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公开(公告)号：CN106995829A
公开(公告)日：2017-08-01
申请号：CN201710332977.7
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P17/06 , C12N9/2402 , C12N9/2445 , C12Y302/01021 , C12Y302/0104
Abstract: 一种酶法转化淫羊藿总黄酮制备淫羊藿苷元的方法，由耐热α‑L‑鼠李糖苷酶和耐热β‑葡萄糖苷酶组成的双酶体系协同转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷生成淫羊藿苷元。本发明可将淫羊藿总黄酮中多组分黄酮类化合物（淫羊藿苷、朝霍定A、朝霍定B及朝霍定C等）几乎完全转化为目的产物；最适作用温度高，使得底物及中间产物都具有良好溶解性，不需要助溶剂；酶解时间短，得率高。本发明制备得到的淫羊藿苷元针对肝癌、肺癌、结肠癌和乳腺癌的增殖抑制作用显著高于转化前的淫羊藿总黄酮各单体。
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公开(公告)号：CN107641621B
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN201710448315.6
申请日：2017-06-14
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及酶工程及生物医药技术领域，尤其涉及一种糖苷酶组合物及酶法制备淫羊藿苷元的方法。本发明筛选获得了一种能有效降解淫羊藿苷母核结构上鼠李糖残基的α‑L‑鼠李糖苷酶及能高效降解其母核结构中葡萄糖残基耐高温β‑葡萄糖苷酶，随后通过双酶转化高效制备具有完全保持原有生物活性的淫羊藿苷元。本发明提供的组合物中，两种糖苷酶的最适反应温度都较高，底物溶解性较好，不需要助溶剂；并且酶解时间短，得率高。实验表明，采用本发明提供的糖苷酶组合物对淫羊藿苷进行酶解，摩尔转化率为98.3％，淫羊藿苷元的得率为90％。
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公开(公告)号：CN106318957A
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201610945270.9
申请日：2016-10-26
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12N9/2402 , C12P19/60 , C12Y302/0104
Abstract: 土曲霉CCF 3059 α-L-鼠李糖苷酶突变体及其应用，包括如SEQ ID NO:2所示的D594Q基因、SEQ ID NO:3所示的D594R基因、SEQ ID NO:4所示的D594C基因、SEQ ID NO:5所示的G827K基因、SEQ ID NO:6所示的G827M基因和SEQ ID NO:7所示的G828A基因。突变酶MRha-D594Q 最适温度和原酶MRha均为65℃；但与原酶MRha相比，突变酶MRha-D594Q在70℃和75℃时仍保持较高的酶活性；添加山梨醇能够进一步提高突变酶MRha-D594Q的热稳定性，在70℃的半衰期提高了7.8倍。
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公开(公告)号：CN105567430B
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201510996304.2
申请日：2015-12-25
Applicant: 南京林业大学
IPC: C11B9/02
Abstract: 一种复合酶辅助制备桂花浸膏和精油的方法，采用β葡萄糖苷酶和果胶酶组成的复合酶，在添加桂花的柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲溶液中水解反应而得。与传统的溶剂直接提取法相比，采用β葡萄糖苷酶和果胶酶复配对桂花进行处理，桂花浸膏得率由2.04%提高到3.27%，桂花浸膏得率提高了60%，高于文献报道的单一使用β葡萄糖苷酶处理的40%。桂花精油得率由直接提取的1.77%提高到2.71%，精油得率提高了53%，典型香气成分显著提高。复合酶效果优于使用单一酶。
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公开(公告)号：CN106318957B
公开(公告)日：2019-05-07
申请号：CN201610945270.9
申请日：2016-10-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 土曲霉CCF 3059 α‑L‑鼠李糖苷酶突变体及其应用，包括如SEQ ID NO:2所示的D594Q基因、SEQ ID NO:3所示的D594R基因、SEQ ID NO:4所示的D594C基因、SEQ ID NO:5所示的G827K基因、SEQ ID NO:6所示的G827M基因和SEQ ID NO:7所示的G828A基因。突变酶MRha‑D594Q最适温度和原酶MRha均为65℃；但与原酶MRha相比，突变酶MRha‑D594Q在70℃和75℃时仍保持较高的酶活性；添加山梨醇能够进一步提高突变酶MRha‑D594Q的热稳定性，在70℃的半衰期提高了7.8倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107641621A
公开(公告)日：2018-01-30
申请号：CN201710448315.6
申请日：2017-06-14
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及酶工程及生物医药技术领域，尤其涉及一种糖苷酶组合物及酶法制备淫羊藿苷元的方法。本发明筛选获得了一种能有效降解淫羊藿苷母核结构上鼠李糖残基的α-L-鼠李糖苷酶及能高效降解其母核结构中葡萄糖残基耐高温β-葡萄糖苷酶，随后通过双酶转化高效制备具有完全保持原有生物活性的淫羊藿苷元。本发明提供的组合物中，两种糖苷酶的最适反应温度都较高，底物溶解性较好，不需要助溶剂；并且酶解时间短，得率高。实验表明，采用本发明提供的糖苷酶组合物对淫羊藿苷进行酶解，摩尔转化率为98.3％，淫羊藿苷元的得率为90％。
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公开(公告)号：CN105567430A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201510996304.2
申请日：2015-12-25
Applicant: 南京林业大学
IPC: C11B9/02
Abstract: 一种复合酶辅助制备桂花浸膏和精油的方法，采用β葡萄糖苷酶和果胶酶组成的复合酶，在添加桂花的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中水解反应而得。与传统的溶剂直接提取法相比，采用β葡萄糖苷酶和果胶酶复配对桂花进行处理，桂花浸膏得率由2.04%提高到3.27%，桂花浸膏得率提高了60%，高于文献报道的单一使用β葡萄糖苷酶处理的40%。桂花精油得率由直接提取的1.77%提高到2.71%，精油得率提高了53%，典型香气成分显著提高。复合酶效果优于使用单一酶。
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公开(公告)号：CN104762281A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510102927.0
申请日：2015-03-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种α-鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；该重组酶最适反应温度高、热稳定性好，在优选条件下可高效表达目的蛋白，因此可在选择性水解芦丁、橘皮苷、柚皮苷、樱桃苷、柴胡皂苷及其它连接α-鼠李糖苷的黄酮类化合物或萜类香气前体化合物中的鼠李糖等领域中具有广泛的应用。
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公开(公告)号：CN106995829B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201710332977.7
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种酶法转化淫羊藿总黄酮制备淫羊藿苷元的方法，由耐热α‑L‑鼠李糖苷酶和耐热β‑葡萄糖苷酶组成的双酶体系协同转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷生成淫羊藿苷元。本发明可将淫羊藿总黄酮中多组分黄酮类化合物（淫羊藿苷、朝霍定A、朝霍定B及朝霍定C等）几乎完全转化为目的产物；最适作用温度高，使得底物及中间产物都具有良好溶解性，不需要助溶剂；酶解时间短，得率高。本发明制备得到的淫羊藿苷元针对肝癌、肺癌、结肠癌和乳腺癌的增殖抑制作用显著高于转化前的淫羊藿总黄酮各单体。
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公开(公告)号：CN104762281B
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201510102927.0
申请日：2015-03-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种α‑鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；该重组酶最适反应温度高、热稳定性好，在优选条件下可高效表达目的蛋白，因此可在选择性水解芦丁、橘皮苷、柚皮苷、樱桃苷、柴胡皂苷及其它连接α‑鼠李糖苷的黄酮类化合物或萜类香气前体化合物中的鼠李糖等领域中具有广泛的应用。
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