公开(公告)号：CN118599798A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410468133.5

申请日：2024-04-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  卢昌宁 ,  李琦 ,  裴建军 ,  贾舒童 ,  邢琦琦

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/18 ,  C12P19/60 ,  C12R1/19

Abstract: 一种重组糖基转移酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID.NO:3所示。本发明通过基因工程技术，结合生物信息学手段，采用结构域重组的方法，获得一种新型糖基转移酶ZmDo。该酶最适反应温度、pH分别为35℃和pH 9.0，在温度为30~45℃、pH 5.5~8.5的范围内，均具有较高的酶活。同时，该糖基转移酶ZmDo专一性强、催化效率高，能够高效特异性地转化木犀草素为木犀草素‑5‑O‑葡萄糖苷。在适宜的条件下，体外酶转化时，转化率达70%以上；体内重组菌转化时，转化率达95%以上，产量达到2253 mg/L。本发明创制了特异性强、能在木犀草素5号位点上接上葡萄糖糖基的新型糖基转移酶，从而为一些高附加值的稀有天然糖苷类化合物的开发和利用提供了新方法。

公开(公告)号：CN118291420A

公开(公告)日：2024-07-05

申请号：CN202410576984.1

申请日：2024-05-10

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  卢昌宁 ,  房仙颖 ,  李琦 ,  王浩宇 ,  郑戴怡

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/60 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖基转移酶的氨基酸突变体及其应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从南瓜（Cucurbita moschata）中克隆得到了一种GT 1家族的糖基转移酶基因CmGT，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，对该糖基转移酶进行关键位点突变，获得的新型糖基转移酶多位点突变体CmGT‑S16A‑T80W，其酶活提高了1.7倍。该突变体CmGT‑S16A‑T80W专一性强，能够高效特异性转化木犀草素生成木犀草素‑7‑O‑葡萄糖苷，催化活性较高。

公开(公告)号：CN118308332A

公开(公告)日：2024-07-09

申请号：CN202410439131.3

申请日：2024-04-12

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  邢琦琦 ,  裴建军 ,  李琦 ,  卢昌宁 ,  贾舒童

IPC: C12N9/38 ,  C12N15/70 ,  C12N15/56 ,  C12N1/21 ,  C12P19/44 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组酶VthBga突变体及其应用。本发明对来源于火山鬃菌属嗜热菌(Vulcanisaeta thermophila)GH 1家族的β‑半乳糖苷酶进行了突变，筛选获得了优良的氨基酸突变体。所述氨基酸突变体含有2个突变位点，其中ALA266突变为G，PHE441突变为T。获得的新型β‑半乳糖苷酶能够特异性定向转化酪醇生成半乳糖型红景天苷，且转化率提高了约2.4倍。该生物转化反应酶最适反应温度高，有利于提高底物的溶解度，同时，能够在短时间内安全、高效地催化酪醇转化为半乳糖型红景天苷。本发明为高活性、高附加值的半乳糖型红景天苷的制备提供了独特高效的生物催化剂及其转化工艺。