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公开(公告)号:CN109825489A
公开(公告)日:2019-05-31
申请号:CN201910249596.1
申请日:2019-03-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的β-淀粉酶及其应用,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的β-淀粉酶具有高分泌能力,将携带本发明β-淀粉酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h,可使发酵上清液中的β-淀粉酶酶活高达434.65U/mL,将携带本发明β-淀粉酶的大肠杆菌在3L发酵罐中诱导培养30h,可使发酵上清液中的β-淀粉酶酶活高达13063.8U/mL,因此,本发明的β-淀粉酶适用于大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN107760623B
公开(公告)日:2018-12-18
申请号:CN201711081504.0
申请日:2017-11-07
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N1/20 , C12N9/26 , A23L33/135 , A23K10/16 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一株产中性生淀粉酶的阿氏芽孢杆菌,属于生物工程技术领域。所述高产中性生淀粉酶的野生芽孢杆菌菌株筛选自广西木薯田浅层土壤。本发明所述菌株保藏在湖北省武汉市武汉大学中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC M 2017320。该菌株培养条件简便,发酵周期短,酶活力高;所产生淀粉酶为中温、中性酶,最适温度和最适pH分布为50℃和7.0,水解生淀粉能力强,产物以麦芽糖为主。在淀粉糖、发酵、食品和饲料等工业领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN108865962A
公开(公告)日:2018-11-23
申请号:CN201810745221.X
申请日:2018-07-09
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12N9/1048 , C12N15/70 , C12P19/04 , C12Y204/00
Abstract: 本发明公开了一种可高效可溶性表达4‑α‑糖基转移酶的大肠杆菌工程菌,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的工程菌以pETduet‑1载体或pET24a(+)载体为表达载体,以E.coli BL21(DE3)菌株为表达宿主菌株,同时表达来源于嗜热高温球菌(Thermococcus litoralis)的4‑α‑糖基转移酶以及分子伴侣蛋白GroES‑GroEL;将本发明的工程菌发酵培养24h,得到的发酵液中的酶活可高达82.2U/mL。
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公开(公告)号:CN110343687B
公开(公告)日:2023-05-09
申请号:CN201910650235.8
申请日:2019-07-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高,将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h,即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL‑1,是野生型的2.3倍;将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑117的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h,即可使发酵液上清液中的胞外酶活达49.6U·mL‑1,是野生型的2.9倍。
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公开(公告)号:CN110343687A
公开(公告)日:2019-10-18
申请号:CN201910650235.8
申请日:2019-07-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高,将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd-306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h,即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL-1,是野生型的2.3倍;将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd-117的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h,即可使发酵液上清液中的胞外酶活达49.6U·mL-1,是野生型的2.9倍。
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公开(公告)号:CN108642125A
公开(公告)日:2018-10-12
申请号:CN201810441370.7
申请日:2018-05-10
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于微孔板的肌醇定量检测方法,属于微生物检测领域。本发明包括以下步骤:A.将检测用菌复苏复苏菌种;B.将复苏斜面菌种利用0.9%的无菌生理盐水洗下,离心收集细胞再用0.9%的无菌盐水悬浮细胞,震荡混匀制备成菌基液;C.选取适量的菌基液利用0.9%的无菌盐水进行稀释,控制菌悬液浓度的吸光值在0.1~0.3之间,即为接种菌悬液;D.将肌醇标准溶液或待检测的样品溶液和无菌水按照一定比例加入微孔板中,再补充肌醇测定培养基;E.将接种菌悬液接种至微孔板中,并置于高速震荡摇床中,震荡培养14~17h;F.培养结束后利用酶标仪测定微孔板中菌液吸光值,绘制肌醇标准曲线并计算样品中的肌醇含量。本发明具有成本低、操作简单、检测时间短和通量大等特点。
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公开(公告)号:CN107760623A
公开(公告)日:2018-03-06
申请号:CN201711081504.0
申请日:2017-11-07
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N1/20 , C12N9/26 , A23L33/135 , A23K10/16 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一株产中性生淀粉酶的阿氏芽孢杆菌,属于生物工程技术领域。所述高产中性生淀粉酶的野生芽孢杆菌菌株筛选自广西木薯田浅层土壤。本发明所述菌株保藏在湖北省武汉市武汉大学中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC M 2017320。该菌株培养条件简便,发酵周期短,酶活力高;所产生淀粉酶为中温、中性酶,最适温度和最适pH分布为50℃和7.0,水解生淀粉能力强,产物以麦芽糖为主。在淀粉糖、发酵、食品和饲料等工业领域具有广阔的应用前景。
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