-
公开(公告)号：CN112795526A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110156063.6
申请日：2021-02-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种合成α‑熊果苷的枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用，本发明提供了能稳定且高效生产α‑熊果苷的基因工程菌株的构建方法，通过引入蔗糖磷酸化酶的优化的RBSopt序列，并将蔗糖磷酸化酶的表达框整合至基因组上，显著提高了α‑熊果苷在胞外的积累量，最高浓度可达119.44g/L，底物HQ的摩尔转化率为96.56％，为实现α‑熊果苷的工业化生产奠定了基础。本发明提供的重组枯草芽孢杆菌的构建方法简便易行，菌株构建完成后生产性能稳定，具有很好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN109182235B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201810992061.9
申请日：2018-08-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种可静态和动态调控枯草芽孢杆菌目的蛋白表达量的N端序列元件及应用，属于基因工程领域。本发明是以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为表达宿主，通过在目的蛋白编码基因前添加内源性蛋白N端编码前15个氨基酸的核酸序列，并在质粒中游离表达，使得枯草芽孢杆菌目的蛋白的表达实现在不同生长阶段的表达差异调控与表达量的调控。其中调控的类型包括：生长偶联型(等NHbs等)、迟滞表达型(NPdhD等)、持续表达型(NGlnA等)、强烈抑制型(NSat等)。同时，通过调控，使得目的蛋白相对表达量跨越四个数量级，为枯草芽孢杆菌目的蛋白高效表达和基因工程改造奠定了基础。
-
公开(公告)号：CN108330095B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201810171868.6
申请日：2018-03-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种积累N‑乙酰神经氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及其应用，属于遗传工程领域。本发明以谷氨酸棒杆菌作为表达宿主，通过过量表达氨糖‑果糖‑6磷酸氨基转移酶基因、氨基葡萄糖乙酰化酶编码基因、磷酸酶编码基因、乙酰氨基葡萄糖异构酶编码基因和N‑乙酰神经氨酸合酶编码基因，加强了N‑乙酰神经氨酸合成途径；并通过敲除谷氨酸棒杆菌中N‑乙酰神经氨酸转运蛋白编码基因和胞内N‑乙酰神经氨酸分解利用代谢途径上的相关基因，得到了胞外积累N‑乙酰神经氨酸的谷氨酸棒杆菌基因工程菌，产量达到110mg/L，为进一步代谢工程改造谷氨酸棒杆菌生产N‑乙酰神经氨酸奠定了基础。
-
公开(公告)号：CN111471635A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010284509.9
申请日：2020-04-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高枯草芽孢杆菌核酸含量的方法，属于基因工程领域。本发明通过敲除ATP结合蛋白基因oppD、鞭毛钩帽组件蛋白基因flgD和鞭毛蛋白基因Hag，并结合在特定筛选压力下的适应性进化方法，获得比生长速率提高的菌株，使枯草芽孢杆菌的生长速率提高24.18～75.05％甚至更高，并使核酸含量提高10.31～37.56％甚至更高。本发明的方法可缩短菌株的发酵周期，提高核糖核酸的生产力，并有助于提高市场竞争力。
-
公开(公告)号：CN110129354A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910382139.X
申请日：2019-05-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种N-乙酰神经氨酸的特异性生物传感器及其应用，属于遗传工程领域。本发明以来源于大肠杆菌(Escherichia coli K 12)的转录调控因子NanR，GFP基因为报告基因构建了N-乙酰神经氨酸特异性的生物传感器，并建立了N-乙酰神经氨酸与荧光强度的有效关系。该生物反应器在筛选产目的代谢产物的微生物方面具有重要的应用前景。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110066801A
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201910358649.3
