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公开(公告)号:CN113444743A
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN202110693336.0
申请日:2021-06-22
Applicant: 贵州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12N15/62 , A61K39/02 , A61K39/39 , A61P11/00 , A61P31/04 , C12R1/35
Abstract: 本发明公开了含佐剂基因的羊支原体肺炎二价核酸疫苗的构建方法,具体步骤如下:步骤一、Mo/Mmc基因组的提取:S1、Mo/Mmc贵州株的复苏与培养;S2、Mo/Mmc贵州株DNA的提取;步骤二、P113‑LppA‑IL‑2融合基因扩增:S1、粘膜免疫佐剂基因、绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种抗原基因扩增;S2、P113‑LppA融合基因扩增;S3、P113‑LppA‑IL‑2融合基因扩增;步骤三、含粘膜免疫佐剂基因的羊支原体肺炎二价核酸疫苗的制备。本发明通过选择两个不同抗原基因和黏膜免疫佐剂基因研制出核酸疫苗,可有效针对羊支原体肺炎DNA疫苗免疫效果弱等问题,解决目前疫苗研发所面临的诸多问题。
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公开(公告)号:CN113430214A
公开(公告)日:2021-09-24
申请号:CN202110694553.1
申请日:2021-06-22
Applicant: 贵州大学
Abstract: 本发明公开了一种多病原羊支原体肺炎核酸疫苗的构建方法,包括以下步骤:步骤一:Mo/Mmc基因组的提取;步骤二:MoP113/MmcLppA基因获取;步骤三:pVAX1‑P113‑LppA共表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达。本发明在前期筛选出的羊肺炎支原体多表位抗原基因MoP113和MmcLppA基础上,通过基因工程方法构建出pVAX1‑P113‑LppA共表达载体,应用间接免疫荧光技术验证重组质粒在MDBK中的表达情况;本发明选择两个不同抗原基因研制出核酸疫苗,可有效针对Mo和Mmc感染引起的羊支原体肺炎提供免疫保护作用,解决目前疫苗研发所面临的诸多问题。
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