犬抗凝血,应用犬淋巴细胞分离液分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,通过PCR方法获得犬SLAM基因;构建pCAGGS-Neo/SLAM质粒;将构建的pCAGGS-Neo/SLAM表达盒转染到Vero细胞中,采用G418筛选稳定表达SLAM的细胞系;利用间接免疫荧光法鉴定和检测SLAM在细胞膜表面的表达情况,得到细胞系。本发明不但可用于犬瘟热病毒的分离和病毒的滴定,而且还显著缩短分离病毒的时间和提高了病毒的产量,有力地推动了对犬瘟热病毒表现型和遗传型等分子特征的研究。
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公开(公告)号:CN100594038C
公开(公告)日:2010-03-17
申请号:CN200610017179.7
申请日:2006-09-15
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: A61K39/395 , A61P31/16
Abstract: 本发明涉及人禽流感特异系列靶向药物及其制备方法,用单克隆抗体筛选抗人禽流感病毒及致炎因子的杂交瘤细胞株;分别提取不同杂交瘤细胞,用RT-PCR扩增出每种单抗的重链可变区和轻链可变区基因;通过SOE-PCR将单抗的VH、VL基因以一段15个氨基酸的短肽相连,构建人禽流感病毒HA/NA的单链抗体基因或单链双特异抗体基因及致炎因子的单链抗体基因;将人禽流感病毒的单链抗体基因或单链双特异抗体基因通过酶切、连接方法分别与致炎因子的单链抗体基因或绿脓杆菌外毒素PE40基因连接,构建原核表达载体,转化Ecoli.BL21工程菌,经发酵、提取及纯化后获得系列靶向拮抗剂,本药物用于人禽流感的紧急预防与救治。
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公开(公告)号:CN1927396A
公开(公告)日:2007-03-14
申请号:CN200610017179.7
申请日:2006-09-15
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: A61K39/395 , A61P31/16
Abstract: 本发明涉及人禽流感特异系列靶向药物及其制备方法,用单克隆抗体筛选抗人禽流感病毒及致炎因子的杂交瘤细胞株;分别提取不同杂交瘤细胞,用RT-PCR扩增出每种单抗的重链可变区和轻链可变区基因;通过SOE-PCR将单抗的VH、VL基因以一段15个氨基酸的短肽相连,构建人禽流感病毒HA/NA的单链抗体基因或单链双特异抗体基因及致炎因子的单链抗体基因;将人禽流感病毒的单链抗体基因或单链双特异抗体基因通过酶切、连接方法分别与致炎因子的单链抗体基因或绿脓杆菌外毒素PE40基因连接,构建原核表达载体,转化Ecoli.BL21工程菌,经发酵、提取及纯化后获得系列靶向拮抗剂,本药物用于人禽流感的紧急预防与救治。
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公开(公告)号:CN1729996A
公开(公告)日:2006-02-08
申请号:CN200510017017.9
申请日:2005-08-03
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: A61K35/16 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/12
Abstract: 本发明提供一种犬科动物抗犬科动物重要疫病高免血清的制备工艺及制剂,是以一种或几种引起犬科动物重要疫病的病原,经犬、猴、猫等动物原代、传代细胞或细菌培养基培养增殖后,加入佐剂制成免疫原,按一定程序对犬科动物进行免疫,分离血清,灭活病毒,并按一定工艺制成单一或联合高免血清或抗体制剂。由于动物种属一致,不会出现异源蛋白过敏问题,在生产上可简化工艺,降低成本。本发明制剂使用后可使机体立即获得免疫保护能力,用于预防和治疗犬科动物重要疫病,具有疗效显著,临床症状消失迅速,无毒副作用特点,药物制剂容易保存,便于运输,保质期限长,生产工艺简单,适合于工业化生产。
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公开(公告)号:CN104630270A
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201510044307.6
