公开(公告)号：CN111154803B

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202010026943.7

申请日：2020-01-10

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 段良伟 ,  王辉 ,  郑前前 ,  牛玉娜 ,  牛志国 ,  张佳璐 ,  刘梦楠

IPC: C12N15/85 ,  C07K14/03 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种重组EBV gHgL免疫原的制备方法及其应用。本发明利用聚合酶链式反应PCR技术，获得gH和gL的基因片段，将这两个目的片段分别克隆入昆虫表达载体pMT，经质粒大提去除内毒素后，与抗性筛选质粒pCoBlast一起共转染黑腹果蝇Schneider2细胞，用杀稻瘟菌素进行阳性克隆筛选，筛选出高效分泌表达gHgL的S2稳定细胞系。扩大培养后，经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析两步纯化，即可获得高均一、高产量、高天然保真性的gHgL。通过微量热涌动技术验证了gHgL与受体EphA2的相互作用，适合作为免疫原用于EBV亚单位疫苗以及与gB和gp350联合疫苗的研发。

公开(公告)号：CN111154803A

公开(公告)日：2020-05-15

申请号：CN202010026943.7

申请日：2020-01-10

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 段良伟 ,  王辉 ,  郑前前 ,  牛玉娜 ,  牛志国 ,  张佳璐 ,  刘梦楠

IPC: C12N15/85 ,  C07K14/03 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种重组EBV gHgL免疫原的制备方法及其应用。本发明利用聚合酶链式反应PCR技术，获得gH和gL的基因片段，将这两个目的片段分别克隆入昆虫表达载体pMT，经质粒大提去除内毒素后，与抗性筛选质粒pCoBlast一起共转染黑腹果蝇Schneider2细胞，用杀稻瘟菌素进行阳性克隆筛选，筛选出高效分泌表达gHgL的S2稳定细胞系。扩大培养后，经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析两步纯化，即可获得高均一、高产量、高天然保真性的gHgL。通过微量热涌动技术验证了gHgL与受体EphA2的相互作用，适合作为免疫原用于EBV亚单位疫苗以及与gB和gp350联合疫苗的研发。

公开(公告)号：CN111778279B

公开(公告)日：2023-04-28

申请号：CN202010658045.3

申请日：2020-07-09

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 段良伟 ,  王辉 ,  郑前前 ,  张赟 ,  牛玉娜 ,  张阳

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/62 ,  C12N15/10 ,  C12N15/07 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合模型、制备方法及应用。本申请中获得HTLV‑1 Env基因片段，并替换载体pSRHS‑Tat‑EnvHIV‑1的HIV‑1 Env基因中对应的gp145片段，转染效应细胞COS‑1，并与基因组中整合有LTR及其下游串联着的萤火虫荧光素酶报告基因的TZM‑bl细胞共培养；通过检测萤火虫荧光素酶的活性间接检测HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合能力。利用抑制多肽P‑400的对该融合系统进行验证，表明该系统非常适用于针对HTLV‑1病毒进入抑制剂的筛选和验证，以及对进入抑制剂有效浓度和毒性等指标进行评估。

公开(公告)号：CN111778279A

公开(公告)日：2020-10-16

申请号：CN202010658045.3

申请日：2020-07-09

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 段良伟 ,  王辉 ,  郑倩倩 ,  张赟 ,  牛玉娜 ,  张阳

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/62 ,  C12N15/10 ,  C12N15/07 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种HTLV-1 Env介导的细胞-细胞融合模型、制备方法及应用。本申请中获得HTLV-1 Env基因片段，并替换载体pSRHS-Tat-EnvHIV-1的HIV-1 Env基因中对应的gp145片段，转染效应细胞COS-1，并与基因组中整合有LTR及其下游串联着的萤火虫荧光素酶报告基因的TZM-bl细胞共培养；通过检测萤火虫荧光素酶的活性间接检测HTLV-1 Env介导的细胞-细胞融合能力。利用抑制多肽P-400的对该融合系统进行验证，表明该系统非常适用于针对HTLV-1病毒进入抑制剂的筛选和验证，以及对进入抑制剂有效浓度和毒性等指标进行评估。

公开(公告)号：CN110079310A

公开(公告)日：2019-08-02

申请号：CN201910350010.0

申请日：2019-04-28

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 张轶 ,  孙瑞利 ,  朱琳琳 ,  牛玉娜 ,  杨雪 ,  张涛

IPC: C09K11/65 ,  B82Y20/00 ,  B82Y40/00

Abstract: 本发明公开了一种以水产品废弃物为前驱物制备高荧光量子产率碳量子点的方法，将水产品废弃物粉末转移至石英方舟中，再置于管式炉中在氩气氛围下于100～500℃加热碳化反应1～20h，反应结束后自然冷却得到黑色粉末，将黑色粉末分散于去离子水中并超声充分溶解得到深棕色溶液，用孔径为0.2μm的滤膜抽滤去除不溶性黑色沉淀，离心去除大颗粒沉淀后将上清液注入透析袋中进行透析，将透析产物进行旋转蒸发得到浓缩溶液，最后将浓缩溶液进行冷冻干燥得到粉末状碳量子点。本发明所制备的碳量子点荧光量子产率较高，在最优条件下可达到26.9％，且细胞毒性小，具有良好的生物相容性，扩大了碳量子点在各个领域中的应用。