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公开(公告)号：CN118979086A
公开(公告)日：2024-11-19
申请号：CN202411168378.2
申请日：2024-08-23
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12P19/60 , C12N15/60 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N9/88 , C12N9/02 , C12N9/10 , C12N9/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种生物催化转化色氨酸制备吲哚苷的方法，本发明利用共培养反应体系，建立了以色氨酸为底物的生物催化转化制备吲哚苷的工艺，通过克隆色氨酸酶TnaA及黄素依赖性单加氧酶FMO，对葡萄糖基转移酶PtUGT2进行半理性设计改造，引入UDP‑glucose循环系统以保证糖供体供应，并与能实现辅因子NADPH再生的葡萄糖脱氢酶联用，进行体内共培养体系发酵，该工艺为实现吲哚苷绿色、可持续的大量合成及全年度生产提供了方法。
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公开(公告)号：CN118599798A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410468133.5
申请日：2024-04-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种重组糖基转移酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID.NO:3所示。本发明通过基因工程技术，结合生物信息学手段，采用结构域重组的方法，获得一种新型糖基转移酶ZmDo。该酶最适反应温度、pH分别为35℃和pH 9.0，在温度为30~45℃、pH 5.5~8.5的范围内，均具有较高的酶活。同时，该糖基转移酶ZmDo专一性强、催化效率高，能够高效特异性地转化木犀草素为木犀草素‑5‑O‑葡萄糖苷。在适宜的条件下，体外酶转化时，转化率达70%以上；体内重组菌转化时，转化率达95%以上，产量达到2253 mg/L。本发明创制了特异性强、能在木犀草素5号位点上接上葡萄糖糖基的新型糖基转移酶，从而为一些高附加值的稀有天然糖苷类化合物的开发和利用提供了新方法。
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公开(公告)号：CN117070572A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202310810743.4
申请日：2023-07-04
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种生物合成二氢‑β‑紫罗兰酮的方法，包括将转化的第一宿主细胞在包含β‑紫罗兰酮的合适培养基中孵育足够的时间以将β‑紫罗兰酮转化为二氢‑β‑紫罗兰酮；其中，转化的第一宿主细胞包含合成的或重组的核酸分子，核酸分子包含编码青蒿来源的烯键还原酶AaDBR1的第一核苷酸序列以及编码NADPH再生酶的第二核苷酸序列。本发明首先构建生物合成β‑紫罗兰酮的萜类化合物前体的供应模块、β‑胡萝卜素合成模块以及β‑紫罗兰酮合成等三个模块，并对三大模块进行了重组优化，构建了优良的从头合成β‑紫罗兰酮的优良重组菌，为实现二氢‑β‑紫罗兰酮绿色、可持续的大量合成及作为天然产品的广泛应用提供了方法。
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公开(公告)号：CN108384769A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810111588.6
申请日：2018-02-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种耐高温复合酶及其应用，由β-葡萄糖苷酶与β-木糖苷酶组成。本发明提供的复合酶专一性强，且能够完全转化黄芪甲苷，使得环黄芪醇的转化回收率提高。本发明整个工艺完成时间不超过3 h，大大缩短了环黄芪醇的制备工艺，提高了生产效率；且反应过程中不需要添加强还原剂、氧化剂及强酸等试剂，降低了环境污染；该两种酶均可以自制，生产成本大大降低，适宜于工业化生产。
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公开(公告)号：CN118240790B
公开(公告)日：2025-04-08
申请号：CN202410334541.1
申请日：2024-03-22
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶的氨基酸突变体及其应用，所述氨基酸突变体是将来源于黍Panicum hallii GT 1家族的糖基转移酶PhUGT氨基酸序列的第141位脯氨酸替换为甘氨酸获得；所述氨基酸突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过基因工程技术，对具有优良特性或具有一定转木糖基能力的葡萄糖基转移酶实施定向改造，通过单点突变法获得能高效转化芹菜素为芹菜素5‑O‑木糖苷的方法。本发明获得的新型氨基酸突变体专一性强，定向转化效率高，且创制了非天然的黄酮糖苷类化合物芹菜素5‑O‑木糖苷及其制备工艺。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118308332A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410439131.3
申请日：2024-04-12
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组酶VthBga突变体及其应用。本发明对来源于火山鬃菌属嗜热菌(Vulcanisaeta thermophila)GH 1家族的β‑半乳糖苷酶进行了突变，筛选获得了优良的氨基酸突变体。所述氨基酸突变体含有2个突变位点，其中ALA266突变为G，PHE441突变为T。获得的新型β‑半乳糖苷酶能够特异性定向转化酪醇生成半乳糖型红景天苷，且转化率提高了约2.4倍。该生物转化反应酶最适反应温度高，有利于提高底物的溶解度，同时，能够在短时间内安全、高效地催化酪醇转化为半乳糖型红景天苷。本发明为高活性、高附加值的半乳糖型红景天苷的制备提供了独特高效的生物催化剂及其转化工艺。
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公开(公告)号：CN117187216A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311263540.4
申请日：2023-09-27
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从Dictyoglomus thermophilum DSM 3960基因组中克隆得到一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，与现有技术相比，本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha具有优良的耐热性能，对耐热的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha进行耐糖关键位点突变，获得的新型α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha耐糖突变体，其耐糖系数提高了2.3倍以上，该突变体能够特异性水解淫羊藿苷的R2位上通过α‑1糖苷键连接的鼠李糖，能够利用突变体高效转化淫羊藿苷生成淫羊藿次苷I。
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公开(公告)号：CN108384769B
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN201810111588.6
申请日：2018-02-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种耐高温复合酶及其应用，由β‑葡萄糖苷酶与β‑木糖苷酶组成。本发明提供的复合酶专一性强，且能够完全转化黄芪甲苷，使得环黄芪醇的转化回收率提高。本发明整个工艺完成时间不超过3 h，大大缩短了环黄芪醇的制备工艺，提高了生产效率；且反应过程中不需要添加强还原剂、氧化剂及强酸等试剂，降低了环境污染；该两种酶均可以自制，生产成本大大降低，适宜于工业化生产。
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公开(公告)号：CN105695552A
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201610219039.1
申请日：2016-04-08
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P33/20 , C12N9/2402 , C12N9/2445 , C12Y302/01021 , C12Y302/0104
Abstract: 一种酶法制备稀有人参皂苷Rh1的方法，利用来源于Thermotoga petrophila的β-葡萄糖苷酶和黑曲霉(Aspergillus niger)的α-鼠李糖苷酶，降解人参皂苷Re生产Rh1。本发明通过酶法催化人参皂苷Re生产稀有人参皂苷Rh1，生成的稀有人参皂苷Rh1纯度高，没有副产物。酶法转化的效率高，摩尔得率达到95％。
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公开(公告)号：CN104762281A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510102927.0
申请日：2015-03-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种α-鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；该重组酶最适反应温度高、热稳定性好，在优选条件下可高效表达目的蛋白，因此可在选择性水解芦丁、橘皮苷、柚皮苷、樱桃苷、柴胡皂苷及其它连接α-鼠李糖苷的黄酮类化合物或萜类香气前体化合物中的鼠李糖等领域中具有广泛的应用。
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