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公开(公告)号：CN103055464B
公开(公告)日：2016-03-02
申请号：CN201210539590.6
申请日：2012-12-14
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种利用漆酶降解辛基酚的方法，步骤为：制备LacA酶液，调节辛基酚浓度在25～200 mg/L，加入漆酶为LacA的酶液浓度0.5～3U/mL，控制反应体系的pH3.5～6，温度保持在25～50℃条件下降解。本发明采用的是生物酶催化工艺，具有去除效率高，方便，安全无污染等突出特点；本发明比较不同的同工酶对辛基酚的专一性，选取对辛基酚专一性最强的漆酶，添加介体物质，能提高漆酶的反应效率，减少反应时间，从而降低漆酶的使用量，降低了运行成本。本发明能高效地降解辛基酚，当辛基酚浓度为100 mg/L时，在适宜催化条件下反应12 h降解率可以达到97.2%。
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公开(公告)号：CN104762281A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510102927.0
申请日：2015-03-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种α-鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；该重组酶最适反应温度高、热稳定性好，在优选条件下可高效表达目的蛋白，因此可在选择性水解芦丁、橘皮苷、柚皮苷、樱桃苷、柴胡皂苷及其它连接α-鼠李糖苷的黄酮类化合物或萜类香气前体化合物中的鼠李糖等领域中具有广泛的应用。
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公开(公告)号：CN104328098A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410510836.6
申请日：2014-09-28
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
CPC classification number: C12N9/2445 , C12P33/005 , C12P33/20 , C12Y302/01021
Abstract: 本发明属于基因工程技术及生物医药领域，具体涉及一种β-葡萄糖苷酶及其制备方法与应用，尤其是应用于酶法转化制备人参皂苷20(S)-Rg3的应用。本发明所述β-葡萄糖苷酶能耐受高温，在70℃下保温3h酶活力几乎不变；本发明所述β-葡萄糖苷酶对人参皂苷Rb1的转化能力强，本发明所述β-葡萄糖苷酶与人参皂苷Rb1孵育60min，人参皂苷Rb1几乎完全转化为人参皂苷20(S)-Rg3；本发明所述制备人参皂苷20(S)-Rg3的方法酶促转化反应中间产物少，转化后产物人参皂苷20(S)-Rg3纯度高。
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公开(公告)号：CN114891709A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210591529.X
申请日：2022-05-27
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种碳苷黄酮‑山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的制备方法，以构建的重组菌为基础，通过转化策略的调整及转化条件的优化，抑制了山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的降解，大幅度提高了重组菌产山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的产量，山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的产量达到16.6g/L，底物的摩尔转化率达到94.87％。在此基础上，通过大孔树脂的筛选和纯化体系的优化，实现了山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的高效制备。
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公开(公告)号：CN107164436B
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN201710333064.7
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12P19/60 , C12P19/14 , A61K31/7048 , A61P35/00
Abstract: β‑葡萄糖苷酶在转化淫羊藿总黄酮制备宝霍苷I中的应用。该方法是利用一种特异的β‑葡萄糖苷酶定向转化淫羊藿总黄酮，使淫羊藿总黄酮中含量丰富的多个组分都转化为宝霍苷I。本发明筛选获得的一种β‑葡萄糖苷酶，不仅能高效地酶解淫羊藿总黄酮中富含的淫羊藿苷、朝霍定A、箭藿苷A制得宝霍苷I，而且能特异地将朝霍定B和箭藿苷B制得宝霍苷I。本发明酶使用成本低，只需一种酶；总黄酮的转化效率高，摩尔转化率大于95%。而且所制备的宝霍苷I对乳腺癌、肝癌、结肠癌、肺癌等肿瘤增殖的抑制作用等方面的药理学活性显著高于淫羊藿总黄酮中其它的主要淫羊藿苷。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105838692B
