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公开(公告)号：CN107384896B
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN201710685211.7
申请日：2017-08-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种制备稀有人参皂苷的酶组合物及其应用，应用于转化多组分人参皂苷制备人参皂苷C‑K等稀有人参皂苷。其特征在于一种嗜热菌来源能够一次性切除人参皂苷母核3位上两个糖基的β‑葡萄糖苷酶，获得稀有组分C‑Y、C‑Mc和C‑Mx，其摩尔转化率均高于96%。再一步，通过3种特异性的糖苷水解酶再分别切除前述三种产物各自20位外侧的阿拉伯吡喃糖、阿拉伯呋喃糖和木糖，获得最终产物稀有人参皂苷C‑K，摩尔转化率也均高于98%。本发明提供了一种新的稀有人参皂苷制备路线，并且能够同时高效转化多组分人参皂苷Rb2、Rc和Rb3获得稀有人参皂苷C‑K。
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公开(公告)号：CN117187216B
公开(公告)日：2025-04-08
申请号：CN202311263540.4
申请日：2023-09-27
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从Dictyoglomus thermophilum DSM 3960基因组中克隆得到一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，与现有技术相比，本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha具有优良的耐热性能，对耐热的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha进行耐糖关键位点突变，获得的新型α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha耐糖突变体，其耐糖系数提高了2.3倍以上，该突变体能够特异性水解淫羊藿苷的R2位上通过α‑1糖苷键连接的鼠李糖，能够利用突变体高效转化淫羊藿苷生成淫羊藿次苷I。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106995829B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201710332977.7
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种酶法转化淫羊藿总黄酮制备淫羊藿苷元的方法，由耐热α‑L‑鼠李糖苷酶和耐热β‑葡萄糖苷酶组成的双酶体系协同转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷生成淫羊藿苷元。本发明可将淫羊藿总黄酮中多组分黄酮类化合物（淫羊藿苷、朝霍定A、朝霍定B及朝霍定C等）几乎完全转化为目的产物；最适作用温度高，使得底物及中间产物都具有良好溶解性，不需要助溶剂；酶解时间短，得率高。本发明制备得到的淫羊藿苷元针对肝癌、肺癌、结肠癌和乳腺癌的增殖抑制作用显著高于转化前的淫羊藿总黄酮各单体。
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公开(公告)号：CN107384896A
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201710685211.7
申请日：2017-08-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种制备稀有人参皂苷的酶组合物及其应用，应用于转化多组分人参皂苷制备人参皂苷C-K等稀有人参皂苷。其特征在于一种嗜热菌来源能够一次性切除人参皂苷母核3位上两个糖基的β-葡萄糖苷酶，获得稀有组分C-Y、C-Mc和C-Mx，其摩尔转化率均高于96%。再一步，通过3种特异性的糖苷水解酶再分别切除前述三种产物各自20位外侧的阿拉伯吡喃糖、阿拉伯呋喃糖和木糖，获得最终产物稀有人参皂苷C-K，摩尔转化率也均高于98%。本发明提供了一种新的稀有人参皂苷制备路线，并且能够同时高效转化多组分人参皂苷Rb2、Rc和 Rb3获得稀有人参皂苷C-K。
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公开(公告)号：CN106995829A
公开(公告)日：2017-08-01
申请号：CN201710332977.7
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P17/06 , C12N9/2402 , C12N9/2445 , C12Y302/01021 , C12Y302/0104
Abstract: 一种酶法转化淫羊藿总黄酮制备淫羊藿苷元的方法，由耐热α‑L‑鼠李糖苷酶和耐热β‑葡萄糖苷酶组成的双酶体系协同转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷生成淫羊藿苷元。本发明可将淫羊藿总黄酮中多组分黄酮类化合物（淫羊藿苷、朝霍定A、朝霍定B及朝霍定C等）几乎完全转化为目的产物；最适作用温度高，使得底物及中间产物都具有良好溶解性，不需要助溶剂；酶解时间短，得率高。本发明制备得到的淫羊藿苷元针对肝癌、肺癌、结肠癌和乳腺癌的增殖抑制作用显著高于转化前的淫羊藿总黄酮各单体。
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公开(公告)号：CN117187216A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311263540.4
申请日：2023-09-27
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从Dictyoglomus thermophilum DSM 3960基因组中克隆得到一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，与现有技术相比，本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha具有优良的耐热性能，对耐热的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha进行耐糖关键位点突变，获得的新型α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha耐糖突变体，其耐糖系数提高了2.3倍以上，该突变体能够特异性水解淫羊藿苷的R2位上通过α‑1糖苷键连接的鼠李糖，能够利用突变体高效转化淫羊藿苷生成淫羊藿次苷I。
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公开(公告)号：CN108467858A
公开(公告)日：2018-08-31
申请号：CN201810110773.3
申请日：2018-02-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种α-L-鼠李糖苷酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次克隆并重组表达能特异性降解α-1,2糖苷键的α-L-鼠李糖苷酶BtRha，弥补了α-L-鼠李糖苷酶水解鼠李糖与鼠李糖之间的α-1,2糖苷键的空白；该酶能高效特异性降解朝霍定C转化为淫羊藿苷，在酶用量1.5 U/mL，pH 5.5，55℃的条件下水解1 g/L的朝霍定C 90 min,摩尔转化率高达90.5%以上。
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