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公开(公告)号：CN106636151A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201710098815.1
申请日：2017-02-23
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12N9/1048 , C12N15/75 , C12N2800/101 , C12P19/04
Abstract: 一株过表达糖基转移酶基因的工程菌及构建方法，涉及基因工程及微生物发酵，公开了一株过表达糖基转移酶基因的地衣芽孢杆菌及其构建方法，克隆了多糖絮凝剂合成途径的关键酶糖基转移酶基因(epsB)，利用大肠杆菌－芽孢杆菌穿梭质粒构建重组表达载体。通过电转化的方法将重组质粒导入到地衣芽孢杆菌，构建了重组地衣芽孢杆菌HN301‑4，构建的重组地衣芽孢杆菌比出发菌株的多糖絮凝剂活性提高了117.92％，产量提高了13.98％。可望用于多糖絮凝剂的工业化生产，提高产量，降低成本。
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公开(公告)号：CN105624080A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201610028296.7
申请日：2016-01-15
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12N9/1048 , C12N15/66 , C12N15/75 , C12N2800/101 , C12P19/04
Abstract: 高产多糖絮凝剂的地衣芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法，属于基因工程及微生物发酵技术领域。基因工程菌是在地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中过表达epsDEF基因的基因工程菌。epsDEF基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No 1。基因工程菌制备：将epsDEF基因克隆到表达载体上获得重组表达载体，将重组表达载体通过电转化方法导入产胞外多糖的地衣芽孢杆菌中即得高产多糖絮凝剂的基因工程菌。多糖絮凝剂的制备：将基因工程菌发酵培养，收集发酵液，提纯，即得多糖絮凝剂。基因工程菌在发酵过程中发酵液絮凝活性显著提高，多糖絮凝剂产量显著提高。多糖絮凝剂在污水处理和食品工程中应用。
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公开(公告)号：CN104745518A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201510180905.6
申请日：2015-04-16
Applicant: 厦门大学
Abstract: 利用海洋交替单胞菌制备生物絮凝剂的方法，涉及一种生物絮凝剂。所述交替单胞菌(Alteromonas sp.)H-6，保藏编号CGMCC No.10612。将甘油管中保藏的菌种接入种子培养基中培养，然后接入斜面培养基中继续培养；将新鲜斜面上的菌落接于种子培养基中培养，取种子液接入发酵培养基培养，得生物絮凝剂；将生物絮凝剂发酵液第一次离心，除去沉淀，收集上清液，在上清液中加入无水乙醇，于4℃冰箱静置过夜后进行第二次离心，除去上清液，将沉淀物溶于水中，用透析袋透析，向透析后的溶液中加入无水乙醇，静置后进行第三次离心，收集最终沉淀物，干燥后即得到生物絮凝剂纯品。无毒无害、无二次污染。
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公开(公告)号：CN106801064B
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201710077962.0
申请日：2017-02-14
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种脱氢异构酶基因敲除的裂殖壶菌工程菌的构建方法及应用，包括如下步骤：(1)以裂殖壶菌的基因组为DNA模板，用上游引物对和下游引物对分别PCR扩增FabA基因的上游片段UFabA和下游片段DFabA；(2)将上游片段UFabA和下游片段DFabA与敲除载体连接，构建重组敲除质粒；(3)将上述重组敲除质粒电转化裂殖壶菌，用抗性平板筛选，并经PCR抗性基因序列验证，得转化子，即所述脱氢异构酶基因敲除的裂殖壶菌工程菌。本发明提供了裂殖壶菌敲除基因的工程菌的构建方法构，建了敲除FabA基因裂殖壶菌重组菌，该工程菌产多不饱和脂肪酸的能力比出发菌株中所占总油脂的比例减少了26％，而饱和脂肪酸的生产量增加16％。
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公开(公告)号：CN105624080B
公开(公告)日：2019-02-05
申请号：CN201610028296.7
申请日：2016-01-15
Applicant: 厦门大学
