公开(公告)号：CN110317800A

公开(公告)日：2019-10-11

申请号：CN201910572985.8

申请日：2019-06-27

Applicant: 厦门大学

Inventor： 凌雪萍 ,  罗唯一 ,  卢英华 ,  张学良 ,  熊维德 ,  姚传义 ,  陈翠雪

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N15/74

Abstract: 本发明公开了一种用重组短芽孢杆菌生产磷脂酶D的方法，以含有来源于Streptomyces antibioticus的PLD基因序列的质粒pUC57-PLD anti为模板，扩增PLD基因；将PLD基因与载体PNCMO2连接得到质粒PNCMO2/PLD，然后转化进E.coli保存；随后从E.coli中提取质粒PNCMO2/PLD转化进B.choshinensis得到重组菌B.choshinensis/PNCMO2-PLD，然后发酵培养，胞外表达PLD。本发明中的重组质粒稳定，细胞毒性小，可实现高密度胞外表达磷脂酶D。

公开(公告)号：CN111893049A

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN202010623200.8

申请日：2020-06-30

Applicant: 厦门大学

Inventor： 凌雪萍 ,  杨庆华 ,  张学良 ,  周豪 ,  卢英华 ,  陈翠雪

IPC: C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12P5/02 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种过表达角鲨烯合成酶基因的裂殖壶菌基因工程菌株及其构建方法和应用。本发明采用裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)ATCC1381为原始菌株，通过基因工程手段在大肠杆菌中构建过表达载体，选择博莱霉素作为筛选抗性基因，真核生物的高保守序列18S rRNA作为同源臂，将线性化的过表达片段电转进入裂殖壶菌内，得到一株高产角鲨烯的基因工程菌株，为微生物生产角鲨烯以及产品工业化奠定了理论基础。

公开(公告)号：CN110317800B

公开(公告)日：2021-04-27

申请号：CN201910572985.8

申请日：2019-06-27

Applicant: 厦门大学

Inventor： 凌雪萍 ,  罗唯一 ,  卢英华 ,  张学良 ,  熊维德 ,  姚传义 ,  陈翠雪

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N15/74

Abstract: 本发明公开了一种用重组短芽孢杆菌生产磷脂酶D的方法，以含有来源于Streptomyces antibioticus的PLD基因序列的质粒pUC57‑PLD anti为模板，扩增PLD基因；将PLD基因与载体PNCMO2连接得到质粒PNCMO2/PLD，然后转化进E.coli保存；随后从E.coli中提取质粒PNCMO2/PLD转化进B.choshinensis得到重组菌B.choshinensis/PNCMO2‑PLD，然后发酵培养，胞外表达PLD。本发明中的重组质粒稳定，细胞毒性小，可实现高密度胞外表达磷脂酶D。