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公开(公告)号:CN118949722B
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202411344062.4
申请日:2024-09-25
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供一种用于天然气纯化的MOF混合基质膜及其制备方法。所述的用于天然气纯化的MOF混合基质膜由所述制备方法制得;所述制备方法包括:将镍源和钴盐溶解于去离子水中,超声处理,得悬浮液;将1,4‑二氮杂辛烷溶解于甲醇/水混合溶剂后,加入悬浮液中,搅拌后依次经过离心、洗涤和干燥,得CoNi‑DABCO纳米颗粒;将CoNi‑DABCO纳米颗粒加入到正庚烷中,搅拌超声得分散液;向分散液中加入PDMS,搅拌,加入交联剂和催化剂,混合均匀得铸膜液;将PVDF基底固定,将铸膜液浇铸在基底上,待溶剂挥发后干燥处理。本发明以PDMS为聚合物基质,选择具有微孔结构和高密度不饱和金属位点的霍夫曼型MOF为填料,制备的MMMs表现出优异的分离性能,CH4渗透通量提高2倍,CH4/N2选择性可达3.7。
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公开(公告)号:CN118956787A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202410968136.5
申请日:2024-07-18
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶表面突变体及其应用。所述对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶表面突变体是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列发生氨基酸突变得到的,包括以下至少一种氨基酸突变:A159K、E186K。本发明还提供了一种利用上述对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶突变体构建的合成香豆素类化合物的工程菌,其中,所述香豆素类化合物可以为伞形酮或瑞香素。所述对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶突变体具有较好的酶活性及稳定性,其中,所述对香豆酰辅酶A 2’‑羟化酶突变体的酶活性提高了3.1倍以上,甚至可以提高5.6倍;如此,上述工程菌不但能够实现高效合成伞形酮或瑞香素等香豆素类化合物,而且还能够实现伞形酮或瑞香素等化合物的高效从头生物合成。
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公开(公告)号:CN118956786A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202410968135.0
申请日:2024-07-18
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶口袋突变体及应用。所述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶口袋突变体是由SEQ ID NO .1所示的氨基酸序列发生氨基酸突变得到的,包括以下至少一种氨基酸突变:L141N、L141G、A142N、Q144D、F156Y、V157T、N311G。本发明还提供了一种利用上述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶突变体构建的合成香豆素类化合物的工程菌。所述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶突变体具有较好的酶活性及稳定性,如此,上述工程菌不但能够实现高效合成东莨菪素、秦皮素、秦皮苷和东莨菪苷等香豆素类化合物,而且还能够实现东莨菪素、秦皮素、秦皮苷和东莨菪苷等化合物的高效从头生物合成,为香豆素类化合物的微生物合成提供了参考。
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公开(公告)号:CN115404192B
公开(公告)日:2024-10-08
申请号:CN202110578901.9
申请日:2021-05-26
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/04 , C12N9/88 , C12N9/10 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12P13/00 , C12P7/18 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种合成5‑AMP的工程菌,包括宿主菌和转入所述宿主菌的质粒载体,所述质粒载体中导入了编码醇脱氢酶的基因,使5‑氨基戊醛生成5‑AMP;其中,所述醇脱氢酶为Adh6、YqhD、YahK或YjgB。所述质粒载体中还导入了编码腐胺转氨酶PatA和赖氨酸脱羧酶CadA的基因,还可以导入编码增强二氨基庚二酸途径的酶DapA和LysC的基因。本发明还提供一种合成1,5‑PDO的工程菌,其相当于在上述合成5‑AMP的工程菌中导入编码转氨酶的基因,以催化5‑AMP生成5‑羟基戊醛,所述转氨酶为CV2025或WTA。本发明还提供一种上述工程菌在合成5‑AMP或1,5‑PDO中的应用。
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公开(公告)号:CN118562842A
公开(公告)日:2024-08-30
申请号:CN202410783698.2
申请日:2024-06-18