Abstract: 多糖絮凝剂的地衣芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法，属于基因工程及微生物发酵技术领域。基因工程菌是在地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中过表达epsDEF基因的基因工程菌。epsDEF基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No 1。基因工程菌制备：将epsDEF基因克隆到表达载体上获得重组表达载体，将重组表达载体通过电转化方法导入产胞外多糖的地衣芽孢杆菌中即得多糖絮凝剂的基因工程菌。多糖絮凝剂的制备：将基因工程菌发酵培养，收集发酵液，提纯，即得多糖絮凝剂。基因工程菌在发酵过程中发酵液絮凝活性显著提高，多糖絮凝剂产量显著提高。多糖絮凝剂在污水处理和食品工程中应用。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN104745518B
公开(公告)日：2017-06-27
申请号：CN201510180905.6
申请日：2015-04-16
Applicant: 厦门大学
Abstract: 利用海洋交替单胞菌制备生物絮凝剂的方法，涉及一种生物絮凝剂。所述交替单胞菌(Alteromonas sp.)H‑6，保藏编号CGMCC No.10612。将甘油管中保藏的菌种接入种子培养基中培养，然后接入斜面培养基中继续培养；将新鲜斜面上的菌落接于种子培养基中培养，取种子液接入发酵培养基培养，得生物絮凝剂；将生物絮凝剂发酵液第一次离心，除去沉淀，收集上清液，在上清液中加入无水乙醇，于4℃冰箱静置过夜后进行第二次离心，除去上清液，将沉淀物溶于水中，用透析袋透析，向透析后的溶液中加入无水乙醇，静置后进行第三次离心，收集最终沉淀物，干燥后即得到生物絮凝剂纯品。无毒无害、无二次污染。
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公开(公告)号：CN106801064A
公开(公告)日：2017-06-06
申请号：CN201710077962.0
申请日：2017-02-14
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种脱氢异构酶基因敲除的裂殖壶菌工程菌的构建方法及应用，包括如下步骤：(1)以裂殖壶菌的基因组为DNA模板，用上游引物对和下游引物对分别PCR扩增FabA基因的上游片段UFabA和下游片段DFabA；(2)将上游片段UFabA和下游片段DFabA与敲除载体连接，构建重组敲除质粒；(3)将上述重组敲除质粒电转化裂殖壶菌，用抗性平板筛选，并经PCR抗性基因序列验证，得转化子，即所述脱氢异构酶基因敲除的裂殖壶菌工程菌。本发明提供了裂殖壶菌敲除基因的工程菌的构建方法构，建了敲除FabA基因裂殖壶菌重组菌，该工程菌产多不饱和脂肪酸的能力比出发菌株中所占总油脂的比例减少了26％，而饱和脂肪酸的生产量增加16％。
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公开(公告)号：CN106676118A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201710098833.X
申请日：2017-02-23
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12N15/75 , C12N2800/101 , C12P19/04
Abstract: 高产多糖絮凝剂的地衣芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法，涉及基因工程及微生物发酵。公开了一株过表达糖基转移酶基因的地衣芽孢杆菌及其构建方法，克隆了多糖絮凝剂合成途径的关键酶糖基转移酶基因(epsA)，利用大肠杆菌－芽孢杆菌穿梭质粒构建重组表达载体。通过电转化的方法将重组质粒导入到地衣芽孢杆菌，构建了重组地衣芽孢杆菌HN301‑3，构建的重组地衣芽孢杆菌比出发菌株的多糖絮凝剂产量提高了23.17％。可望用于多糖絮凝剂的工业化生产，提高产量，降低成本。
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公开(公告)号：CN105624176A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201610028141.3
申请日：2016-01-15
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/54 , C12N15/75 , C12P19/04 , C02F3/34 , C02F101/20 , C02F101/30
CPC classification number: C12N9/1241 , C02F3/34 , C02F2101/20 , C02F2101/308 , C12N15/75 , C12N2800/108 , C12N2800/60 , C12Y207/07009
Abstract: 过表达尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因的工程菌及构建，属于基因工程及微生物发酵技术领域。克隆了多糖絮凝剂合成途径的关键酶尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因，利用大肠杆菌－芽孢杆菌穿梭质粒构建重组表达载体。通过电转化的方法将重组质粒导入到地衣芽孢杆菌，构建了重组地衣芽孢杆菌HN301-2，构建的重组地衣芽孢杆菌比出发菌株的多糖絮凝剂产量提高了15.6％，发酵液絮凝活性提高了70％。可望用于多糖絮凝剂的工业化生产，提高产量，降低成本。
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