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公开(公告)号：CN110904109B
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN201911294774.9
申请日：2019-12-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/66 , A01H5/10 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种控制水稻种子萌发的miR1866基因、过表达载体、gRNA表达载体、制备方法及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明依据CRISPR/Cas9和高表达miRNA的技术原理对水稻中miR1866基因的表达进行调控。设计miR1866基因小干扰片段，构建pH‑Ubi‑CAS9‑miR1866和pTCK303‑miR1866表达载体，利用农杆菌介导法导入粳稻品种日本晴，以潮霉素(Hyg)抗性标记筛选获得阳性转基因植株，分别测序和qRT‑PCR的方法鉴定miR1866的突变和miR1866基因表达量，结果表明：分别获得了miR1866突变植株和miR1866高表达植株。具有重要应用价值的水稻miR1866突变植株和miR1866高表达植株，与野生型日本晴相比，miR1866突变植株种子萌发速率显著变慢，而miR1866高表达植株种子萌发速率显著加快。
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公开(公告)号：CN110904109A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911294774.9
申请日：2019-12-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/66 , A01H5/10 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种控制水稻种子萌发的miR1866基因、过表达载体、gRNA表达载体、制备方法及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明依据CRISPR/Cas9和高表达miRNA的技术原理对水稻中miR1866基因的表达进行调控。设计miR1866基因小干扰片段，构建pH-Ubi-CAS9-miR1866和pTCK303-miR1866表达载体，利用农杆菌介导法导入粳稻品种日本晴，以潮霉素(Hyg)抗性标记筛选获得阳性转基因植株，分别测序和qRT-PCR的方法鉴定miR1866的突变和miR1866基因表达量，结果表明：分别获得了miR1866突变植株和miR1866高表达植株。具有重要应用价值的水稻miR1866突变植株和miR1866高表达植株，与野生型日本晴相比，miR1866突变植株种子萌发速率显著变慢，而miR1866高表达植株种子萌发速率显著加快。
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公开(公告)号：CN109627305A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201910033282.8
申请日：2019-01-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8261 , C12N2800/22
Abstract: 本发明涉及编码OsbHLH116蛋白的基因、重组载体、重组菌在调控水稻株型方面的应用，属于基因工程技术领域。本发明对于水稻OsbHLH116基因序列进行优化，获得了无SacI酶切位点的OsbHLH116优化基因，将其与pTCK303载体连接获得OsbHLH116‑OX表达载体，利用农杆菌介导法将该载体转化水稻品种日本晴，筛选获得转基因阳性植株。试验中发现，与野生型日本晴相比转基因株系成熟期株高和叶夹角显著减小，株型紧凑，表明OsbHLH116基因参与调控水稻株高和叶夹角的水稻株型。因此，该基因在水稻株型建成中具有重要作用，在塑造和培育理想株型水稻新品种上具有潜在应用价值。
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公开(公告)号：CN109321675A
公开(公告)日：2019-02-12
申请号：CN201811289704.X
申请日：2018-10-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种同步检测水稻粒宽基因GW5和GW8的试剂盒及多重PCR检测方法，属于农业生物技术领域。本发明的同步检测水稻粒宽基因GW5和GW8的试剂盒，包括GW5基因的特异性引物、GW8基因的特异性引物、2×Taq Master Mix、DNA Marker。利用本发明的试剂盒及多重PCR检测方法，通过优化PCR反应体系及程序，建立了能同步检测GW5和GW8基因的多重PCR方法，一次PCR反应即能检测两个目标基因。该方法操作步骤简单、成本低、检测时间短、提高了检测效率，为水稻优质高产品种的分子标记辅助育种和品种改良提供了依据。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103710354A
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201310533233.3
申请日：2013-10-31
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种旱稻抗旱基因、功能标记及应用，所述的旱稻抗旱基因OsbHLH120属于bHLH类转录因子，位于水稻第9染色体RM24271和RM566之间；该旱稻抗旱基因OsbHLH120与水稻正常的序列相比在编码区缺失了15个碱基，所述缺失碱基位于基因转录起始密码子下游第628-642bp。同时，本发明根据该转录因子水旱稻序列差别特点设计旱稻特异基因功能标记，通过该功能标记可以有目的的选择含有该基因特征碱基序列的旱稻资源，并将这些旱稻资源用于抗旱型水稻育种，以及利用该功能标记进行标记辅助选择，更快速、准确进行抗旱型水稻品种的选育。
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公开(公告)号：CN114540369B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202210192351.1
申请日：2022-02-28
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/84 , C12N15/113 , A01H5/10 , A01H6/46
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及OsBEE1基因在提高水稻产量中的应用。本发明根据OsBEE1基因的编码序列，依据CRISPR/Cas9技术原理进行定向编辑，选择OsBEE1基因的突变靶点，构建CRISPR/Cas9‑gRNA表达载体。利用农杆菌介导法导入水稻，以除草剂抗性标记筛选获得阳性转基因植株，利用测序法分析鉴定突变单株，获得具有育种应用价值的水稻OsBEE1突变新种质。与野生型相比，突变后代的籽粒千粒重显著增加，增幅达5.12～7.08%，表明OsBEE1基因与控制水稻粒重有关，可应用于水稻高产育种。
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公开(公告)号：CN115491381A
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202110678422.4
申请日：2021-06-18
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/54 , C12N9/12 , C12N15/11 , C12N15/82 , C12N15/55 , A01H5/00 , A01H5/10 , A01H6/46 , C12Q1/6895 , A01H1/04
Abstract: 本发明涉及水稻铜胁迫响应基因OsCORK1及其编码蛋白与应用。本发明通过构建CRISPR/Cas9‑OsCORK1敲除载体，利用农杆菌介导法转化水稻，获得OsCORK1敲除突变体；并通过试验证明敲除OsCORK1基因的水稻突变体经10μM CuSO4处理后，突变体的Cu积累量较野生型对照显著降低(P＜0.01)，可显著改善植株的耐铜性；且突变体地上长度、根长及鲜重较野生型长或大(P＜0.05)，表明降低OsCORK1基因的表达可显著增强水稻对铜胁迫的抗性。OsCORK1基因或蛋白在提高水稻铜胁迫抗性或在水稻铜胁迫抗性品种选育方面具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN108913717A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201810866033.2
申请日：2018-08-01
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用CRISPR/Cas9系统对水稻PHYB基因定点突变的方法，属于植物基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9技术，对水稻光敏色素PHYB基因进行定向编辑，通过设计PHYB突变靶点、构建表达载体，并利用农杆菌介导法导入水稻，实现了对水稻PHYB基因的定点突变，该方法操作更加简单快捷、试验周期短，为快速创制抗旱和耐盐水稻新品种提供了一种简单有效的技术手段，对改良水稻性状和高产稳产育种具有重要实践意义。
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公开(公告)号：CN103710341B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201310695733.7
申请日：2013-12-16
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种miR1432靶基因串联模拟物、基因表达盒、表达载体、制备方法及应用，属于植物生物技术领域。本发明根据miR1432的核苷酸序列设计并合成靶基因串联模拟物，构建籽粒特异启动子质粒表达载体，并转化农杆菌；利用农杆菌转化水稻愈伤组织，经过筛选、分化得到转基因阳性植株；再对转基因植株籽粒产量相关的表型进行鉴定。通过转基因植株表型分析表明，转miR1432靶基因串联模拟物水稻植株籽粒明显变大，具有广阔的应用前景。
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