细菌谷氨酰胺合成酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN107739732A

    公开(公告)日:2018-02-27

    申请号:CN201710670735.9

    申请日:2017-08-08

    CPC classification number: C12N9/93 C12N15/70 C12Y603/01002

    Abstract: 本发明涉及分子生物学领域,尤其涉及一种细菌谷氨酰胺合成酶及其制备方法。细菌谷氨酰胺合成酶的制备方法,包括以下步骤:1)利用PCR技术扩增SEQ ID NO.2所示的碱基序列;2)将SEQ ID NO.2所示的碱基序列克隆入载体质粒中,构建细菌谷氨酰胺合成酶的表达载体;3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体,依次经扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白过程得到细菌谷氨酰胺合成酶蛋白。利用Ecoli BL21-pET21a-GS重组菌株诱导表达细菌谷氨酰胺合成酶蛋白的方法简单,易操作,而且发现了新的谷氨酰胺合成酶基因序列,对于谷氨酰胺合成酶的研究提供了新的研究方向。

    GS-DHFRmut双基因筛选表达载体、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN108251453A

    公开(公告)日:2018-07-06

    申请号:CN201810184970.X

    申请日:2018-02-11

    Inventor: 张宇

    Abstract: 本发明公开了一种GS‑DHFRmut双标记基因的真核表达载体、制备方法及应用,属于生物技术领域,所述的表达载体含有控制谷氨酰胺合成酶基因表达的启动子及谷氨酰胺合成酶基因,以及控制突变的二氢叶酸还原酶基因表达的启动子及二氢叶酸还原酶基因,两个筛选基因下游均带有PolyA信号序列,本发明还公开了上述表达载体的制备方法及应用,通过用GS‑DHFRmut双标记筛选系统表达载体来提高外源蛋白的表达水平,同时扩大了在基因工程中的宿主细胞株的使用来源,在以后基因工程产业化发展中有着重要应用价值。

Patent Agency Ranking