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公开(公告)号:CN110804559B
公开(公告)日:2021-04-20
申请号:CN201911147067.7
申请日:2019-11-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本专利公开了一株重组产黄青霉基因工程菌及其构建方法与应用,其中,所述产黄青霉基因工程菌中Pc‑somA基因的序列被Bleo抗性基因替代;所述产黄青霉为ATCC48271;其构建方法为:(1)提取产黄青霉的基因组DNA;(2)构建基因敲除的片段;(3)制备产黄青霉的原生质体;(4)将基因敲除的片段导入制备的原生质体中进行同源重组,得到重组产黄青霉基因工程菌。有益效果:本发明所提供的基因工程菌使产黄青霉在固定化发酵产青霉素过程中生物膜量OD570增多了接近2倍,使菌丝可以和塑料介质更好的吸附结合,提高了青霉素的效价达到1963.25U/mL,同时缩短了整个发酵周期,缩短24h,减少生产成本。
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公开(公告)号:CN110106095B
公开(公告)日:2020-08-04
申请号:CN201910271574.5
申请日:2019-04-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株钙离子通道CchA基因失活的黑曲霉基因工程菌及其构建方法与应用,它是敲除钙离子通道CchA基因的黑曲霉菌。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法。进一步公开了基因工程菌在生产柠檬酸中的应用。本发明通过构建基因敲除钙离子通道CchA基因的黑曲霉基因工程菌,使黑曲霉在固定化发酵生产柠檬酸过程中生物膜产量降低并且疏水性降低,减轻了载体的抱团现象,提高了柠檬酸产量和糖转化效率,适宜于工业生产。
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公开(公告)号:CN110747138B
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN201911075347.1
申请日:2019-11-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株敲除FLO8基因的酿酒酵母基因工程菌,属于微生物基因工程领域。本发明还公开了基因工程菌的构建方法,利用金担子素抗性标记AurR基因构建了FLO8基因敲除组件并成功转化酿酒酵母酵母菌株。本发明进一步地公开了基因工程菌在固定化发酵生产模型中的应用。与原始菌株相比,本发明使酿酒酵母在游离发酵中絮凝特性明显减弱,在固定化发酵中,形成的生物被膜减少,黏附性降低,游离细胞明显增多。
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公开(公告)号:CN110714003B
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN201911147135.X
申请日:2019-11-21
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/087 , C12P37/00 , C12R1/82
Abstract: 本发明公开了一种产黄青霉的固定化方法及其应用,将电晕改性后的塑料介质作为固定化载体,将产黄青霉活化后接入固定化发酵培养基中培养,使菌株在培养的过程中吸附于载体上此外。本发明中以塑料介质为惰性材料,实现了产黄青霉的高密度发酵,降低发酵液的粘度,发酵液的黏度适中,传质效果很好。在与游离发酵相比,产物的效价大大提高,青霉素的效价达到1672.65U/mL,有效缩短发酵总周期从21天缩短到18天。
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公开(公告)号:CN110747138A
公开(公告)日:2020-02-04
申请号:CN201911075347.1
申请日:2019-11-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株敲除FLO8基因的酿酒酵母基因工程菌,属于微生物基因工程领域。本发明还公开了基因工程菌的构建方法,利用金担子素抗性标记AurR基因构建了FLO8基因敲除组件并成功转化酿酒酵母酵母菌株。本发明进一步地公开了基因工程菌在固定化发酵生产模型中的应用。与原始菌株相比,本发明使酿酒酵母在游离发酵中絮凝特性明显减弱,在固定化发酵中,形成的生物被膜减少,黏附性降低,游离细胞明显增多。
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公开(公告)号:CN112760241B
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN202110148438.4
申请日:2021-02-03
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株重组产黄青霉基因工程菌及其构建方法与应用,所述重组产黄青霉基因工程菌由原始产黄青霉菌中StuA基因被Bleo抗性基因替代所得。本发明所提供的基因工程菌使产黄青霉在固定化发酵生产青霉素过程中生物膜量OD570增多了约2.5倍,使菌丝更好的吸附结合在塑料介质上;提高了菌种的抗逆性,使发酵过程中菌种形态更稳定;提高了青霉素的效价达到2126.775U/mL,同时缩短了整个发酵周期约24h,从而提高了发酵效率并减少了生产成本,有效解决了现有技术中产黄青霉发酵生产青霉素菌种形态不稳定,发酵周期长且持续性差,导致发酵效率低且成本高的问题。
