公开(公告)号：CN106497973B

公开(公告)日：2019-05-17

申请号：CN201611019369.2

申请日：2016-11-18

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 王小引 ,  王天云 ,  张玺 ,  王俐 ,  李琴 ,  王芳 ,  张俊河 ,  林艳 ,  付笑笑

IPC: C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种人类和其他哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。该附着体表达载体上插入有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的分段β‑干扰素MAR序列(或者与该序列95％以上同源的核苷酸序列)，相较包含全长MAR序列或387bp MAR序列的表达载体，该载体能高效、持续、稳定地表达外源目的基因，尤其是包含E段MAR序列的载体表达最佳，可用于基因治疗。在该载体中，分段MAR序列插入载体的多克隆位点也即eGFP下游处，一方面能克服转基因沉默，另一方面能提高目的蛋白的表达水平以及后续单克隆细胞株筛选的有效性。

公开(公告)号：CN106544362B

公开(公告)日：2019-04-09

申请号：CN201611111154.3

申请日：2016-12-06

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 赵春澎 ,  王天云 ,  王小引 ,  张玺 ,  徐光华 ,  付笑笑 ,  高向征 ,  白可可

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种基于cHS4元件的哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。鸡超敏感位点4(cHS4)是一种经典绝缘子元件，具有増强子阻断与异染色质屏障的功能，能将转基因沉默的主要原因‑位置效应降到最低，还能降低外源启动子及增强子造成邻近基因异常表达的概率。本发明将cHS4序列引入载体的多克隆位点即eGFP下游处，一方面能克服转基因沉默，另一方面还能介导外源基因在无选择压力的情况下在哺乳动物细胞中稳定、高效、持久的表达，且安全性较好。

公开(公告)号：CN106544362A

公开(公告)日：2017-03-29

申请号：CN201611111154.3

申请日：2016-12-06

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 赵春澎 ,  王天云 ,  王小引 ,  张玺 ,  徐光华 ,  付笑笑 ,  高向征 ,  白可可

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N2800/107 ,  C12N2830/40

Abstract: 本发明公开了一种基于cHS4元件的哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。鸡超敏感位点4(cHS4)是一种经典绝缘子元件，具有増强子阻断与异染色质屏障的功能，能将转基因沉默的主要原因-位置效应降到最低，还能降低外源启动子及增强子造成邻近基因异常表达的概率。本发明将cHS4序列引入载体的多克隆位点即eGFP下游处，一方面能克服转基因沉默，另一方面还能介导外源基因在无选择压力的情况下在哺乳动物细胞中稳定、高效、持久的表达，且安全性较好。

公开(公告)号：CN106497973A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201611019369.2

申请日：2016-11-18

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 王小引 ,  王天云 ,  张玺 ,  王俐 ,  李琴 ,  王芳 ,  张俊河 ,  林艳 ,  付笑笑

IPC: C12N15/85

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N2800/107

Abstract: 本发明公开了一种人类和其他哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。该附着体表达载体上插入有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的分段β-干扰素MAR序列(或者与该序列95％以上同源的核苷酸序列)，相较包含全长MAR序列或387bp MAR序列的表达载体，该载体能高效、持续、稳定地表达外源目的基因，尤其是包含E段MAR序列的载体表达最佳，可用于基因治疗。在该载体中，分段MAR序列插入载体的多克隆位点也即eGFP下游处，一方面能克服转基因沉默，另一方面能提高目的蛋白的表达水平以及后续单克隆细胞株筛选的有效性。