公开(公告)号：CN107354143A

公开(公告)日：2017-11-17

申请号：CN201710689763.5

申请日：2017-08-11

Applicant: 南京林业大学 ,  江苏康缘药业股份有限公司

Inventor： 赵林果 ,  石学佳 ,  萧伟 ,  王振中 ,  李琦

IPC: C12N11/08 ,  C12P19/14

CPC classification number: Y02P20/588 ,  C12N11/08 ,  C12N9/2445 ,  C12P19/14 ,  C12Y302/01021

Abstract: 一种固定化β-葡萄糖苷酶及其制备方法和应用，步骤为（1）大孔树脂预处理；（2）大孔吸附树脂NKA-9聚醚酰亚胺表面改性；（3）大孔树脂吸附β-葡萄糖苷酶；（4）戊二醛交联反应修饰。本发明首次利用金属离子Zn2+作为利用大孔吸附树脂固定化β-葡萄糖苷酶的激活剂、热稳定剂。Zn2+的参与使β-葡萄糖苷酶的催化效率提高了20%以上；使固定化酶NKA-9II的催化效率提高了92%以上。相对于起始酶活，Zn2+的参与，在85℃条件下，温育7 h，固定化酶NKA-9II的酶活还保持在80%以上；90℃条件下温育7 h，固定化酶NKA-9II的酶活还保持在54%以上。

公开(公告)号：CN104611313B

公开(公告)日：2017-11-17

申请号：CN201510026295.4

申请日：2015-01-19

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  解静聪 ,  赵东霞 ,  萧伟 ,  丁岗 ,  王振中

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/63 ,  C12P33/20

Abstract: 一种β‑葡萄糖苷酶及其制备方法与应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述β‑葡萄糖苷酶热稳定性优异，能耐受高温；本发明所述β‑葡萄糖苷酶具有较高β‑1,6‑糖苷键水解能力同时具有较强的α‑1，6‑阿拉伯吡喃糖苷键水解能力，对人参皂苷Rb1和Rb2的转化能力强，本发明所述β‑葡萄糖苷酶与人参皂苷Rb1和Rb2孵育一定时间后，检测到人参皂苷Rb1或Rb2几乎完全转化为人参皂苷Rd；本发明所述TPEBGL1的制备方法不需要诱导剂IPTG即可高效表达。

公开(公告)号：CN107164436A

公开(公告)日：2017-09-15

申请号：CN201710333064.7

申请日：2017-05-12

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  裴建军 ,  解静聪 ,  赵顺懿 ,  房仙颖 ,  陈安娜

IPC: C12P19/60 ,  C12P19/14 ,  A61K31/7048 ,  A61P35/00

Abstract: β‑葡萄糖苷酶在转化淫羊藿总黄酮制备宝霍苷I中的应用。该方法是利用一种特异的β‑葡萄糖苷酶定向转化淫羊藿总黄酮，使淫羊藿总黄酮中含量丰富的多个组分都转化为宝霍苷I。本发明筛选获得的一种β‑葡萄糖苷酶，不仅能高效地酶解淫羊藿总黄酮中富含的淫羊藿苷、朝霍定A、箭藿苷A制得宝霍苷I，而且能特异地将朝霍定B和箭藿苷B制得宝霍苷I。本发明酶使用成本低，只需一种酶；总黄酮的转化效率高，摩尔转化率大于95%。而且所制备的宝霍苷I对乳腺癌、肝癌、结肠癌、肺癌等肿瘤增殖的抑制作用等方面的药理学活性显著高于淫羊藿总黄酮中其它的主要淫羊藿苷。

公开(公告)号：CN106086046A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610405275.2

申请日：2016-06-08

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 裴建军 ,  董萍 ,  赵林果 ,  解静聪

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/60 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/1048 ,  C12N9/1051 ,  C12N9/1241 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/101 ,  C12N2800/22 ,  C12P19/60 ,  C12Y204/01007

Abstract: 一组DNA分子及其重组质粒和重组大肠杆菌及其产紫云英苷的应用，包括经优化的拟南芥糖基转移酶基因78D2，蔗糖磷酸化酶基因Basp，尿苷酰转移酶基因ugpA和蔗糖透性酶基因cscB，其核酸序列分别如SEQ ID NO:1，SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:6所示。该重组菌能高效表达全基因优化的糖基转移酶基因op78D2，该酶能高效、特异性的在山萘酚3位羟基进行糖基化；同时通过强化重组菌UDP‑glucose的合成途径，使重组菌能高效供应UDP‑glucose，解除重组菌合成紫云英苷的瓶颈。最终通过发酵条件的优化，实现了紫云英苷的高效合成。

公开(公告)号：CN105695553A

公开(公告)日：2016-06-22

申请号：CN201610219176.5

申请日：2016-04-08

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  赵东霞 ,  解静聪 ,  裴建军 ,  李琦 ,  房仙颖

IPC: C12P33/20 ,  C12P33/06 ,  C12N9/42 ,  C12N9/24 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

CPC classification number: C12P33/20 ,  C12N9/2402 ,  C12N9/2445 ,  C12P33/06 ,  C12Y302/01021 ,  C12Y302/01055

