一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN106084065B

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201610394140.0

    申请日:2016-06-06

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用,属于利用基因工程制备结肠靶向重组毒素。一种结肠靶向重组毒素,其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示,以pET28a为表达载体,BL21(DE3)为表达宿主,构建了BL21(DE3)(pET28a‑rCCK96‑104PE38KDEL)重组工程菌株,带6聚组氨酸标签,便于纯化。利用Ni‑NTA金属螯合亲和层析柱,结合rTEV酶的特异性切割的方法,仅通过两步纯化,就获得了高活性、高纯度、无冗余序列的rCCK96‑104PE38KDEL重组蛋白,纯度在95%以上;在体外细胞实验中,纯化后的rCCK96‑104PE38KDEL重组免疫毒素能够特异性杀死高表达CCK2R的结肠癌细胞,抑制了癌细胞的增殖和扩散,对正常细胞和其它非CCK2R高表达肿瘤细胞没有杀伤作用,因此,rCCK96‑104PE38KDEL符合作为肿瘤靶向药物的条件,为治疗结肠癌提供了新的方向。

    一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法

    公开(公告)号:CN110018145A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201910330343.7

    申请日:2019-04-23

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明属于食品安全免疫学检测技术领域,具体涉及一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法。所述试纸包括底板,所述底板上从左到右依次固接有加样垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述硝酸纤维素膜上从左到右依次设置有检测带和参照带;所述检测带由大田软海绵酸-蛋白质偶联复合物喷射在所述硝酸纤维素膜上干燥后形成;所述参照带由抗小鼠二抗喷射在所述硝酸纤维素膜上,干燥后形成。本发明提供的试纸及检测方法能快速、灵敏地检测出海产样品中的大田软海绵酸的含量水平,适用于大量样本毒素的安全筛查,从而为海产品食用安全提供快速检测试剂。

    一种原位增强环氧树脂的方法

    公开(公告)号:CN106554481A

    公开(公告)日:2017-04-05

    申请号:CN201611041030.2

    申请日:2016-11-24

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种原位增强环氧树脂的方法,属于生物质能源化工领域,解决了现有技术中木质素改性环氧树脂的方法工艺复杂,成本高,对环氧树脂增强性能不稳定,增强后的环氧树脂性能还有待提高的技术问题。本发明的方法先以稻壳为原料,制备碱木质素/硅酸钠混合溶液、纳米二氧化硅/木质素复合颗粒,脱出硅酸钠的碱木质素溶液,及原位碱催化降解液相木质素中的一种或多种,然后将它们中的一种或多种作为合成反应中的增强料,部分替代价格昂贵且有毒的双酚A,直接用于环氧树脂原位聚合。该方法成本低、操作简单、节约资源,制备的环氧树脂具有优异的热学性能和力学性能,在环氧树脂改性领域具备广阔的应用前景。

    一种卵白蛋白双抗夹心ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN102539788B

    公开(公告)日:2013-12-11

    申请号:CN201210010496.1

    申请日:2012-01-13

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种卵白蛋白双抗夹心ELISA检测方法,属于生物检验检疫领域。抗卵白蛋白的单克隆抗体的制备,抗卵白蛋白的多克隆抗体的制备,包被抗体用特异性高的单克隆抗体,检测抗体用HRP标记的多克隆抗体,检测程序简单方便,检测时间短,且灵敏度高,最低检测限可达到0.31ng/mL,用于制备快速、有效、低成本的过敏原检测试剂盒,操作简单方便,一次操作时间不超过2h,且可同时检测多个样品,节省时间,检测灵敏度高。

    一种卵白蛋白双抗夹心ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN102539788A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210010496.1

    申请日:2012-01-13

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种卵白蛋白双抗夹心ELISA检测方法,属于生物检验检疫领域。抗卵白蛋白的单克隆抗体的制备,抗卵白蛋白的多克隆抗体的制备,包被抗体用特异性高的单克隆抗体,检测抗体用HRP标记的多克隆抗体,检测程序简单方便,检测时间短,且灵敏度高,最低检测限可达到0.31ng/mL,用于制备快速、有效、低成本的过敏原检测试剂盒,操作简单方便,一次操作时间不超过2h,且可同时检测多个样品,节省时间,检测灵敏度高。

    一种海洋贝毒素单抗制备方法

    公开(公告)号:CN101845097A

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN201010153343.3

    申请日:2010-04-23

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种海洋贝毒素单抗制备方法,其特征在于:制备小分子贝毒素单抗用于动物免疫和杂交瘤细胞筛选的抗原为同一偶联物,减少了常规小分子物质单抗制备方法中免疫原与检测原不同制备的麻烦与浪费;并采用了正筛法和负筛法相结合的筛选法进行单抗杂交瘤细胞的筛选,可减少大量标准抗原的消耗,其筛选的杂交瘤细胞分泌的抗体具有较好的抗原竞争活性。本发明积极效果是抗原制备简单、标准抗原用量小,节约成本,抗体竞争活性好。

    一种制备短裸甲藻毒素单克隆抗体的方法

    公开(公告)号:CN101509031A

    公开(公告)日:2009-08-19

    申请号:CN200910066698.6

    申请日:2009-03-27

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种制备短裸甲藻毒素单克隆抗体的方法涉及免疫安全检测技术中单克隆抗体的制备,采用如下步骤完成,(1)完全抗原的制备,包括免疫抗原(BTX-IgG)和检测抗原(BTX-BSA)制备,(2)动物免疫,(3)取血清效价大于104的被免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法融合,制备单克隆抗体。用本免疫方法所制备的单克隆抗体腹水效价可达2.4×105,亲和常数达0.6×109M-1,腹水抗体效价和亲和常数不低于传统免疫方法所得抗体,免疫速度快,从而有效地降低单克隆抗体制备的成本。

    一种头孢噻呋降解产物的制备方法

    公开(公告)号:CN110590698B

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN201910904943.X

    申请日:2019-09-24

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种头孢噻呋降解产物的制备方法,属于有机合成化学领域,包括以下步骤:S1:取代反应,以化合物2‑{2‑[(叔丁氧基羰基)氨基]噻唑‑4‑基}‑2‑氧乙酸为原料,将其与氯化亚砜进行反应,得到中间产物[4‑(2‑氯‑2‑氧代乙酰基)噻唑‑2‑基]氨基甲酸叔丁酯,S2:加入氨基乙醛缩二甲醇和二氯甲烷进行搅拌,S3:加入甲氧胺盐酸盐和乙醇进行加热回流,S4:脱保护基反应,得到目标产物,其化学式为(Z)‑2‑(2‑氨基噻唑‑4‑基)‑2‑(甲氧基亚氨基)‑N‑(2‑氧代乙基)乙酰胺。本发明的制备方法更加的科学合理,具有成本低,步骤少,操作简便,时间较短,收率高的优点,适合实验室制备或大规模工业化生产,具有科研和生产应用价值。

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