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公开(公告)号:CN118284693A
公开(公告)日:2024-07-02
申请号:CN202280077470.0
申请日:2022-11-21
Applicant: 花王株式会社
Abstract: 本发明提供低价、简便地制作多样性高的突变文库池的方法。包括以下的工序(a)~(c)的突变文库池的制作方法:(a)使用模板DNA和多种突变导入用引物对,对每对该突变导入用引物对利用DNA聚合酶进行DNA合成反应,获得具有5’突出末端的DNA片段的工序,其中,该突变导入用引物对与该模板DNA进行退火,具有相互互补的区域,并且在至少一方包含突变导入部位;(b)使DNA连接酶作用于工序(a)中所得到的DNA片段的工序;和(c)用工序(b)中所得到的DNA对宿主细胞进行转化的工序。
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公开(公告)号:CN116323910A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202180067664.8
申请日:2021-09-29
Applicant: 花王株式会社
IPC: C12N1/15
Abstract: 本发明提供能够在低温下发挥功能、同时维持或提高了稳定性和/或清洗性能的α-淀粉酶。该α-淀粉酶突变体为包含与序列编号2所示的氨基酸序列的G5、S38、T49、Q96、N126、T129、G140、F153、Q167、G179、W186、E187、N192、M199、Y200、L203、Y205、D206、R211、K215、H240、S241、Y242、G244、E257、F259、K278、H283、S284、A288、H295、Y296、N303、T320、S331、L348、Y360、W408、L429、V430、G433、A434、W439、N471、G476和G477的各位置相当的位置的1处或多处氨基酸残基的改变的亲本α-淀粉酶的突变体,上述亲本α-淀粉酶或α-淀粉酶突变体相对于序列编号4所示的氨基酸序列具有至少90%的序列同一性。
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公开(公告)号:CN111615559A
公开(公告)日:2020-09-01
申请号:CN201980008654.X
申请日:2019-01-15
Applicant: 花王株式会社
Abstract: 本发明提供一种对角质污垢的清洁力较高的清洁剂、及评价酶或包含其的组合物的角质污垢分解能力的方法。一种以M23A亚族蛋白酶作为有效成分的角质污垢清洁剂。一种评价酶或包含其的组合物的角质污垢分解能力的方法。该方法包括:获取受试酶或包含其的组合物对基准肽及一种以上的底物肽的分解活性的步骤;及基于该受试酶或包含其的组合物对基准肽及底物肽的分解活性,评价该受试酶或包含其的组合物的角质污垢分解能力的步骤,该基准肽为GGGGG或GGGG,该一种以上的底物肽选自GGGXG、GXGGG、GGXG及GXGG,X为甘氨酸以外的任意的氨基酸残基。
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公开(公告)号:CN119585435A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202380055701.2
申请日:2023-07-13
Applicant: 花王株式会社
Abstract: 本发明提供一种在高浓度洗涤剂液中对蛋白质污渍的清洁性能提高的突变蛋白酶。一种突变蛋白酶,其中,由序列号1的氨基酸序列或与其具有至少90%的同一性的氨基酸序列构成,并且具有选自下述(a)~(g)中的至少1个氨基酸残基:(a)与序列号1的191位相当的位置中的Arg或Lys;(b)与序列号1的17位相当的位置中的Arg或Lys;(c)与序列号1的141位相当的位置中的Ala或Phe;(d)与序列号1的243位相当的位置中的Arg或Lys;(e)与序列号1的300位相当的位置中的Arg或Lys;(f)与序列号1的302位相当的位置中的Arg或Lys;(g)与序列号1的311位相当的位置中的Arg或Lys。
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公开(公告)号:CN118974257A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202380031770.X
申请日:2023-03-30
Applicant: 花王株式会社
IPC: C12N15/56 , C11D3/386 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N5/10 , C12N9/28 , C12N15/31 , C12N15/63
Abstract: 本发明提供在低温下显示优异的淀粉分解活性而且在低pH和/或螯合剂存在下显示优异的稳定性的α‑淀粉酶。该α‑淀粉酶是分别将相对于序列号4所示的氨基酸序列具有至少90%的序列同一性的α‑淀粉酶A、相对于序列号6所示的氨基酸序列具有至少90%的序列同一性的α‑淀粉酶B、相对于序列号8所示的氨基酸序列具有至少90%的序列同一性的α‑淀粉酶C、相对于序列号10所示的氨基酸序列具有至少90%的序列同一性的α‑淀粉酶D、或相对于序列号12所示的氨基酸序列具有至少90%的序列同一性的α‑淀粉酶E设为亲本淀粉酶的α‑淀粉酶突变体A1、B1、C1、D1和E1,其中,该A1~E1分别包含选自相当于序列号1的编号中第178‑181位的位置中的2处氨基酸残基的缺失,且包含选自相当于序列号2的编号中第178、181、238、239、240、126、129和201位的位置中的3处以上的氨基酸残基的取代,该取代至少包含下述的a)~e):a)关于A1,178H;181E或181Q;和239Qb)关于B1,178H;181E或181Q;和239Qc)关于C1,178H;181E或181Q;238F;和239Qd)关于D1,选自178H;181E或181Q;238F;和239Q中的3处以上e)关于E1,选自178H;181E或181Q;238F;239Q;和240F中的3处以上。
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公开(公告)号:CN118434867A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202280085637.8
申请日:2022-12-21
Applicant: 花王株式会社
Abstract: 本发明提供一种调配有α‑淀粉酶的清洁剂组合物,其在低温下显示高的淀粉分解活性,并且即使在包含蛋白酶的组合物中也显示高稳定性。该清洁剂组合物为包含α‑淀粉酶突变体和蛋白酶的清洁剂组合物,上述α‑淀粉酶突变体为包含在选自与序列编号2所示的氨基酸序列的E187和S241位相当的位置中的1处以上的位置的氨基酸残基的取代以及在选自与N192、H240和K278位相当的位置中的1处以上的位置的氨基酸残基的取代的亲本α‑淀粉酶的突变体,上述亲本α‑淀粉酶或α‑淀粉酶突变体相对于序列编号4所示的氨基酸序列具有至少85%的序列同一性。
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公开(公告)号:CN111615559B
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN201980008654.X
申请日:2019-01-15
Applicant: 花王株式会社
Abstract: 质污垢分解能力的步骤,该基准肽为GGGGG或本发明提供一种对角质污垢的清洁力较高 GGGG,该一种以上的底物肽选自GGGXG、GXGGG、的清洁剂、及评价酶或包含其的组合物的角质污 GGXG及GXGG,X为甘氨酸以外的任意的氨基酸残垢分解能力的方法。一种以M23A亚族蛋白酶作为 基。有效成分的角质污垢清洁剂。一种评价酶或包含其的组合物的角质污垢分解能力的方法。该方法包括:获取受试酶或包含其的组合物对基准肽及(56)对比文件Hui-Lin Zhao等.Elastolytic mechanismof a novel M23 metalloproteasepseudoalterin from deep-seaPseudoalteromonas sp. CF6-2: Cleaving notonly glycyl bonds in the hydrophobicregions but also peptide bonds in thehydrophilic regions involved in cross-linking.J. Biol. Chem..2012,39710–39720页.Anke Gökçen等.Biofilm-degradingenzymes from Lysobactergummosus.Virulence.2014,378–387页.
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