公开(公告)号：CN119799797A

公开(公告)日：2025-04-11

申请号：CN202510106048.9

申请日：2025-01-23

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所 ,  广东温氏南方家禽育种有限公司

Inventor： 赵智锋 ,  姜自琴 ,  邹娴 ,  罗成龙 ,  何燕华 ,  徐振强 ,  朱颖 ,  舒鼎铭

IPC: C12N15/87 ,  C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/65 ,  C12N5/10 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种鸡原始生殖细胞的电转染方法。属于生物技术领域。该方法包括如下步骤：(1)鸡原始生殖细胞的培养及计数；(2)将计数之后的鸡原始生殖细胞与电转缓冲液、待转染材料混合，得到电转染体系；所述待转染材料为miRNA抑制剂、miRNA模拟物或DNA；(3)将电转染体系转移至电极杯中，使用电转仪进行转染。与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：本发明方法能够使miRNA抑制剂、miRNA模拟物或载体DNA在原始生殖细胞中成功表达，且表达量显著提高，有助于研究原始生殖细胞自我更新、增殖等特性，满足体外细胞实验以及实施基因编辑技术的要求。

公开(公告)号：CN118389599B

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202410832652.5

申请日：2024-06-26

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 罗成龙 ,  邹娴 ,  舒鼎铭 ,  李晓娇 ,  何燕华 ,  刘子敬

IPC: C12N15/86 ,  C12N15/12 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种利用鸡全基因组CRISPR高通量技术筛选呕吐毒素抗性基因的方法。属于动物育种技术领域。本发明先获得了稳定表达Cas9蛋白的DF‑1细胞系。随后构建鸡全基因组sgRNA文库质粒并将其包装成慢病毒感染DF‑1‑Cas9细胞系，利用流式细胞术获得敲除细胞库。以呕吐毒素为模型攻毒敲除细胞库，收集存活细胞并扩大培养，提取细胞基因组信息进行高通量测序，再使用MAGeCK软件进行差异分析，最后构建单基因敲除细胞系验证抗性基因。本发明构建了鸡全基因组敲除文库筛选技术，成功筛选到呕吐毒素抗性基因，对禽细胞建立全基因组CRISPR敲除细胞库的流程提供参考意义，为鸡功能基因的高通量筛选奠定基础。

公开(公告)号：CN116286612A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310325808.6

申请日：2023-03-30

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 邹娴 ,  罗成龙 ,  舒鼎铭 ,  何燕华 ,  陈鹏 ,  计坚 ,  李晓娇

IPC: C12N5/0735

Abstract: 本发明公开了一种以mTOR、SMAD信号通路和p53基因为靶点在提高鸡PGCs体外建系效率中的应用，属于鸡原始生殖细胞体外建系技术领域，本发明发现mTOR、SMAD信号通路和p53基因与鸡PGCs体外建系效率相关，并以此为基础开发了组合物，可以显著提高鸡PGCs的体外建系效率。

公开(公告)号：CN110564832B

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN201910861678.1

申请日：2019-09-12

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 刘天飞 ,  瞿浩 ,  罗成龙 ,  王艳 ,  计坚 ,  舒鼎铭

IPC: C12Q1/6869 ,  G16B30/00

Abstract: 本发明公开了一种基于高通量测序平台的基因组育种值估计方法与应用。该方法包括如下步骤：(1)确定参考群体和候选群体；(2)测定参考群体的目标性状表型，并剔除固定效应，获取校正表型值；(3)参考群体的全基因组标记分型；(4)参考群体的基因标记质量控制；(5)参考群体纯合等位基因标记对应表型偏离幅度的统计：(6)参考群体的无效基因组标记剔除；(7)候选群体的全基因组标记分型；(8)候选群体的基因标记质量控制；(9)候选群体的无效基因组标记剔除：(10)估计基因组育种值。本发明方法从等位基因纯合子对表型的偏离程度判断基因标记是否有效，剔除无效标记，保留有效标记，大幅提升基因组育种值估计准确性。

公开(公告)号：CN116036101A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202310044027.X

申请日：2023-01-29

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 蒋明 ,  计坚 ,  瞿浩 ,  罗成龙 ,  舒鼎铭 ,  谢春琳

IPC: A61K31/7016 ,  A61K31/7036 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明属于耐药性药物的技术领域，具体涉及海藻糖在提高耐药菌敏感性药物和辅助鸡抗病育种的应用。所述耐药菌包括庆大霉素肠炎沙门氏耐药菌(SE‑R)、大肠杆菌K12、迟缓爱德华菌EIB202、溶藻弧菌VA、铜绿假单胞菌PE以及肺炎克雷伯氏菌KPN；所述海藻糖可以提高耐药菌胞内抗生素的含量，从而提高细菌对抗生素敏感性；海藻糖可协同庆大霉素减少鸡脾脏、肝脏和肾脏中细菌的含量，提高惠阳胡须鸡感染后的存活率；海藻糖能够协同庆大霉素增强鸡对细菌的清除能力，提高惠阳胡须鸡对庆大霉素肠炎沙门氏耐药菌的抗感力，所述海藻糖联合庆大霉素在制备提高耐药菌敏感性以及辅助鸡抗病育种的药物的应用。

