인체표피성장인자의유전자를갖는벡터및그를이용한인체표피성장인자의생산방법

    公开(公告)号:KR100295909B1

    公开(公告)日:2001-10-22

    申请号:KR1019940019637

    申请日:1994-08-09

    Abstract: PURPOSE: Provided are a vector including human epidermal growth factor(EGF) which promotes the growth of human epidermal cells and inhibits the secretion of gastric acid and a manufacturing method of EGF by using the vector. CONSTITUTION: The vector including EGF is manufactured by the steps of: inserting T-mox(MOX terminator) into a recognition site of pUC19 vector to prepare pUC-Tmox vector; inserting LEU2 gene into a recognition site of pUC-Tmox to prepare pUC-TaLE vector; inserting P-mox gene(MOX promotor), alpha pre-proleader(ppL) sequence and EGF gene into a recognition site of SalI of pUC-TaLE vector; cutting pU-EGF2 vector with EcoRI restriction enzyme; and inserting a fragment including P-mox/ppL/hEGF/T-mox into a recognition site of EcoRI of aP3 vector.

    형질전환효모한세눌라폴리모르파를이용한인간혈청알부민의제조방법
    13.
    发明公开
    형질전환효모한세눌라폴리모르파를이용한인간혈청알부민의제조방법 失效
    人血清白蛋白(HSA)在转化的YEAST HANSENULAR POLYMORPHA DL-1中的超表达

    公开(公告)号:KR1020000014005A

    公开(公告)日:2000-03-06

    申请号:KR1019980033190

    申请日:1998-08-17

    CPC classification number: C12N15/63 C07K14/765 C12N5/16 C12N15/81

    Abstract: PURPOSE: Human serum albumin is over expressed in Hansenula polymorpha DL-1 transformed with HSA gene under the control of methanol oxidase gene promoter. CONSTITUTION: The invention is disclosed transformed yeasts Hansenula polymorpha DL-1 which has integrated HSA gene, isolated from human fetal liver cDNA library and removed 5'UTR without signal sequence, controlled by methanol oxidase gene promoter. Transformed yeast is cultured in YPM medium( 1 % of yeast extract, 2 % of Bacto peptone, and 2 % of methanol) at 37°C for 72 hrs. Methanol is supplied at every 12 hrs to keep the concentration 2 % of methanol in the medium constant after 24 hrs. The concentration of expressed HSA is 40-50 mg/l by western blotting compared with authentic standard HSA. This method also detects smaller degraded HSA proteins in the medium.

    Abstract translation: 目的:在甲醇氧化酶基因启动子控制下,用HSA基因转化的汉逊酵母多形汉逊酵母DL-1中过表达人血清白蛋白。 构成:公开了本发明的转化酵母多形汉逊酵母DL-1,其具有整合的HSA基因,从人胎肝cDNA文库中分离,并除去甲氧化酶基因启动子控制的没有信号序列的5'UTR。 在YPM培养基(1%的酵母提取物,2%的Bacto蛋白胨和2%的甲醇)中,将转化的酵母在37℃培养72小时。 每12小时供应甲醇,以保持培养基中2%的甲醇浓度在24小时后恒定。 与正常的标准HSA相比,通过Western印迹,表达的HSA的浓度为40-50mg / l。 该方法还检测培养基中较小的降解的HSA蛋白。

    글루코노박터 서브옥시단스의 솔비톨 탈수소효소 및 이의 유전자
    14.
    发明授权
    글루코노박터 서브옥시단스의 솔비톨 탈수소효소 및 이의 유전자 失效
    葡萄糖醛酸二氧化物及其基因的异硫氰酸酯脱氢酶

