公开(公告)号：KR101303990B1

公开(公告)日：2013-10-15

申请号：KR1020120035330

申请日：2012-04-05

Applicant: 성균관대학교산학협력단

Inventor： 권석태 ,  편혜우 ,  김인혜 ,  조성숙

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21

Abstract: PURPOSE: Thermococcus pacificus DNA polymerase variant is provided to be used in a various way such as gene diagnosis and PCR reaction thanks to being high in DNA amplification and amplification speed during PCR. CONSTITUTION: DNA polymerase comprises amino acid sequences chosen from a group comprised of sequence number 9, 10 and 11. A recombinant vector comprises amino acid sequence coding the amino acid sequences above. A host cell is transformed into the recombinant vector. The method of manufacturing DNA polymerase comprises the following steps. A recombinant vector which comprises base sequence s coding the amino acid is manufactured. The recombinant vector is transformed into a host cell. The transformed cell is cultivated. Protein from the transformed cell is collected.

Abstract translation: 目的：由于DNA扩增和PCR扩增速度高，提供了以多种方式进行基因诊断和PCR反应的太平洋热带球菌DNA聚合酶变体。 构成：DNA聚合酶包含选自序列号9,10和11的氨基酸序列。重组载体包含编码上述氨基酸序列的氨基酸序列。 将宿主细胞转化入重组载体。 制备DNA聚合酶的方法包括以下步骤。 制备包含编码氨基酸的碱基序列的重组载体。 将重组载体转化到宿主细胞中。 转化的细胞被培养。 收集来自转化细胞的蛋白质。

公开(公告)号：KR101230362B1

公开(公告)日：2013-02-15

申请号：KR1020100119895

申请日：2010-11-29

Applicant: 성균관대학교산학협력단

Inventor： 권석태 ,  조성숙 ,  송재근 ,  김인혜 ,  이강근 ,  윤만희

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/10

CPC classification number: C12Q1/6848 ,  C12Q2521/101 ,  C12Q2527/101 ,  C12Q2539/105 ,  C12Q2549/101

Abstract: 본 발명은, 인테인이 포함된
Neq L 대단편과
Neq S 소단편의 단백질 트랜스 스플라이싱을 기반으로 한 핫-스타트 PCR 수행방법에 대한 것이다. 구체적으로 본 발명은, 샘플 DNA 및 프라이머를 포함하는 PCR 반응 용액을 준비하고; 579번에서 676번까지의 인테인 아미노산 서열을 포함하는 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어지는
Neq 대단편과, 1번에서 30번까지의 인테인 아미노산 서열을 포함하는 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어지는
Neq 소단편을 상기 PCR 반응 용액에 함께 첨가하고; 상기 PCR 반응 용액 내의 상기
Neq L 대단편과
Neq S 소단편의 단백질 트랜스 스플라이싱 과정을 통해
Neq DNA 중합효소 활성을 가지는 폴리펩타이드를 형성하고; 그리고 일련의 DNA 변성, 프라이머 어닐링 및 신장 단계를 포함하는 핫-스타트 PCR 수행방법에 관한 것이다.

公开(公告)号：KR1020120058214A

公开(公告)日：2012-06-07

申请号：KR1020100119895

申请日：2010-11-29

Applicant: 성균관대학교산학협력단

Inventor： 권석태 ,  조성숙 ,  송재근 ,  김인혜 ,  이강근 ,  윤만희

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/10

CPC classification number: C12Q1/6848 ,  C12Q2521/101 ,  C12Q2527/101 ,  C12Q2539/105 ,  C12Q2549/101 ,  C12Q1/6851

Abstract: PURPOSE: A hot-start PCR method based on protein trans-splicing of Neq L fragment and Neq S fragment is provided to be used in a technique of preventing carryover contamination. CONSTITUTION: A hot-start PCR method based on protein trans-splicing of NeqL fragment and NeqS fragment containing intein comprises: a step of preparing a PCR reaction solution; a step of adding the NeqL fragment and NeqS fragment; a step of performing trans-splicing to form a polypeptide with NeqDNA polymerase activity; and a step of performing DNA denaturation, primer annealing, and elongation.

Abstract translation: 目的：提供一种基于Neq L片段和Neq S片段的蛋白质转录的热启动PCR方法，用于防止携带污染的技术。 构成：基于NeqL片段的蛋白质翻译和含有内含肽的NeqS片段的热启动PCR方法包括：制备PCR反应溶液的步骤; 添加NeqL片段和NeqS片段的步骤; 进行转拼以形成具有NeqDNA聚合酶活性的多肽的步骤; 以及进行DNA变性，引物退火和伸长的步骤。