公开(公告)号：CN102994406A

公开(公告)日：2013-03-27

申请号：CN201210349289.9

申请日：2012-09-19

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  顾磊 ,  张娟 ,  堵国成 ,  沈依娜 ,  李梦洁 ,  李婷 ,  王丹 ,  丁雪 ,  殷政

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N9/04 ,  C12R1/84 ,  C12R1/685

Abstract: 本发明公开了一种产葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将黑曲霉葡萄糖氧化酶（GOD）基因克隆连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K，并转化Pichia pastoris GS115，经筛选鉴定得到一株可以产较高活性葡萄糖氧化酶的重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD，保藏编号为CCTCC NO：M2012266。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在摇瓶中的酶活为52U/mL，比野生菌的酶活提高了近24倍，为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。

公开(公告)号：CN102994406B

公开(公告)日：2014-04-02

申请号：CN201210349289.9

申请日：2012-09-19

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  顾磊 ,  张娟 ,  堵国成 ,  沈依娜 ,  李梦洁 ,  李婷 ,  王丹 ,  丁雪 ,  殷政

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N9/04 ,  C12R1/84 ,  C12R1/685

Abstract: 本发明公开了一种产葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将黑曲霉葡萄糖氧化酶（GOD）基因克隆连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K，并转化Pichia pastoris GS115，经筛选鉴定得到一株可以产较高活性葡萄糖氧化酶的重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD，保藏编号为CCTCC NO：M2012266。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在摇瓶中的酶活为52U/mL，比野生菌的酶活提高了近24倍，为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。

公开(公告)号：CN102925375A

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201210350000.5

申请日：2012-09-19

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  顾磊 ,  张娟 ,  堵国成 ,  沈依娜 ,  李梦洁 ,  李婷 ,  王丹 ,  丁雪 ,  殷政

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/53 ,  C12N15/81 ,  C12N9/04 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种产葡萄糖氧化酶酵母工程菌及构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将黑曲霉的葡萄糖氧化酶（GOD）基因克隆连接到毕赤酵母表达载体pGAPZα，并转化Pichia pastoris X33，经筛选鉴定得到一株可以产较高活性葡萄糖氧化酶的重组毕赤酵母Pichia pastoris X33-pGAPZα-GOD，保藏编号为CCTCC NO：M2012267。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在摇瓶中的酶活为23U/mL，比野生菌的酶活提高了近11倍，为葡萄糖氧化酶的大规模生产及作为食品添加剂在淀粉中的应用奠定了良好的基础。