公开(公告)号：CN117187216A

公开(公告)日：2023-12-08

申请号：CN202311263540.4

申请日：2023-09-27

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  张珊珊 ,  张洋洋 ,  王振中 ,  王小宇 ,  刘栋

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12P19/60

Abstract: 本发明公开了一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从Dictyoglomus thermophilum DSM 3960基因组中克隆得到一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，与现有技术相比，本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha具有优良的耐热性能，对耐热的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha进行耐糖关键位点突变，获得的新型α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha耐糖突变体，其耐糖系数提高了2.3倍以上，该突变体能够特异性水解淫羊藿苷的R2位上通过α‑1糖苷键连接的鼠李糖，能够利用突变体高效转化淫羊藿苷生成淫羊藿次苷I。

公开(公告)号：CN117187216B

公开(公告)日：2025-04-08

申请号：CN202311263540.4

申请日：2023-09-27

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  张珊珊 ,  张洋洋 ,  王振中 ,  王小宇 ,  刘栋

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12P19/60

Abstract: 本发明公开了一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从Dictyoglomus thermophilum DSM 3960基因组中克隆得到一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，与现有技术相比，本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha具有优良的耐热性能，对耐热的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha进行耐糖关键位点突变，获得的新型α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha耐糖突变体，其耐糖系数提高了2.3倍以上，该突变体能够特异性水解淫羊藿苷的R2位上通过α‑1糖苷键连接的鼠李糖，能够利用突变体高效转化淫羊藿苷生成淫羊藿次苷I。

公开(公告)号：CN117247979A

公开(公告)日：2023-12-19

申请号：CN202311225587.1

申请日：2023-09-21

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  卢姗 ,  张洋洋 ,  王振中 ,  吴懿 ,  刘栋

IPC: C12P17/06 ,  C12N11/089 ,  C12N11/14 ,  C12N9/24 ,  C12N9/42

Abstract: 本发明公开了一种双固定化酶联用制备淫羊藿素的方法，属于酶工程和生物工程技术领域。包括在缓冲体系中，将第一固定化酶与底物淫羊藿总黄酮反应；反应后移除第一固定化酶，并加入第二固定化酶继续反应，得到淫羊藿素；其中，所述第一固定化酶为α‑L‑鼠李糖苷酶DtRha与环氧基树脂载体通过共价键连接得到；所述固定化酶为多功能糖苷酶Tpebgl3由连接肽介导与沸石载体通过特异性吸附连接得到。本发明实现了将淫羊藿总黄酮全部转化为淫羊藿苷元，本发明大大缩短了淫羊藿苷元的制备工艺，提高了生产效率；且反应过程中不需要添加强还原剂、氧化剂及强酸等试剂，降低了环境污染，适宜于工业化生产。

公开(公告)号：CN117210449A

公开(公告)日：2023-12-12

申请号：CN202311263539.1

申请日：2023-09-27

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  许锦 ,  张洋洋 ,  刘栋 ,  王振中

IPC: C12N11/089 ,  C12N9/24 ,  C12P19/60

Abstract: 本发明公开了一种固定化α‑L‑鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，固定化α‑L‑鼠李糖苷酶包括环氧树脂载体和α‑L‑鼠李糖苷酶，所述α‑L‑鼠李糖苷酶与所述环氧树脂载体通过共价键连接；所述α‑L‑鼠李糖苷酶为粗酶；所述环氧树脂载体为ES‑107T或EG‑1环氧树脂。本发明通过固定化α‑L‑鼠李糖苷酶和β‑葡萄糖苷酶两个酶的联用，实现直接从淫羊藿总黄酮到淫羊藿苷元的转化，本发明大大缩短了淫羊藿苷元的制备工艺，提高了生产效率；且反应过程中不需要添加强还原剂、氧化剂及强酸等试剂，降低了环境污染，适宜于工业化生产。