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了构建高效生物合成次黄嘌呤大肠杆菌平台菌株并合成其衍生物的方法与应用。首先敲除磷酸核糖转移酶增加前体PRPP,其次敲除葡萄糖磷酸异构酶、丙酮酸激酶弱化糖酵解途径,改造ptsG系统减少副产物积累,最后过表达α‑D‑核糖‑1‑磷酸5‑激酶和核糖1,5‑二磷酸激酶将损失的磷酸核糖转化为PRPP,构建次黄嘌呤高产平台菌株。该平台菌株为生物合成尿囊素、咖啡碱和苦茶碱奠定基础。合成尿囊素首先筛选尿酸氧化酶和黄嘌呤脱氢酶,在次黄嘌呤平台菌株合成尿囊素,且发酵罐产量达到了克级以上。合成咖啡碱通过筛选N‑甲基转移酶,构建全新的合成途径。本发明以咖啡碱途径为基础设计苦茶碱的合成途径,表征路径中的关键酶。
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公开(公告)号:CN118460581A
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202410672595.9
申请日:2024-05-28
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 构建稳定遗传的水杨苷生物合成的基因工程菌株的方法及其应用涉及生物工程技术领域。本发明在利用葡萄糖从头发酵生产水杨酸的基因工程菌株E.coli BW1的基础上,在宿主基因组上整合羧酸还原酶基因Car、磷酰转移酶基因Sfp、糖基转移酶基因OsSGT1、葡萄糖磷酸变位酶基因pgm、UTP‑葡萄糖‑1‑磷酸尿苷酰基转移酶基因galU;构建基因工程菌株:应用CRISPR‑Cas9技术在宿主内整合促羧酸还原酶即基因Car编码、磷酰转移酶即基因Sfp编码、糖基转移酶即基因OsSGT1编码,然后在宿主内整合葡萄糖磷酸变位酶pgm、UTP‑葡萄糖‑1‑磷酸尿苷酰基转移酶galU的基因构建遗传稳定的产水杨苷工程菌。本发明更节约成本。
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公开(公告)号:CN118291350A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410289400.2
申请日:2024-03-14
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供一株没食子酸生产菌株及其应用。所述没食子酸生产菌株在出发菌株大肠杆菌的基因组mbha位点和ilvG位点上分别敲入3‑脱氢莽草酸脱水酶的编码基因quiC,在基因组的yjip位点敲入对羟基苯甲酸羟化酶突变体的编码基因pobA***。进一步应用CRISPR Cas9技术在出发菌中通过更换启动子强度、增加拷贝数等优化基因表达量,以提高利用上述没食子酸生产菌株发酵生产没食子酸的产量,并使其碳收率达到天然理论碳收率的60%,生产成本低,无需外加抗生素和诱导剂。本发明还提一种上述没食子酸生产菌株在生产没食子酸衍生物中的应用,以上述没食子酸生产菌株为出发菌构建没食子酸衍生物生产工程菌,从而实现以没食子酸为出发化合物的合成其它高价值化合物。
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公开(公告)号:CN118222469A
公开(公告)日:2024-06-21
申请号:CN202410280398.2
申请日:2024-03-12
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种合成戊二酸的工程菌,其特征在于:具有单一稳定的染色体,不含质粒形式或其他游离DNA载体。其染色体DNA上整合拷贝一个或多个与戊二酸代谢途径相关的基因;其染色体DNA上整合拷贝一个或多个与赖氨酸代谢途径相关的基因;其染色体DNA上整合或敲除一个或多个与戊二酸生产转运相关的基因。因此,利用上述工程菌生产戊二酸具有传代稳定、成本低廉、转化率高等优点,有利于工业化生产,降低成本。
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公开(公告)号:CN118222468A
公开(公告)日:2024-06-21
申请号:CN202410280384.0
申请日:2024-03-12
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明构建了一种能稳定遗传的生物合成肌醇的基因工程菌株。其特征在于:以敲除了使葡萄糖进入糖酵解和磷酸戊糖途径相关基因、使磷酸烯醇式丙酮酸转化为丙酮酸相关基因、进入三羧酸循环路径相关基因的菌株作为底盘菌,通过CRISPR/Cas9技术在宿主内用强启动子、多拷贝整合肌醇合成途径中的肌醇‑1‑磷酸合成酶基因、肌醇单磷酸酶基因至底盘菌的基因组上,使其具有单一稳定的染色体,不含质粒或其他游离DNA载体。同时,敲除了宿主中的甘油分解代谢基因、过表达来自抗辐射奇异球菌的全局调控因子,提升生产菌株的生长特性和生产稳定性。本发明既能实现实现肌醇的高产,又能摆脱应用质粒对工程菌生产造成不稳定的影响,对肌醇的工业化生产极具有应用前景。
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公开(公告)号:CN117802018A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202311512891.4
申请日:2023-11-14
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种合成三七素的工程菌,包括宿主菌和转入该宿主菌的质粒载体,该质粒载体中包含草酰辅酶A连接酶AAE、三七素合酶BAHD以及草酰乙酸裂解酶Oah编码基因。所述质粒载体还包括磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc及乙酰辅酶A合酶编码基因acs。所述宿主菌株可以为产L‑2,3‑二氨基丙酸重组大肠杆菌,同时该重组大肠杆菌中敲除了丙酮酸激酶编码基因pykF,葡萄糖特异性PTS酶IIBC成分基因ptsG,过表达了葡萄糖渗透酶编码基因glf和葡萄糖激酶编码基因glk。本发明还提供一种上述合成三七素的工程菌的构建方法。本发明还提供了一种上述工程菌在发酵生产三七素中的应用。上述工程菌在摇瓶中能够高效积累三七素4.2 g/L,在发酵罐中能够高效积累三七素的产量达15.2 g/L。
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