    公开(公告)号:KR100227960B1

    公开(公告)日:1999-12-01

    申请号:KR1019970005929

    申请日:1997-02-26

    Abstract: 본 발명은 글루코노박터 서브옥시단스(KCTC 2111) 균주의 원형질막에 존재하는 솔비톨 탈수소효소(sorbitol dehydrogenase) 및 이를 코드하는 유전자에 관한 것이다. 글루코노박터 서브옥시단스로부터 분리, 정제된 솔비톨 탈수소효소는 3 개의 서브유니트로 구성되어 있으며, 피롤로퀴놀린 퀴논(PQQ)을 조효소로 포함하는 75 kDa 분자량의 탈수소효소 서브유니트인 제 1 서브유니트, 50 kDa 분자량의 시토크롬 c인 제 2 서브유니트, 그리고 솔비톨 탈수소효소의 안정성에 중요한 역할을 하는 29 kDa 분자량의 제 3 서브유니트로 구성되어 있는 막결합형 솔비톨 탈수소효소이다. 그리고 솔비톨 탈수소효소의 유전자는 2265 bp를 갖는 제 1 서브유니트와 1437 bp를 갖는 제 2 서브유니트를 포함하며, 이들 서브유니트는 제한효소 PstI으로 절단되는 5.7 kb 크기의 DNA 절편내에 연결되어 있다.

    2 단계 반응 시스템에 의한 L-솔보스의 제조방법

    公开(公告)号:KR1019960031618A

    公开(公告)日:1996-09-17

    申请号:KR1019950001948

    申请日:1995-02-03

    Abstract: 본 발명은 두가지 균주를 이용한 2단계 반응 시스템에 의해 L-솔보스를 제조하는 방법에 관한 것으로서, 막투과 처리후 고정화시킨 자이모모나스 모빌리스(Zymomonas mobilis) 균주에 의해 포도당 및 과당으로부터 솔비톨을 제조하는 단계; 및 막투과 처리후 고정화시킨 글루코노박터 서브옥시단스(Gluconobacter suboxydans) 균주에 의해 상기에서 제조된 솔비톨을 L-솔보스로 전환시키는 단계를 포함하는, 2단계 반응시스템에 의하면, 보다 안정되고 효율적으로 L-솔보스를 제조할 수 있다.

    재조합 히루딘 유전자의 발현
    18.
    发明授权
    재조합 히루딘 유전자의 발현 失效
    生产HIRUDIN的方法

    公开(公告)号:KR1019960001818B1

    公开(公告)日:1996-02-05

    申请号:KR1019920011007

    申请日:1992-06-24

    Abstract: The hirudin expression vector pYEGa-HIR5 (KCTC 8518P) containing hirudin gene (I) consists of linked promoter GAL1-GAL10, alpha factor of yeasts (a on plasmid means alpha), peptide sequence for leu-asp-lys-arg which is hydrolyzed by KEX2 as operator endopeptidase and hirudin gene. The other plasmid pYEGa-HIR525 (KCTC 8519BP) (II) consists of GAL10 as promoter rather than GAL1-GAL10 of (I). (I) and (II) are useful for yeast expression to solve the problems which in E. coli the expressed hirudin is hydrolysed and the N-terminal methionine modified hirudin does not have the activity.

    Abstract translation: 含有水蛭素基因(I)的水蛭素表达载体pYEGa-HIR5(KCTC 8518P)由连接的启动子GAL1-GAL10,酵母的α因子(a在质粒表示α)组成,leu-asp-lys-arg的肽序列被水解 通过KEX2作为操作者内肽酶和水蛭素基因。 另一个质粒pYEGa-HIR525(KCTC 8519BP)(II)由GAL10作为启动子而不是(I)的GAL1-GAL10组成。 (I)和(II)可用于酵母表达以解决在大肠杆菌中表达的水蛭素被水解并且N端甲硫氨酸修饰的水蛭素不具有活性的问题。

    한세눌라 폴리모르파의 지에이피디에이치 유전자 및 이의 프로모터
    19.
    发明公开
    한세눌라 폴리모르파의 지에이피디에이치 유전자 및 이의 프로모터 失效
    GenePlideH基因及其Hansenulla poly-morpha启动子

    公开(公告)号:KR1019990033549A

    公开(公告)日:1999-05-15

    申请号:KR1019970054927

    申请日:1997-10-24

    Abstract: 본 발명은 한세눌라 폴리모르파(Hansenula polymorpha)의 글리세르알데히드-3-인산 탈수소효소(GAPDH) 유전자, GAPDH 프로모터 및 이 프로모터를 함유하는 발현 벡터에 관한 것으로, 본 발명에 따른 GAPDH 프로모터는 강력한 구성적 발현 프로모터로서 탄소원에 따른 별도의 발현 유도가 필요하지 않으므로 한세눌라 폴리모르파에서 외래 단백질을 발현시키는데 매우 유용한다.

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