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公开(公告)号:CN111235172B
公开(公告)日:2021-10-19
申请号:CN202010113295.9
申请日:2020-02-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统,该报告系统包括源自pFLX107的pUC复制子,Cat基因,rrnbT1T2,lambda t0转录终止子,源自质粒pRCL且内部ClaI、SacI和NdeI位点被沉默突变的lacZ基因。本发明还公开原核启动子报告系统的构建方法及应用。本发明构建的质粒pFGH06大小为4949bp,28℃培养条件下的背景活性仅为12.2±0.6,极显著低于低拷贝参考质粒pRCL的背景活性21.3±1.7,并应用于诱导型启动子araBAD和组成型启动子rpsM的克隆及活性测定,在模拟应用于启动子筛选时,可通过蓝白斑筛选实现对目标启动子的100%识别。
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公开(公告)号:CN104774932A
公开(公告)日:2015-07-15
申请号:CN201510133034.2
申请日:2015-03-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用于判定大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药水平的引物、探针和分子检测试剂盒。本发明的试剂盒可快速、敏感、准确判断大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药水平,特异性扩增大肠杆菌的核酸,而不扩增其它细菌、病毒、寄生虫、植物、动物等的核酸,并且可应用于多种组织器官与物种来源的临床样本,无需细菌分离纯化,本发明能够为疾病的及时治疗及合理用药提供参考,为耐药机制的研究提供技术支持。
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公开(公告)号:CN103820571A
公开(公告)日:2014-05-28
申请号:CN201310727102.9
申请日:2013-12-25
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明涉及一种用于甲型流感病毒一步反转录定量PCR检测方法的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ?ID?NO.1和2所示,所述探针为SEQ?ID?NO.3和4。采用上述引物和探针可通过一步法FRET-PCR技术对甲型流感病毒进行检测。多数现有的检测流感病毒的技术为二步法,包括以随机引物介导的反转录(第一步)和随后的PCR(第二步)。此法使用随机引物,会产生大量的背景核酸,降低反转录效率,同时产生的背景核酸会降低PCR的效率。一步法基于特异引物的反转录系统,效率高,易操作,减少污染机会,从而极大提高了PCR的扩增效率。
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公开(公告)号:CN103820571B
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201310727102.9
申请日:2013-12-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用于甲型流感病毒一步反转录定量PCR检测方法的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ ID NO.1和2所示,所述探针为SEQ ID NO.3和4。采用上述引物和探针可通过一步法FRET-PCR技术对甲型流感病毒进行检测。多数现有的检测流感病毒的技术为二步法,包括以随机引物介导的反转录(第一步)和随后的PCR(第二步)。此法使用随机引物,会产生大量的背景核酸,降低反转录效率,同时产生的背景核酸会降低PCR的效率。一步法基于特异引物的反转录系统,效率高,易操作,减少污染机会,从而极大提高了PCR的扩增效率。
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公开(公告)号:CN104611441A
公开(公告)日:2015-05-13
申请号:CN201510056721.9
申请日:2015-02-03
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种检测所有11种衣原体的定量PCR的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ ID NO.1、2、3所示,所述探针1如SEQ ID NO.4、5、6所示,将上述引物和探针与PCR反应液组成定量PCR检测试剂盒。本发明根据衣原体23S rRNA基因的保守区域设计引物(2条上游引物和1条针对所有11种衣原体的下游引物)和探针(3条探针)。巧妙地设计PCR的引物和探针,可以特异地扩增所有11种衣原体的核酸,并可依据熔解曲线Tm值分型,适用于大量临床样品的检测。
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公开(公告)号:CN119286902A
公开(公告)日:2025-01-10
申请号:CN202411401105.8
申请日:2024-10-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种基于染色体诱导裂解系统的鮰爱德华菌菌蜕制备突变株及其构建方法和应用,属于生物工程领域。本发明将鮰爱德华菌酰基高丝氨酸内酯合成酶基因LuxI的106‑565bp序列缺失,在此区间插入裂解基因E及其阿拉伯糖诱导控制单元,构建出基于染色体诱导裂解系统的鮰爱德华菌菌蜕制备突变株,本发明构建成功的鮰爱德华菌突变株YCH‑BG不仅避免了温控裂解系统的使用,同时溶菌效果更为稳定,溶菌率达99.995%。与野生株相比,突变株形态和生理生化特征相同,生长曲线未见明显差异,但毒力显著下降,可以用于高效安全菌蜕疫苗的制备。
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公开(公告)号:CN104611441B
公开(公告)日:2016-02-24
申请号:CN201510056721.9
申请日:2015-02-03
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种检测所有11种衣原体的定量PCR的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ ID NO.1、2、3所示,所述探针1如SEQ ID NO.4、5、6所示,将上述引物和探针与PCR反应液组成定量PCR检测试剂盒。本发明根据衣原体23S rRNA基因的保守区域设计引物(2条上游引物和1条针对所有11种衣原体的下游引物)和探针(3条探针)。巧妙地设计PCR的引物和探针,可以特异地扩增所有11种衣原体的核酸,并可依据熔解曲线Tm值分型,适用于大量临床样品的检测。
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公开(公告)号:CN111235172A
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN202010113295.9
申请日:2020-02-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统,该报告系统包括源自pFLX107的pUC复制子,Cat基因,rrnbT1T2,lambda t0转录终止子,源自质粒pRCL且内部ClaI、SacI和NdeI位点被沉默突变的lacZ基因。本发明还公开原核启动子报告系统的构建方法及应用。本发明构建的质粒pFGH06大小为4949bp,28℃培养条件下的背景活性仅为12.2±0.6,极显著低于低拷贝参考质粒pRCL的背景活性21.3±1.7,并应用于诱导型启动子araBAD和组成型启动子rpsM的克隆及活性测定,在模拟应用于启动子筛选时,可通过蓝白斑筛选实现对目标启动子的100%识别。
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