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N1/21 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌中唾液酸诱导表达元件及构建方法，属于遗传工程领域。本发明以pHT质粒为载体，在枯草芽孢杆菌中，PydjO启动子表达转录调控蛋白NanR，进一步在强启动子Pveg中整合NanR识别结合序列，并关联绿色荧光蛋白GFP，在发酵培养基中添加唾液酸进行发酵验证，成功构建枯草芽孢杆菌中唾液酸诱导表达元件，使其诱导表达强度达到4000a.u.，在不添加唾液酸的情况下，泄漏量为10％，为进一步优化枯草芽孢杆菌中唾液酸诱导表达元件奠定了基础。
-
公开(公告)号：CN109971696A
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201910212743.8
申请日：2019-03-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种全细胞转化法高产N‑乙酰神经氨酸的重组菌及应用，属于遗传工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌作为表达宿主，过量表达来源于鱼腥藻的N‑乙酰氨基葡萄糖异构酶(AGE)和来源于溶血性葡萄球菌的N‑乙酰神经氨酸醛缩酶(ShNanA)，并将基因tufA的N末端编码序列进一步融合到ShNanA编码序列的5'‑末端，通过敲除生成副产物乙偶姻的相关基因alsS和alsD基因，得到一株高产N‑乙酰神经氨酸的重组枯草芽孢杆菌，能够全细胞转化生产N‑乙酰神经氨酸，产量达93.78g/L，N‑乙酰氨基葡萄糖的摩尔转化率为50.54％，为枯草芽孢杆菌工程化生产N‑乙酰神经氨酸奠定了基础。
-
公开(公告)号：CN119979588A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202411961026.2
申请日：2024-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降低副产物的甾醇C24‑还原酶突变体及产7‑脱氢胆固醇的酿酒酵母，属于生物技术领域。本发明为了解决目前7‑DHC合成过程中，由于关键酶DHCR24底物谱广而导致副产物产生和催化活性低的问题，通过酶工程改造探究，对DHCR24第162位的亮氨酸和386位的天冬氨酸进行突变，获得一种甾醇C24‑还原酶突变体DHCR24M。将该突变体导入酿酒酵母出发菌株中，经过发酵验证发现，相对于未突变菌株，突变菌株的副产物cholest‑7‑en‑3‑ol和cholesta‑5,7‑dien‑3‑ol分别降低31.5％和46.1％，目标产物提升90.2％，为工业生产7‑脱氢胆固醇和活性维生素D3提供新的思路和方法，具有十分广阔的应用前景。
-
公开(公告)号：CN119876078A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202411890792.4
申请日：2024-12-20
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/12 , C12N15/70 , C12N15/81 , C12Q1/04 , C07K14/395 , C12N15/31 , C12N1/19 , C12R1/865 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种基于T7RNA聚合酶突变体的连续进化系统及其应用，属于进化工程技术领域。本发明以拥有合成单链DNA能力的T7RNA聚合酶突变体为基础，构建包含单链DNA合成模板和T7RNA聚合酶突变体的连续进化系统，将连续进化系统导入宿主，T7RNA聚合酶突变体通过合成单链DNA与目的基因发生重组，使宿主在连续传代的过程中构建得到突变体文库，对宿主施加筛选压力，宿主实现连续进化。应用该系统在7天内完成了对四环素外排泵蛋白的进化，在24小时内修复了酿酒酵母的色氨酸缺陷，筛选得到的四环素外排泵蛋白突变体能够耐受四环素和替加环素，对替加环素的耐受上升了8倍，对四环素的耐受上升了2倍，对提升细胞工厂性能具有重要意义。
-
公开(公告)号：CN119592645A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411740268.9
申请日：2024-11-29
IPC: C12P19/26 , C12N1/21 , C12N15/54 , C12N9/12 , C12N15/31 , C07K14/21 , C12N15/70 , C12N15/90 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于人工双碳源的N‑乙酰神经氨酸的生产方法，属于基因工程技术领域。本发明以甘油为碳源高产N‑乙酰神经氨酸的大肠杆菌为出发菌株，通过敲除6‑磷酸果糖激酶，敲除甘油激酶引入甘油激酶突变体，用葡萄糖促进扩散转运蛋白替换PTS磷酸转移酶I并进行启动子优化，使重组大肠杆菌可以葡萄糖和甘油双碳源生长、合成N‑乙酰神经氨酸，使孔板水平下的产量达到9.2g/L，同时乙酸生成量极低，为N‑乙酰神经氨酸的大规模生产提供了一种新的方向。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
252
records
(took 0.042 seconds)
