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公开(公告)号：CN111378688A
公开(公告)日：2020-07-07
申请号：CN202010196353.9
申请日：2020-03-19
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/866
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及人源Tsg101-Vps28-Vps37-Mvb12A四元复合物的制备方法及应用。通过分别针对人源Tsg101、Vps28、Vps37和Mvb12A设计截短体；获取组成人源ESCRT-I复合物的四种亚基的截短体编码序列片段；分别克隆至昆虫表达载体并转化DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid杆粒；将四种重组杆粒分别转染sf9昆虫细胞产生重组杆状病毒并扩增至P2代病毒储液，将四种P2代病毒等比例感染sf9细胞进行目的蛋白表达；经层析纯化获得人源ESCRT-I四元复合物。该复合物为解析ESCRT-I复合物结构及阐释ESCRT-I复合物介导膜出芽机制奠定基础。
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公开(公告)号：CN111154803B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202010026943.7
申请日：2020-01-10
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C07K14/03 , A61K39/245 , A61P31/22
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种重组EBV gHgL免疫原的制备方法及其应用。本发明利用聚合酶链式反应PCR技术，获得gH和gL的基因片段，将这两个目的片段分别克隆入昆虫表达载体pMT，经质粒大提去除内毒素后，与抗性筛选质粒pCoBlast一起共转染黑腹果蝇Schneider2细胞，用杀稻瘟菌素进行阳性克隆筛选，筛选出高效分泌表达gHgL的S2稳定细胞系。扩大培养后，经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析两步纯化，即可获得高均一、高产量、高天然保真性的gHgL。通过微量热涌动技术验证了gHgL与受体EphA2的相互作用，适合作为免疫原用于EBV亚单位疫苗以及与gB和gp350联合疫苗的研发。
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公开(公告)号：CN116473020A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202211447552.8
申请日：2022-11-18
Applicant: 新乡医学院
IPC: A01K67/027 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/12 , C12Q1/02 , A61K49/00
Abstract: 本发明属于动物模型构建技术领域，尤其涉及一种Macrosialin基因缺失动脉粥样硬化小鼠模型的构建方法及其应用。所述构建方法包括：将ApoE‑/‑基因型小鼠的Macrosialin基因敲除，获得ApoE‑/+Macrosialin‑/+基因型的F0代小鼠；将F0代小鼠与ApoE‑/‑基因型小鼠回交，筛选获得ApoE‑/‑Macrosialin‑/+基因型的F1代小鼠；将F1代小鼠自交，筛选获得ApoE‑/‑Macrosialin‑/‑基因型的F2代小鼠，经高脂饮食诱导获得动脉粥样硬化小鼠模型。本发明选取Macrosialin基因为靶点，利用CRISPR/Cas9系统敲除该基因，筛选获得Macrosialin和ApoE双等位基因均敲除的纯合子个体即动脉粥样硬化小鼠模型，其可正常繁育和哺乳且能稳定遗传，为研究Macrosialin基因在AS发生、发展中的作用及AS诊断治疗等提供了经济、稳定、便捷、高效的小鼠模型。
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公开(公告)号：CN116473020B
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202211447552.8
申请日：2022-11-18
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/113 , A01K67/027 , C12N9/22 , C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/12 , C12Q1/02 , A61K49/00
Abstract: 本发明属于动物模型构建技术领域，尤其涉及一种Macrosialin基因缺失动脉粥样硬化小鼠模型的构建方法及其应用。所述构建方法包括：将ApoE‑/‑基因型小鼠的Macrosialin基因敲除，获得ApoE‑/+Macrosialin‑/+基因型的F0代小鼠；将F0代小鼠与ApoE‑/‑基因型小鼠回交，筛选获得ApoE‑/‑Macrosialin‑/+基因型的F1代小鼠；将F1代小鼠自交，筛选获得ApoE‑/‑Macrosialin‑/‑基因型的F2代小鼠，经高脂饮食诱导获得动脉粥样硬化小鼠模型。本发明选取Macrosialin基因为靶点，利用CRISPR/Cas9系统敲除该基因，筛选获得Macrosialin和ApoE双等位基因均敲除的纯合子个体即动脉粥样硬化小鼠模型，其可正常繁育和哺乳且能稳定遗传，为研究Macrosialin基因在AS发生、发展中的作用及AS诊断治疗等提供了经济、稳定、便捷、高效的小鼠模型。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111778279B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202010658045.3