申请日:2015-01-28
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种流感病毒表面生物矿化的方法,属于基因工程技术领域。本发明通过在流感病毒的血凝素和/或神经氨酸酶基因上插入内源性矿化基因W6p或Nwp,使流感病毒能够表达内源性磷酸钙生物矿化肽,通过该肽段,流感病毒可以在生理条件下自发形成蛋壳样外壳来保护流感病毒。矿化基因W6p、Nwp编码的磷酸钙生物矿化肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、2所示,插入到血凝素的290位和291位氨基酸之间或神经氨酸酶的237和238位氨基酸之间。通过本发明可以提高流感病毒灭活疫苗和弱毒疫苗的耐热性和免疫原性,降低流感疫苗对冷链运输和冰柜保存的要求,减少流感疫苗运输和保存成本,延长流感疫苗保存的有效期。
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公开(公告)号:CN101078727A
公开(公告)日:2007-11-28
申请号:CN200710055760.2
申请日:2007-06-13
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: G01N33/558 , G01N33/569 , G01N33/549 , G01N33/532
Abstract: 本发明提供了一种犬、猫科动物重要疫病抗体胶体金银联合检测试纸,将胶体金标记的羊抗犬和猫IgG混合包被在玻璃纤维素膜上,制成结合垫;将纯化的狂犬病病毒、犬瘟热病毒、猫瘟热病毒和犬细小病毒等抗原分别包被在硝酸纤维素膜的检测线R、D、F、P等处,将兔抗羊IgG包被在硝酸纤维素膜的质控线C处,制成检测膜;当被检样品中含有相应病毒抗体时,可先与金标羊抗犬和猫IgG结合,然后在层析作用下与相应检测线上的抗原结合而富集,再经银染液加强染色后形成肉眼可见的色带,进而根据显色结果进行判定。本发明不需要借助其它仪器设备,并可同时对多种犬猫科动物重要疫病抗体进行检测,特别适用于现场检测和流行病学调查。
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公开(公告)号:CN101074959A
公开(公告)日:2007-11-21
申请号:CN200710055759.X
申请日:2007-06-13
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532
Abstract: 本发明涉及一种犬、猫科动物重要疫病病原胶体金银联合检测试纸及其制备方法,将胶体金标记的鼠源RV、CDV、FPV和CPV等单抗混合包被在玻璃纤维素膜上,制成结合垫;分别将纯化的犬抗RV、CDV、FPV和CPV等的IgG包被在硝酸纤维素膜(NC)的检测线R、D、F、P处,将兔抗鼠IgG包被在硝酸纤维素膜的质控线C处,制成检测膜;当被检样品中含有相应病毒时,可先与相应金标鼠源单抗结合,然后在层析作用下与相应检测线上的二抗结合并富集,再经银染液加强染色后形成肉眼可见的色带,进而根据显色结果进行判定。本发明不需要借助其它仪器设备,并可同时对多种犬猫科动物重要疫病抗体进行检测,特别适用于现场检测和流行病学调查。
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公开(公告)号:CN1927887A
公开(公告)日:2007-03-14
申请号:CN200610017178.2
申请日:2006-09-15
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗狂犬病病毒重组免疫毒素的制备工艺,筛选能产生抗狂犬病病毒高特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,提取杂交瘤细胞基因组,利用聚合酶链式反应方法扩增抗体重链可变区和轻链可变区基因,并构建抗狂犬病病毒中和性单链抗体,将构建的单链抗体基因酶切插入到含有绿脓杆菌外毒素的表达载体中,转化大肠杆菌进行原核表达,将表达的融合蛋白进行纯化。本发明可中和游离病毒,并通过PE的细胞毒性作用杀伤病毒感染细胞,能快速清除体内的病毒与杀伤病毒感染细胞,可用于狂犬病的紧急预防与暴露后治疗。本发明克服了化学方法制备免疫毒素所存在的产率低、分子大、免疫原性大、组成不均一的缺点。
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