公开(公告)号：CN111793602A

公开(公告)日：2020-10-20

申请号：CN202010655732.X

申请日：2020-07-09

Applicant: 贵州大学

Inventor： 胡安东 ,  文明 ,  程振涛 ,  姜海波 ,  温贵兰 ,  杨颖

IPC: C12N5/078

Abstract: 本发明公开了一种鲟鱼外周血白细胞的分离方法，将鲟鱼外周血加入白细胞分离液中离心，由上至下分别为血浆层、白细胞富集层、白细胞分离液层和红细胞堆积层；收集白细胞富集层，得到鲟鱼外周血白细胞；白细胞分离液的制备方法：将Percoll原液与质量分数为8.5％的NaCl水溶液按照体积比为9：1的比例混匀，得到100％的Percoll液，再将质量分数为0.85％的NaCl水溶液与100％的Percoll液按照总体积100，体积比为33～23：67～77的比例混匀，离心转速设置为400～800×g、离心时间设置为20～30min，得到白细胞分离液。该分离方法具有操作简便、得到的白细胞数量多、存活率高的特点。

公开(公告)号：CN106480219A

公开(公告)日：2017-03-08

申请号：CN201611157569.4

申请日：2016-12-15

Applicant: 贵州大学

Inventor： 程振涛 ,  马光强 ,  周碧君 ,  文明 ,  王开功 ,  岳筠 ,  李毅

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/14

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2600/16 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2545/113

Abstract: 本发明涉及一种畜禽葡萄球菌对大环内酯类药物耐药基因三重PCR检测试剂盒，该试剂盒包括扩增待测细菌耐药基因的三对PCR引物以及模板制备试剂和细菌耐药基因多重扩增试剂。较传统药敏试验，该多重方法将检测时间从数天缩短至1天内完成。病原菌经常含有多种大环内酯酶基因，而该技术满足了同时检测多种基因的需求，提高了检测的准确性和特异性。该技术可用于检测临床分离菌中三种大环内酯类药物耐药基因。

公开(公告)号：CN102919516A

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201210426173.0

申请日：2012-10-31

Applicant: 贵州大学

Inventor： 王开功 ,  郭素环 ,  周碧君 ,  文明 ,  程振涛 ,  夏先林

IPC: A23K1/06 ,  A23K1/16

CPC classification number: Y02P60/873

Abstract: 本发明公开了一种酒糟新型生物饲料及其生产工艺，包括酒糟培养基和菌种，其特征在于：酒糟培养基的配方为：鲜白酒糟50%～70%、玉米粉5%～15%、菜籽粕5%～15%、水15%～25%，此处的百分比指各配方占酒糟培养基的总重量之比；每80～120g酒糟培养基中另加硫酸亚铁12～18mg、硫酸锌10～15mg、硫酸锰8～12mg、硫酸铜12～18mg、磷酸氢钙1～3g；菌种包括枯草芽孢杆菌、绿色木霉、嗜酸乳杆菌和班图酒香酵母；工艺流程包括：进行拮抗试验，菌种扩大培养、纯度及活性检查，酒糟培养基的配制及灭菌，酒糟微生物固态发酵和9～11d后酒糟生物饲料的处理；周期短、蛋白质含量高。

公开(公告)号：CN102634602A

公开(公告)日：2012-08-15

申请号：CN201210142472.1

申请日：2012-05-10

Applicant: 贵州大学

Inventor： 程振涛 ,  张双翔 ,  周碧君 ,  文明 ,  王开功

IPC: C12Q1/68 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了一种绵羊肺炎支原体环介导等温扩增检测试剂盒的原料配方及制备、使用方法。其原料配方为：1000~2000μL反应液，100~200μLBstDNA聚合酶，50~100μL阳性对照，50~100μL阴性对照，1mL-2mL液体石蜡，1mL-2mL超纯水；反应液包括内引物混合液、外引物混合液、LAMP反应缓冲液、Mg2+及dNTP，五种液体于反应液中体积比为2:2:2.5:2:1。制备方法包括以下内容：第一，最佳反应温度与时间的确定；第二，特异性检测、敏感性检测和临床应用性检测；第三，试剂盒包装。本发明对山羊养殖场绵羊肺炎支原体感染山羊疑似病例病原检测具有快速、简易、准确的特点。

公开(公告)号：CN102288756A

公开(公告)日：2011-12-21

申请号：CN201110188924.5

申请日：2011-07-07

Applicant: 贵州大学

Inventor： 刘忠伟 ,  周碧君 ,  程振涛 ,  文明 ,  王开功 ,  嵇辛勤 ,  岳筠 ,  汪德生

IPC: G01N33/571 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明公开了一种能够检测山羊痘抗原的山羊痘反向间接血凝诊断试剂的制备方法及检测方法。制备方法为：以戊二醛和绵羊红细胞混合制备红细胞悬液，与等量的纯化山羊痘IgG混合，经搅拌、离心、洗涤，用含1%新生犊牛血清的PBS配成1%致敏红细胞，此即为山羊痘反向间接血凝诊断试剂。经优化的制备条件是：采用戊二醛单醛化法固定红细胞，致敏红细胞浓度0.8%～1.0%，IgG含量控制在1.5～1.55mg.ml-1，可以达到较好的标记效果；该试剂用于检测山羊痘病毒抗原按常规反向间接血凝试验方法进行，反应温度20～25℃，反应时间50min。该方法具有较好的特异性、敏感性和可重复性，可用于兽医临床上山羊痘抗原快速检测。

