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公开(公告)号：CN110747138B
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN201911075347.1
申请日：2019-11-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株敲除FLO8基因的酿酒酵母基因工程菌，属于微生物基因工程领域。本发明还公开了基因工程菌的构建方法，利用金担子素抗性标记AurR基因构建了FLO8基因敲除组件并成功转化酿酒酵母酵母菌株。本发明进一步地公开了基因工程菌在固定化发酵生产模型中的应用。与原始菌株相比，本发明使酿酒酵母在游离发酵中絮凝特性明显减弱，在固定化发酵中，形成的生物被膜减少，黏附性降低，游离细胞明显增多。
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公开(公告)号：CN110714003B
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN201911147135.X
申请日：2019-11-21
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/087 , C12P37/00 , C12R1/82
Abstract: 本发明公开了一种产黄青霉的固定化方法及其应用，将电晕改性后的塑料介质作为固定化载体，将产黄青霉活化后接入固定化发酵培养基中培养，使菌株在培养的过程中吸附于载体上此外。本发明中以塑料介质为惰性材料，实现了产黄青霉的高密度发酵，降低发酵液的粘度，发酵液的黏度适中，传质效果很好。在与游离发酵相比，产物的效价大大提高，青霉素的效价达到1672.65U/mL，有效缩短发酵总周期从21天缩短到18天。
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公开(公告)号：CN110079567B
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN201910392765.7
申请日：2019-05-13
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种过表达fimH基因的重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸中的应用。本发明借鉴医学上的致病性大肠杆菌形成生物膜的细胞相较于游离的细胞更适应极端环境，在已知fim操纵子调控的fimH基因可以调控大肠杆菌生物膜的形成，通过转录组分析发现了过表达fimH基因后氨基酸代谢通路的变化，为后期工业化过程中筛选其他高产氨基酸有机酸的重组菌株做好铺垫，最终达到提高产量、发酵速率和糖转化率的目的。
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公开(公告)号：CN110747138A
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201911075347.1
申请日：2019-11-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株敲除FLO8基因的酿酒酵母基因工程菌，属于微生物基因工程领域。本发明还公开了基因工程菌的构建方法，利用金担子素抗性标记AurR基因构建了FLO8基因敲除组件并成功转化酿酒酵母酵母菌株。本发明进一步地公开了基因工程菌在固定化发酵生产模型中的应用。与原始菌株相比，本发明使酿酒酵母在游离发酵中絮凝特性明显减弱，在固定化发酵中，形成的生物被膜减少，黏附性降低，游离细胞明显增多。
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公开(公告)号：CN112592877B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN202011519849.1
申请日：2020-12-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株过表达lsrC基因的重组大肠杆菌及其构建方法与应用；所述的重组大肠杆菌过表达lsrC基因。本发明通过过表达lsrC基因增加了大肠杆菌菌群的聚集效果，加强了生物膜的形成，通过生物膜的表征实验以及固定化发酵实验证实了lsrC基因的过表达促进了菌群之间的相互作用，加强了生物膜的形成，缩短了发酵周期，提高了L‑苏氨酸的产量和合成效率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110804559B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201911147067.7
申请日：2019-11-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本专利公开了一株重组产黄青霉基因工程菌及其构建方法与应用，其中，所述产黄青霉基因工程菌中Pc‑somA基因的序列被Bleo抗性基因替代；所述产黄青霉为ATCC48271；其构建方法为：(1)提取产黄青霉的基因组DNA；(2)构建基因敲除的片段；(3)制备产黄青霉的原生质体；(4)将基因敲除的片段导入制备的原生质体中进行同源重组，得到重组产黄青霉基因工程菌。有益效果：本发明所提供的基因工程菌使产黄青霉在固定化发酵产青霉素过程中生物膜量OD570增多了接近2倍，使菌丝可以和塑料介质更好的吸附结合，提高了青霉素的效价达到1963.25U/mL，同时缩短了整个发酵周期，缩短24h，减少生产成本。
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公开(公告)号：CN110129245B
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN201910309103.9
申请日：2019-07-08
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌，该菌株中胞外核酸酶基因ExeP失活，所述的谷氨酸棒杆菌为谷氨酸棒杆菌ATCC13032，所述胞外核酸酶ExeP的基因序列如SEQ ID NO.1所示，失活后的胞外核酸酶ExeP的基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过敲除敲除胞外核酸酶ExeP，减少胞外DNA的降解，加强了谷氨酸棒杆菌的成膜能力，利用本发明构建的敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌发酵产脯氨酸，提高了脯氨酸连续化发酵的产量，缩短了发酵周期。
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公开(公告)号：CN110055205B
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN201910393054.1
申请日：2019-05-13
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种敲除fimH基因的重组大肠杆菌，该大肠杆菌fimH基因失活。本发明进一步提供敲除fimH基因的重组大肠杆菌的构建方法及该重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸或有机酸中的应用。本发明借鉴医学上的致病性大肠杆菌形成生物膜的细胞相较于游离的细胞更适应极端环境，在已知fim操纵子调控的fimH基因可以调控大肠杆菌生物膜的形成，通过转录组分析发现了敲除fimH基因后氨基酸及有机酸代谢通路的变化，为后期工业化过程中筛选其他高产氨基酸有机酸的重组菌株做好铺垫，最终达到提高产量、发酵速率和糖转化率的目的。
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公开(公告)号：CN111073880A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN202010013832.2
申请日：2020-01-07
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/096 , C12N11/082 , C12N11/089 , C12N11/087 , C12N11/093 , C12N11/02 , C12N9/16 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母的固定化方法及其应用，将经植物胶预处理后的纤维材料作为固定化载体，将毕赤酵母活化后接入固定化发酵培养基中培养，使菌株在培养的过程中吸附于载体上。此外，可将经过植物胶预处理后的纤维材料浸泡于甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵水溶液中进行二次预处理，再洗涤，干燥，即得。有益效果：本发明通过甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵处理，使载体表面带有正电荷，将材料表面接入适当密度的正电荷可有效增强细胞表面粘附蛋白吸附，从而促进细胞粘附，同时不会对细胞活性产生消极影响，以提高产物的酶活，发酵罐产植酸酶，其酶活从12326.85U/mL提高到15221.85U/mL，且能缩短发酵总周期。
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公开(公告)号：CN111073880B
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202010013832.2
申请日：2020-01-07
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/096 , C12N11/082 , C12N11/089 , C12N11/087 , C12N11/093 , C12N11/02 , C12N9/16 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母的固定化方法及其应用，将经植物胶预处理后的纤维材料作为固定化载体，将毕赤酵母活化后接入固定化发酵培养基中培养，使菌株在培养的过程中吸附于载体上。此外，可将经过植物胶预处理后的纤维材料浸泡于甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵水溶液中进行二次预处理，再洗涤，干燥，即得。有益效果：本发明通过甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵处理，使载体表面带有正电荷，将材料表面接入适当密度的正电荷可有效增强细胞表面粘附蛋白吸附，从而促进细胞粘附，同时不会对细胞活性产生消极影响，以提高产物的酶活，发酵罐产植酸酶，其酶活从12326.85U/mL提高到15221.85U/mL，且能缩短发酵总周期。
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