公开(公告)号：CN112522315B

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN202011445596.8

申请日：2020-12-08

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 邹娴 ,  罗成龙 ,  舒鼎铭 ,  李莹 ,  何燕华 ,  何静怡

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N5/0735 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种鸡原始生殖细胞转染方法。属于细胞转染技术领域。包括：鸡原始生殖细胞的分离培养；转染，转染前细胞呈圆形、边缘光亮，直径11～13μm，部分细胞2～4个连在一起；质粒、转染试剂和鸡原始生殖细胞细胞数的配比为(1.5～3μg):(2～4μL):(103～104个)；转染时细胞2～3层，最上层汇合度接近100％；转染培养基为有血清有双抗完全培养基；转染时间5～12h；转染试剂为Lipofectamine 3000。本发明的有益效果为：转染效率达到了23.4％。为家禽基因组编辑技术的应用奠定基础。

公开(公告)号：CN112553140B

公开(公告)日：2022-09-16

申请号：CN201910915176.2

申请日：2019-09-26

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 邹娴 ,  罗成龙 ,  王劼 ,  瞿浩 ,  舒鼎铭 ,  王艳 ,  吕晓慧

IPC: C12N5/071 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N9/02

Abstract: 本发明公开了一种雌性鸡原始生殖细胞体外扩增培养体系及其应用。本发明的培养体系组成如下：52～54％(v/v)KO‑DMEM、30％(v/v)大鼠肝细胞培养液、7.5％(v/v)胎牛血清、2.5％(v/v)鸡血清、1％(v/v)非必需氨基酸、1％(v/v)GlutaMAXTM、1％(v/v)丙酮酸、1％(v/v)β‑巯基乙醇、1％(v/v)青霉素链霉素、1～3％(v/v)芳香化酶培养液、4ng/mL rmSCF、2.5ng/mL rhFGF。本发明的培养体系扩增雌性鸡原始生殖细胞成功率最高可达37.5％，且能保持雌性鸡原始生殖细胞的未分化状态和良好生物学特性。

公开(公告)号：CN113308549A

公开(公告)日：2021-08-27

申请号：CN202110541670.4

申请日：2021-05-18

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所 ,  广东智威农业科技股份有限公司

Inventor： 王艳 ,  吴日富 ,  瞿浩 ,  舒鼎铭 ,  刘天飞 ,  罗成龙 ,  计坚

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种鸡羽色性状相关基因MC1R分子标记及其应用。涉及鸡标记辅助选择技术领域。与MC1R基因编码区DNA序列相比，包括：SNP1～SNP5。本发明对不同类型黑羽和麻羽羽色性状进行选择，加快羽色选择育种进程和提高鸡群羽色一致性，当SNP1～SNP5为CTGAC时，提高F2代公鸡胸部黑色羽型、胸背部黑×黑麻羽色表型的比例；当SNP1～SNP5为CTGAG时，提高F2代母鸡胸部黄色羽型、胸背部黄×黄麻羽色表型的比例；当SNP1～SNP5为TCACC时，提高F2代母鸡胸部麻羽、胸背部麻×麻羽色表型，以及F2代公鸡胸部红色羽型、胸背部红×红麻羽色表型的比例。

公开(公告)号：CN119876325A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202411895531.1

申请日：2024-12-22

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 谢春琳 ,  计坚 ,  陈鹏 ,  何静怡 ,  严霞 ,  蔡曼珊 ,  马杰 ,  吴铭茵 ,  罗成龙 ,  瞿浩 ,  舒鼎铭

IPC: C12Q1/04 ,  C12Q1/24 ,  C12Q1/6869 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种影响禽类节粮性状关键菌的筛选方法，包括如下步骤：步骤1：构建两组饲料利用率存在差异的禽类组，其中一组命名为低饲料利用率组，另外一组命名为高饲料利用率组；步骤2：以高饲料利用率组的粪便为原料制作菌液，通过粪便移植技术将菌液植入低饲料利用率组的肠道，构建得到粪便移植组；步骤3：以低饲料利用率组的盲肠微生物群的信息、IgA+微生物组的信息作为对照，筛选得到第一差异信息和第二差异信息；从第一差异信息、第二差异信息中找到同时存在的菌，即为影响禽类饲料利用率的关键菌。本发明的方法通过构建高/低饲料利用率组以及粪便移植组，采用盲肠微生物群检测和IgA+微生物组的检测，可以快速、准确的筛选得到对禽类节粮性状起到明显作用的关键菌；同时，本发明还公开了一种关键菌及其用途。

公开(公告)号：CN117144017B

公开(公告)日：2024-04-02

申请号：CN202310884890.6

申请日：2023-07-19

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 计坚 ,  何静怡 ,  李莹 ,  袁裕珊 ,  许欣纯 ,  舒鼎铭 ,  罗成龙

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种与鸡生长性状相关的分子标记及其应用，涉及动物分子生物技术领域，具体的，该分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1，其第96位的碱基为T或C。本发明公开的SNP位点可用于对鸡的活体体重和胫长表型性状进行选择，加快生长性能选择育种进程和提高鸡群体型均匀度。