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公开(公告)号:CN119752899A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411912183.4
申请日:2024-12-24
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/867 , C12N9/22 , C12N9/78 , C07K19/00 , A61K40/11 , A61K40/20 , A61K40/31 , A61P35/00
Abstract: 本发明涉及肿瘤免疫治疗技术领域,具体而言,涉及一种PARP抑制剂耐受CAR‑T细胞、构建方法及应用。sgRNA的序列包括sg‑D45、sg‑S588或sg‑G745;该构建方法采用如上述的sgRNA通过胞嘧啶碱基编辑器在CAR‑T细胞中PARP1蛋白上引入S588F、G745以及D45N和M43I突变,显著增加了CAR‑T细胞对PARP抑制剂的耐受性,使其可以与PARP抑制剂协同使用,进而使抗肿瘤效应最大化。
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公开(公告)号:CN117965635A
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202410162338.0
申请日:2024-02-05
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12N15/87 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12Q1/6881 , C12N15/11
Abstract: 本申请涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种制备对维奈托克耐药的急性T淋巴细胞白血病细胞系的方法;所述方法包括:混合Cas9蛋白和sgRNA‑HDR,并孵育,后加入ssDNA,得到混合物;对急性T淋巴细胞白血病细胞进行重悬,后加入混合物电转,得到编辑后细胞;对编辑后细胞孵育,第一培养,后流式分选,得到单克隆细胞;对单克隆细胞第二培养,后测序筛选,得到单细胞克隆;对单细胞克隆扩大培养并保种,得到急性T淋巴细胞白血病细胞;sgRNA‑HDR包括靶向BCL2基因的耐药突变点位;ssDNA包括BCL2基因的耐药突变点位的识别序列;该方法所得的细胞可以用于探究T‑ALL细胞对维耐托克的耐药机制和克服策略。
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公开(公告)号:CN116064755B
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202310063877.4
申请日:2023-01-12
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12Q1/6869 , G16B20/50 , G16B50/30 , C12Q1/6886
Abstract: 本申请涉及生物基因技术领域,尤其涉及一种基于连锁基因突变检测MRD标志物的装置。本发明建立了一种基于连锁突变的MRD监测装置。相比于其他流式细胞方法和PET‑CET方法,本发明方法样本获取简单,仅需要患者血液,操作方便,无放射性伤害;相比于PCR定量方法,本发明能一次检测多个位点,并且检测下限可达10―6级别,可有效地进行MRD术后评价和复发监控,随后根据患者个体情况开展精准指导;本发明不依赖于UMI分子标签技术,当仅使用常规方法进行cfDNA建库时,本发明检测下限也可达到10―5级别,相对于双重测序技术,本发明节约实验建库成本,能有效提高原始片段的利用率。
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公开(公告)号:CN118562731A
公开(公告)日:2024-08-30
申请号:CN202410625503.1
申请日:2024-05-20
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明公开了一种体外高效扩增高质量临床级NK细胞的培养基以及培养方法,该培养基由基础培养基、血清/血清类似物以及IL‑2组成;基础培养基为KBM581培养基;血清/血清类似物选择FBS、Human AB Serum、HPL以及SR其中之一。使用该培养基两周内扩增倍数高于2000倍,高于其它文献报道的NK细胞扩增水平,最高组甚至达到5000倍以上,同时,扩增后的NK细胞纯度达90%以上,仍然具有良好的增殖活力和强大的肿瘤细胞杀伤能力。
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公开(公告)号:CN117264903A
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202211711757.2
申请日:2022-12-29
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12N5/0783
Abstract: 本申请涉及生物技术领域,尤其涉及一种促进CAR‑T细胞的扩增和抗肿瘤能力的细胞外囊泡及制备方法和应用;所述细胞外囊泡的膜表面携带有CD19蛋白,以利用细胞外囊泡直接激活CAR‑T细胞溶液中的CAR‑T细胞;所述方法包括:包装CD19蛋白过表达慢病毒质粒;向HEK293T中转染CD19蛋白过表达慢病毒质粒,并进行分选,得到细胞表面表达CD19蛋白的单克隆细胞系;收集所述单克隆细胞系培养的上清液进行离心过滤等得到细胞外囊泡;通过在细胞外囊泡的膜表面携带有CD19蛋白,CAR‑T细胞通过其表面scFv识别细胞外囊泡所携带的CD19蛋白而被激活,其增殖和功能性持续被有效增强。
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公开(公告)号:CN116064755A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202310063877.4
申请日:2023-01-12
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: C12Q1/6869 , G16B20/50 , G16B50/30 , C12Q1/6886
Abstract: 本申请涉及生物基因技术领域,尤其涉及一种基于连锁基因突变检测MRD标志物的装置。本发明建立了一种基于连锁突变的MRD监测装置。相比于其他流式细胞方法和PET‑CET方法,本发明方法样本获取简单,仅需要患者血液,操作方便,无放射性伤害;相比于PCR定量方法,本发明能一次检测多个位点,并且检测下限可达10―6级别,可有效地进行MRD术后评价和复发监控,随后根据患者个体情况开展精准指导;本发明不依赖于UMI分子标签技术,当仅使用常规方法进行cfDNA建库时,本发明检测下限也可达到10―5级别,相对于双重测序技术,本发明节约实验建库成本,能有效提高原始片段的利用率。
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公开(公告)号:CN119753026A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411934803.4
申请日:2024-12-26
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
Abstract: 本发明涉及生物基因工程技术领域,具体而言,涉及一种肺豁免型MSLN CAR‑T细胞、应用及抗肿瘤制剂。该CAR‑T细胞采用重组载体构建,重组载体包括MSLN结合结构域核苷酸序列,还包括LIR‑1抑制性核苷酸序列和用于与肺高表达基因特异性结合的核苷酸序列,肺高表达分子为AQP3基因。当该CAR‑T细胞进入肺组织时,LIR‑1抑制性序列将通过与肺高表达分子结合抑制CAR‑T的杀伤功能,从而避免肺毒性;当CAR‑T细胞浸润肿瘤组织时,抑制性序列失活,CAR‑T被激活,正常发挥作用,有效的杀伤肿瘤细胞;具有精准治疗、副作用低、安全的优点。
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公开(公告)号:CN221667404U
公开(公告)日:2024-09-06
申请号:CN202420189945.1
申请日:2024-01-25
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
Abstract: 本实用新型为一种辅助骨髓涂片装置,用于制作骨髓涂片,包括:底板、滑动板和刮板,底板上端面设有卡槽,卡槽用于防止涂片,底板的两侧还设有滑轨;滑动板置于底板设有卡槽的一侧,并通过滑轨与底板滑动连接,滑动板靠近底板的一侧还设有固定槽;刮板可拆卸设置在固定槽内,在使用过程中,工作人员将涂片放置在卡槽内,并调节刮板,使刮板一端伸出滑动板与涂片表面接触,工作人员将骨髓滴在涂片上后推动滑动板,在推动滑动板过程中刮板将骨髓均匀的涂抹在涂片上,通过该辅助装置辅助工作人员正确制作涂片,不仅大大降低了工作人员涂片难度,而且使得涂片制作更加标准化,确保检验人员获得准确的观察结果,提高报告的质量。
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