公开(公告)日：2019-05-07
申请号：CN201610300086.9
申请日：2016-05-06
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 来源于黑曲霉NL‑1木聚糖酶的多位点突变体及其应用，所述多位点突变体含有如下8个突变位点中的至少6个，其中N28突变为H，N29突变为D，Y45突变为M，N47突变为L，S58突变为H，D76突变为R，G116突变为C，Y135突变为C。突变体使得黑曲霉NL‑1木聚糖酶的耐热耐碱性能得到显著提升。
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公开(公告)号：CN107164436A
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201710333064.7
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12P19/60 , C12P19/14 , A61K31/7048 , A61P35/00
Abstract: β‑葡萄糖苷酶在转化淫羊藿总黄酮制备宝霍苷I中的应用。该方法是利用一种特异的β‑葡萄糖苷酶定向转化淫羊藿总黄酮，使淫羊藿总黄酮中含量丰富的多个组分都转化为宝霍苷I。本发明筛选获得的一种β‑葡萄糖苷酶，不仅能高效地酶解淫羊藿总黄酮中富含的淫羊藿苷、朝霍定A、箭藿苷A制得宝霍苷I，而且能特异地将朝霍定B和箭藿苷B制得宝霍苷I。本发明酶使用成本低，只需一种酶；总黄酮的转化效率高，摩尔转化率大于95%。而且所制备的宝霍苷I对乳腺癌、肝癌、结肠癌、肺癌等肿瘤增殖的抑制作用等方面的药理学活性显著高于淫羊藿总黄酮中其它的主要淫羊藿苷。
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公开(公告)号：CN106086046A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610405275.2
申请日：2016-06-08
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12N9/1048 , C12N9/1051 , C12N9/1241 , C12N15/70 , C12N2800/101 , C12N2800/22 , C12P19/60 , C12Y204/01007
Abstract: 一组DNA分子及其重组质粒和重组大肠杆菌及其产紫云英苷的应用，包括经优化的拟南芥糖基转移酶基因78D2，蔗糖磷酸化酶基因Basp，尿苷酰转移酶基因ugpA和蔗糖透性酶基因cscB，其核酸序列分别如SEQ ID NO:1，SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:6所示。该重组菌能高效表达全基因优化的糖基转移酶基因op78D2，该酶能高效、特异性的在山萘酚3位羟基进行糖基化；同时通过强化重组菌UDP‑glucose的合成途径，使重组菌能高效供应UDP‑glucose，解除重组菌合成紫云英苷的瓶颈。最终通过发酵条件的优化，实现了紫云英苷的高效合成。
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公开(公告)号：CN105695553A
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201610219176.5
申请日：2016-04-08
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P33/20 , C12N9/2402 , C12N9/2445 , C12P33/06 , C12Y302/01021 , C12Y302/01055
Abstract: 一种酶法制备稀有人参皂苷20(S)-Rg3的方法，利用来源于Thermotoga petrophila的β-葡萄糖苷酶和Thermotoga thermarum DSM 5069的阿拉伯呋喃糖苷酶，降解人参皂苷Rb1、Rb2和Rc生产20(S)-Rg3。本发明可以提高资源利用率和降低人参皂苷原料的提取成本，本发明中所述的β-葡萄糖苷酶和阿拉伯呋喃糖苷酶能在1h内几乎将人参皂苷Rb1、Rb2和Rc完全转化为20(S)-Rg3。
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公开(公告)号：CN105238826A
公开(公告)日：2016-01-13
申请号：CN201510812991.8
申请日：2015-11-20
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
IPC: C12P17/06
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及β-葡萄糖苷酶的用途及用其制备黄芩素的方法。所述β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还提供了酶水解黄芩苷的方法，将一种耐热耐糖β-葡萄糖苷酶固定化后在缓冲溶液中将黄芩苷水解，获得黄芩素。该酶具有很强的产物耐受性，无需在双相体系中就能将黄芩苷水解完全，避免了双相体系中的有机溶剂使酶活力下降。固定化酶可以多次利用。本发明得到纯度较高的黄芩素，纯度在95％以上。本发明所述的方法中乙酸乙酯萃取得到黄芩素后，可用有机溶剂重结晶，得到高纯度的黄芩素，纯度在98％以上。
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