Abstract:
The present invention relates to a recombinant foot and mouth disease virus including plasmid having a recombinant gene having a gene encoding P1 protein which is a protective antigen of foot and mouth disease O type vaccine strain Manisa among total gene of foot and mouth disease O type vaccine strain Manisa substituted by a gene encoding P1 protein which is a protective antigen of foot and mouth disease A type standard vaccine strain, and to a method for manufacturing the same.
Abstract:
PURPOSE: A live vaccine containing a recombinant chimeric pestivirus for preventing swine fever is provided to easily trace virus for the live vaccine. CONSTITUTION: A live vaccine for preventing swine fever contains chimeric pestivirus KD26_E2LOM of sequence number 2 which is recombined to discriminate vaccine virus and outdoor-infectious virus. A gene marker is expressed by substituting E2 gene of pACBVD26 of sequence number 1 with a swine fever E2 gene. A serological marker is a marker for E^rns specific antibody.
Abstract:
돼지 전염성위장염바이러스(Transmissible gastroenteritis virus ; TGEV)의 구조 단백질 중 스파이크 단백질은 TGEV를 중화할 수 있는 중화항체 생산을 유도하는 단백질로 알려져 있다. 설사로 폐사한 돼지로부터 TGEV를 분리 동정한 후 스파이크 유전자의 염기서열을 분석하고 이 자료를 토대로 유전자재조합방법을 이용하여 곤충바이러스인 바큘로바이러스 유전자에 TGEV 스파이크 유전자를 삽입하여 재조합 TGEV 스파이크 단백질을 곤충세로(Sf9)에서 발현 시켰다. 발현된 재조합 TGEV 스파이크 단백질을 기니픽에 접종했을 때 TGEV에 대한 중화항체를 생산함을 혈청중화시험법을 이용하여 확인할 수 있었다. 따라서 재조합 TGEV 스파이크 단백질을 이용하여 TGEV에 대한 중화항체가를 TGEV 특이 단크론항체를 이용한 효소면역검사법(monoclonal antibody capture enzyme linked immunosorbent assay : MACELISA)으로 검출할 수 있다. 현재 TGEV에 대한 항체가를 측정하는 방법은 조직배양을 이용한 바이러스 중화시험법으로 까다로운 조직배양과 검사기간이 4-5일정도 소요되나 본 발명에서 사용된 MACELISA의 단계를 재조합단백질 반응 단계까지를 장치(kit)화 할 경우 TGEV에 재한 중화항체를 3시간 이내에 검사할 수 있다.
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본 발명은 국내에서 분리된 돼지파보바이러스의 항원인 VP2 단백질을 대량 생산하는 방법 및 역가 높고 안전한 돼지파보바이러스 백신을 제조하는 방법을 제공한다. 상기 VP2 단백질의 생산방법은 제3도에 나타낸 서열 또는 이와 실질적으로 동일한 서열을 갖는 돼지파보바이러스 VP2 유전자를 얻는 단계; 상기 VP2 유전자를 증폭하는 단계; 상기 증폭된 VP2 유전자를 베큘로바이러스 유래의 폴리헤드린 프로모터를 갖는 전이 벡터내에 VP2 유전자가 상기 폴리헤드린 프로모터의 조절하에 놓이게 삽입하되, VP2 유전자의 개시코돈과 프로모터와의 사이의 거리가 20 base 이하로 되도록 삽입하여 재조합 전이벡터를 제작하는 단계; 및 상기 제작된 재조합 전이벡터를 이용하여 곤충 세포를 감염시켜 VP2 단백질을 생산하는 단계를 포함한다.