公开(公告)号：CN102247611A

公开(公告)日：2011-11-23

申请号：CN201110189038.4

申请日：2011-07-07

Applicant: 贵州大学

Inventor： 文明 ,  高颖 ,  程振涛 ,  王开功 ,  周碧君

IPC: A61L9/01 ,  C12N1/20 ,  A61L101/52

Abstract: 本发明公开了一种微生物除臭剂及其制备方法，其菌种组成为：嗜酸乳杆菌106~109个/mL、短小芽孢杆菌106~109个/mL、枯草芽孢杆菌106~109个/mL、荧光假单胞菌105~107个/mL、沼泽红假单胞菌105~107个/mL、班图酒香酵母菌104~106个/mL、平常假丝酵母菌104~106个/mL、扩张青霉104~106个/mL、米根霉104~106个/mL、绿色木霉104~106个/mL、细黄链霉菌104~106个/mL和灰色链霉菌104~106个/mL。本发明能有效降低恶臭气体的释放量，为畜禽养殖场恶臭的有效处理和环境保护提供技术支持。

公开(公告)号：CN114470182A

公开(公告)日：2022-05-13

申请号：CN202210130056.3

申请日：2022-02-11

Applicant: 贵州大学

Inventor： 程振涛 ,  方天 ,  尹德晶 ,  岳筠 ,  文明 ,  朱二鹏 ,  冯孝傲

IPC: A61K39/235 ,  A61K9/14 ,  A61P31/20 ,  C12N15/34 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种禽腺病毒血清4型mRNA疫苗及其制备方法和应用。该禽腺病毒血清4型mRNA疫苗包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。本发明基于前期对FAdV‑4Fiber2基因的生物学分析结果，通过基因工程技术构建重组体外转录质粒pGEM‑3Zf(+)‑Fiber2，并应用体外转录技术转录并修饰出成熟的mRNA分子，使用纳米脂质粒(LNPs)包裹后投递到动物体内。本发明选择Fiber2基因研制针对FAdV‑4的mRNA疫苗，可有效抵御高毒力FAdV‑4的感染，填补有效防控FAdV‑4疫苗的空缺。

公开(公告)号：CN113444743A

公开(公告)日：2021-09-28

申请号：CN202110693336.0

申请日：2021-06-22

Applicant: 贵州大学

Inventor： 程振涛 ,  杨鹏 ,  张双翔 ,  岳筠 ,  吴燕 ,  袁林

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/64 ,  C12N15/62 ,  A61K39/02 ,  A61K39/39 ,  A61P11/00 ,  A61P31/04 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了含佐剂基因的羊支原体肺炎二价核酸疫苗的构建方法，具体步骤如下：步骤一、Mo/Mmc基因组的提取：S1、Mo/Mmc贵州株的复苏与培养；S2、Mo/Mmc贵州株DNA的提取；步骤二、P113‑LppA‑IL‑2融合基因扩增：S1、粘膜免疫佐剂基因、绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种抗原基因扩增；S2、P113‑LppA融合基因扩增；S3、P113‑LppA‑IL‑2融合基因扩增；步骤三、含粘膜免疫佐剂基因的羊支原体肺炎二价核酸疫苗的制备。本发明通过选择两个不同抗原基因和黏膜免疫佐剂基因研制出核酸疫苗，可有效针对羊支原体肺炎DNA疫苗免疫效果弱等问题，解决目前疫苗研发所面临的诸多问题。

公开(公告)号：CN111869799A

公开(公告)日：2020-11-03

申请号：CN202010655525.4

申请日：2020-07-09

Applicant: 贵州大学

Inventor： 胡安东 ,  文明 ,  程振涛 ,  姜海波 ,  温贵兰 ,  杨颖

IPC: A23K50/80 ,  A23K20/163 ,  A01K61/10

Abstract: 本发明公开了一种促进冷水鱼免疫功能的饲料的制备方法，在基础饲料的制备过程中，按照每千克基础饲料添加180mg～220mg微生物源免疫增强剂，将微生物源免疫增强剂与基础饲料各原料进行混合形成混合料，将混合料按照常规方法制备即得所需饲料；所述微生物源免疫增强剂为纯度＞90％的壳寡糖。该饲料在满足鲟鱼生长所需营养需求的基础上，还能有效发挥免疫增强剂的促免疫作用，提高鲟鱼生长率及免疫力，有效降低药物的使用量及损耗，进一步提高其应用价值和意义。

公开(公告)号：CN102313803A

公开(公告)日：2012-01-11

申请号：CN201110166920.7

申请日：2011-06-21

Applicant: 贵州大学

Inventor： 刘忠伟 ,  周碧君 ,  程振涛 ,  文明 ,  王开功 ,  嵇辛勤 ,  岳筠 ,  汪德生

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明公开了一种山羊痘正向间接血凝诊断试剂及其制备方法和检测方法，该血凝诊断试剂中山羊痘病毒抗原致敏红细胞的含量为0.6～1.2%，纯化山羊痘病毒抗原含量为20～200μg/ml，与现有常用的琼脂扩散实验相比，本发明以纯化山羊痘病毒抗原致敏醛化绵羊红细胞制备了山羊痘正向间接血凝诊断试剂，可快速、准确、简便的检测山羊痘病毒抗体，在50分钟内即可判定结果，并且能检测出较低效价的抗体，具有较好的特异性、敏感性和可重复性，可广泛应用于兽医临床上山羊痘病毒抗体的快速、大量检测，为疾病预防、诊断和防控提供依据。