申请日：2020-07-09
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C12N15/62 , C12N15/10 , C12N15/07 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合模型、制备方法及应用。本申请中获得HTLV‑1 Env基因片段，并替换载体pSRHS‑Tat‑EnvHIV‑1的HIV‑1 Env基因中对应的gp145片段，转染效应细胞COS‑1，并与基因组中整合有LTR及其下游串联着的萤火虫荧光素酶报告基因的TZM‑bl细胞共培养；通过检测萤火虫荧光素酶的活性间接检测HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合能力。利用抑制多肽P‑400的对该融合系统进行验证，表明该系统非常适用于针对HTLV‑1病毒进入抑制剂的筛选和验证，以及对进入抑制剂有效浓度和毒性等指标进行评估。
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公开(公告)号：CN111378688B
公开(公告)日：2022-10-04
申请号：CN202010196353.9
申请日：2020-03-19
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/866
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及人源Tsg101‑Vps28‑Vps37‑Mvb12A四元复合物的制备方法及应用。通过分别针对人源Tsg101、Vps28、Vps37和Mvb12A设计截短体；获取组成人源ESCRT‑I复合物的四种亚基的截短体编码序列片段；分别克隆至昆虫表达载体并转化DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid杆粒；将四种重组杆粒分别转染sf9昆虫细胞产生重组杆状病毒并扩增至P2代病毒储液，将四种P2代病毒等比例感染sf9细胞进行目的蛋白表达；经层析纯化获得人源ESCRT‑I四元复合物。该复合物为解析ESCRT‑I复合物结构及阐释ESCRT‑I复合物介导膜出芽机制奠定基础。
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公开(公告)号：CN111778279A
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN202010658045.3
申请日：2020-07-09
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C12N15/62 , C12N15/10 , C12N15/07 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种HTLV-1 Env介导的细胞-细胞融合模型、制备方法及应用。本申请中获得HTLV-1 Env基因片段，并替换载体pSRHS-Tat-EnvHIV-1的HIV-1 Env基因中对应的gp145片段，转染效应细胞COS-1，并与基因组中整合有LTR及其下游串联着的萤火虫荧光素酶报告基因的TZM-bl细胞共培养；通过检测萤火虫荧光素酶的活性间接检测HTLV-1 Env介导的细胞-细胞融合能力。利用抑制多肽P-400的对该融合系统进行验证，表明该系统非常适用于针对HTLV-1病毒进入抑制剂的筛选和验证，以及对进入抑制剂有效浓度和毒性等指标进行评估。
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公开(公告)号：CN115043938B
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202210675885.X
申请日：2022-06-15
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本申请涉及免疫学领域和分子病毒学领域，特别是SARS‑CoV‑2及其突变株的诊断、预防和治疗领域。具体而言，本申请涉及抗SARS‑CoV‑2及其突变株的抗体或抗原结合片段，以及包含所述抗体的组合物(例如，诊断剂和治疗剂)。此外，本申请还涉及所述抗体或抗原结合片段的用途。本申请的抗体或抗原结合片段可用于诊断、预防和/或治疗SARS‑CoV‑2及其突变株感染和/或由所述感染引起的疾病。
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公开(公告)号：CN111154803A
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN202010026943.7
申请日：2020-01-10
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C07K14/03 , A61K39/245 , A61P31/22
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种重组EBV gHgL免疫原的制备方法及其应用。本发明利用聚合酶链式反应PCR技术，获得gH和gL的基因片段，将这两个目的片段分别克隆入昆虫表达载体pMT，经质粒大提去除内毒素后，与抗性筛选质粒pCoBlast一起共转染黑腹果蝇Schneider2细胞，用杀稻瘟菌素进行阳性克隆筛选，筛选出高效分泌表达gHgL的S2稳定细胞系。扩大培养后，经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析两步纯化，即可获得高均一、高产量、高天然保真性的gHgL。通过微量热涌动技术验证了gHgL与受体EphA2的相互作用，适合作为免疫原用于EBV亚单位疫苗以及与gB和gp350联合疫苗的研发。
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