公开(公告)号：CN105238826A

公开(公告)日：2016-01-13

申请号：CN201510812991.8

申请日：2015-11-20

Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 ,  南京林业大学

Inventor： 萧伟 ,  赵林果 ,  王振中 ,  裴建军 ,  李石平 ,  赵祎武 ,  黄文哲 ,  温建辉

IPC: C12P17/06

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及β-葡萄糖苷酶的用途及用其制备黄芩素的方法。所述β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还提供了酶水解黄芩苷的方法，将一种耐热耐糖β-葡萄糖苷酶固定化后在缓冲溶液中将黄芩苷水解，获得黄芩素。该酶具有很强的产物耐受性，无需在双相体系中就能将黄芩苷水解完全，避免了双相体系中的有机溶剂使酶活力下降。固定化酶可以多次利用。本发明得到纯度较高的黄芩素，纯度在95％以上。本发明所述的方法中乙酸乙酯萃取得到黄芩素后，可用有机溶剂重结晶，得到高纯度的黄芩素，纯度在98％以上。

公开(公告)号：CN104651336A

公开(公告)日：2015-05-27

申请号：CN201510053105.8

申请日：2015-02-02

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  解静聪 ,  赵东霞 ,  萧伟 ,  丁岗 ,  王振中

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12P33/20

CPC classification number: C12N9/2402 ,  C12P33/005 ,  C12P33/20 ,  C12Y302/01055

Abstract: α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶及其在制备人参皂苷Rd中的应用，属于基因工程技术及生物医药领域，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶对人参皂苷Rc的转化能力强，本发明所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶与人参皂苷Rc孵育一定时间后经检测，人参皂苷Rc几乎完全转化为人参皂苷Rd。本发明所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶对阿拉伯糖具有较高的耐受能力，且不被葡萄糖反馈抑制。

公开(公告)号：CN117187216A

公开(公告)日：2023-12-08

申请号：CN202311263540.4

申请日：2023-09-27

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  张珊珊 ,  张洋洋 ,  王振中 ,  王小宇 ,  刘栋

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12P19/60

Abstract: 本发明公开了一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从Dictyoglomus thermophilum DSM 3960基因组中克隆得到一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，与现有技术相比，本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha具有优良的耐热性能，对耐热的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha进行耐糖关键位点突变，获得的新型α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha耐糖突变体，其耐糖系数提高了2.3倍以上，该突变体能够特异性水解淫羊藿苷的R2位上通过α‑1糖苷键连接的鼠李糖，能够利用突变体高效转化淫羊藿苷生成淫羊藿次苷I。

公开(公告)号：CN107641621A

公开(公告)日：2018-01-30

申请号：CN201710448315.6

申请日：2017-06-14

Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 ,  南京林业大学

Inventor： 萧伟 ,  赵林果 ,  葛林 ,  丁岗 ,  裴建军 ,  王振中

IPC: C12N9/24 ,  C12N9/42 ,  C12P17/06

Abstract: 本发明涉及酶工程及生物医药技术领域，尤其涉及一种糖苷酶组合物及酶法制备淫羊藿苷元的方法。本发明筛选获得了一种能有效降解淫羊藿苷母核结构上鼠李糖残基的α-L-鼠李糖苷酶及能高效降解其母核结构中葡萄糖残基耐高温β-葡萄糖苷酶，随后通过双酶转化高效制备具有完全保持原有生物活性的淫羊藿苷元。本发明提供的组合物中，两种糖苷酶的最适反应温度都较高，底物溶解性较好，不需要助溶剂；并且酶解时间短，得率高。实验表明，采用本发明提供的糖苷酶组合物对淫羊藿苷进行酶解，摩尔转化率为98.3％，淫羊藿苷元的得率为90％。

公开(公告)号：CN104328098A

公开(公告)日：2015-02-04

申请号：CN201410510836.6

申请日：2014-09-28

Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 ,  南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  萧伟 ,  裴建军 ,  丁岗 ,  解静聪 ,  王振中

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12P33/20

CPC classification number: C12N9/2445 ,  C12P33/005 ,  C12P33/20 ,  C12Y302/01021

Abstract: 本发明属于基因工程技术及生物医药领域，具体涉及一种β-葡萄糖苷酶及其制备方法与应用，尤其是应用于酶法转化制备人参皂苷20(S)-Rg3的应用。本发明所述β-葡萄糖苷酶能耐受高温，在70℃下保温3h酶活力几乎不变；本发明所述β-葡萄糖苷酶对人参皂苷Rb1的转化能力强，本发明所述β-葡萄糖苷酶与人参皂苷Rb1孵育60min，人参皂苷Rb1几乎完全转化为人参皂苷20(S)-Rg3；本发明所述制备人参皂苷20(S)-Rg3的方法酶促转化反应中间产物少，转化后产物人参皂苷20(S)-Rg3纯度高。