Abstract: 一种酶法制备稀有人参皂苷20(S)-Rg3的方法，利用来源于Thermotoga petrophila的β-葡萄糖苷酶和Thermotoga thermarum DSM 5069的阿拉伯呋喃糖苷酶，降解人参皂苷Rb1、Rb2和Rc生产20(S)-Rg3。本发明可以提高资源利用率和降低人参皂苷原料的提取成本，本发明中所述的β-葡萄糖苷酶和阿拉伯呋喃糖苷酶能在1h内几乎将人参皂苷Rb1、Rb2和Rc完全转化为20(S)-Rg3。

公开(公告)号：CN105238826A

公开(公告)日：2016-01-13

申请号：CN201510812991.8

申请日：2015-11-20

Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 ,  南京林业大学

Inventor： 萧伟 ,  赵林果 ,  王振中 ,  裴建军 ,  李石平 ,  赵祎武 ,  黄文哲 ,  温建辉

IPC: C12P17/06

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及β-葡萄糖苷酶的用途及用其制备黄芩素的方法。所述β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还提供了酶水解黄芩苷的方法，将一种耐热耐糖β-葡萄糖苷酶固定化后在缓冲溶液中将黄芩苷水解，获得黄芩素。该酶具有很强的产物耐受性，无需在双相体系中就能将黄芩苷水解完全，避免了双相体系中的有机溶剂使酶活力下降。固定化酶可以多次利用。本发明得到纯度较高的黄芩素，纯度在95％以上。本发明所述的方法中乙酸乙酯萃取得到黄芩素后，可用有机溶剂重结晶，得到高纯度的黄芩素，纯度在98％以上。

公开(公告)号：CN104726504A

公开(公告)日：2015-06-24

申请号：CN201510142163.8

申请日：2015-03-27

Applicant: 南京理工大学 ,  南京林业大学

Inventor： 谢慧芳 ,  赵林果 ,  李琦 ,  惠娟 ,  沈锦优

IPC: C12P7/26

CPC classification number: C12P7/26

Abstract: 本发明公开了一种5,5’-去氢二香草乙酮的漆酶催化合成方法。包括如下步骤：将香草乙酮溶解于水或pH为3.5~6.0的缓冲溶液中，配制成溶液，控制温度在20~60°C，加入重组漆酶，于摇床中反应；反应结束后静置沉淀，洗涤沉淀物，于不高于50℃下干燥，得到产品5,5’-去氢二香草乙酮。本发明的反应原料和重组漆酶本身均为天然产物，无毒，反应过程中利用空气中的氧，不需要添加其他氧化剂；本发明反应条件温和，室温下即可进行，产物单一，易于纯化，纯化步骤中不涉及酸碱等化学药剂，产品纯度高。

公开(公告)号：CN104651336A

公开(公告)日：2015-05-27

申请号：CN201510053105.8

申请日：2015-02-02

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  解静聪 ,  赵东霞 ,  萧伟 ,  丁岗 ,  王振中

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12P33/20

CPC classification number: C12N9/2402 ,  C12P33/005 ,  C12P33/20 ,  C12Y302/01055

Abstract: α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶及其在制备人参皂苷Rd中的应用，属于基因工程技术及生物医药领域，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶对人参皂苷Rc的转化能力强，本发明所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶与人参皂苷Rc孵育一定时间后经检测，人参皂苷Rc几乎完全转化为人参皂苷Rd。本发明所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶对阿拉伯糖具有较高的耐受能力，且不被葡萄糖反馈抑制。

公开(公告)号：CN104082659A

公开(公告)日：2014-10-08

申请号：CN201410264474.7

申请日：2014-06-13

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  房仙颖 ,  姜艳 ,  曹福亮 ,  裴建军 ,  吴彩娥 ,  王佳宏 ,  张旭晖

IPC: A23L1/09 ,  A23L1/28 ,  A61K36/16 ,  A61P25/28 ,  A61K31/715

CPC classification number: A23L33/00 ,  A23L29/30 ,  A23V2002/00 ,  A61K31/715 ,  A61K36/16 ,  A23V2200/30 ,  A61K2300/00

Abstract: 增强记忆的组合物及其应用，组合物的有效成分为云芝多糖和银杏黄酮。分别提取药用真菌云芝多糖，天然药用植物银杏叶中的黄酮类化合物，云芝多糖与银杏黄酮联合用药时，可显著性缩短痴呆小鼠的逃避潜伏期、提高空间记忆能力、增加正确反应次数、延长首次犯错潜伏期、减少错误次数及减轻脑组织细胞状态异常及，并显著降低胶原纤维酸性蛋白GFAP的表达，对痴呆模型小鼠的记忆有一定的改善作用。

公开(公告)号：CN103045565A

公开(公告)日：2013-04-17

申请号：CN201210540712.3

申请日：2012-12-14

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 裴建军 ,  庞倩 ,  赵林果 ,  王飞

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19

Abstract: 一种耐高糖β-葡萄糖苷酶-CBD融合酶及其表达基因和应用，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。与现有的β-葡萄糖苷酶相比，本发明提供的融合酶（BGL-CBD）具有以下特点：（1）纤维素结合能力强，融合酶（1μg/μL）与4%wt微晶纤维素孵育30min，98%融合酶被纤维素吸附；（2）能有效降解纤维二糖，融合酶（0.15μg/μL）在8h内对10%wt的纤维二糖降解率为95%；（3）能耐高浓度的葡萄糖，其耐糖系数Ki为1000mmol/L。