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公开(公告)号:CN112760241A
公开(公告)日:2021-05-07
申请号:CN202110148438.4
申请日:2021-02-03
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株重组产黄青霉基因工程菌及其构建方法与应用,所述重组产黄青霉基因工程菌由原始产黄青霉菌中StuA基因被Bleo抗性基因替代所得。本发明所提供的基因工程菌使产黄青霉在固定化发酵生产青霉素过程中生物膜量OD570增多了约2.5倍,使菌丝更好的吸附结合在塑料介质上;提高了菌种的抗逆性,使发酵过程中菌种形态更稳定;提高了青霉素的效价达到2126.775U/mL,同时缩短了整个发酵周期约24h,从而提高了发酵效率并减少了生产成本,有效解决了现有技术中产黄青霉发酵生产青霉素菌种形态不稳定,发酵周期长且持续性差,导致发酵效率低且成本高的问题。
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公开(公告)号:CN111073880A
公开(公告)日:2020-04-28
申请号:CN202010013832.2
申请日:2020-01-07
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/096 , C12N11/082 , C12N11/089 , C12N11/087 , C12N11/093 , C12N11/02 , C12N9/16 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母的固定化方法及其应用,将经植物胶预处理后的纤维材料作为固定化载体,将毕赤酵母活化后接入固定化发酵培养基中培养,使菌株在培养的过程中吸附于载体上。此外,可将经过植物胶预处理后的纤维材料浸泡于甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵水溶液中进行二次预处理,再洗涤,干燥,即得。有益效果:本发明通过甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵处理,使载体表面带有正电荷,将材料表面接入适当密度的正电荷可有效增强细胞表面粘附蛋白吸附,从而促进细胞粘附,同时不会对细胞活性产生消极影响,以提高产物的酶活,发酵罐产植酸酶,其酶活从12326.85U/mL提高到15221.85U/mL,且能缩短发酵总周期。
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公开(公告)号:CN110106095A
公开(公告)日:2019-08-09
申请号:CN201910271574.5
申请日:2019-04-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株钙离子通道CchA基因失活的黑曲霉基因工程菌及其构建方法与应用,它是敲除钙离子通道CchA基因的黑曲霉菌。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法。进一步公开了基因工程菌在生产柠檬酸中的应用。本发明通过构建基因敲除钙离子通道CchA基因的黑曲霉基因工程菌,使黑曲霉在固定化发酵生产柠檬酸过程中生物膜产量降低并且疏水性降低,减轻了载体的抱团现象,提高了柠檬酸产量和糖转化效率,适宜于工业生产。
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公开(公告)号:CN111073880B
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN202010013832.2
申请日:2020-01-07
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/096 , C12N11/082 , C12N11/089 , C12N11/087 , C12N11/093 , C12N11/02 , C12N9/16 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母的固定化方法及其应用,将经植物胶预处理后的纤维材料作为固定化载体,将毕赤酵母活化后接入固定化发酵培养基中培养,使菌株在培养的过程中吸附于载体上。此外,可将经过植物胶预处理后的纤维材料浸泡于甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵水溶液中进行二次预处理,再洗涤,干燥,即得。有益效果:本发明通过甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵处理,使载体表面带有正电荷,将材料表面接入适当密度的正电荷可有效增强细胞表面粘附蛋白吸附,从而促进细胞粘附,同时不会对细胞活性产生消极影响,以提高产物的酶活,发酵罐产植酸酶,其酶活从12326.85U/mL提高到15221.85U/mL,且能缩短发酵总周期。
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